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上海研生實(shí)業(yè)有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第10年

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堿性磷酸酶(ALP)重組蛋白

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷(xiāo)商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2023-03-22 21:13:02瀏覽次數(shù):310次

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供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) 英文名稱(chēng) Recombinant Alkaline Phosphatase (ALP)
物種 Bos taurus; Bovine (Cattle,,牛) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
品牌 研生
堿性磷酸酶(ALP)重組蛋白的相關(guān)產(chǎn)品:酪氨suan3/色氨suan5單加氧mei活化蛋白θ(YWHAq)重組蛋白英文名稱(chēng):Recombina Tyrosine 3/Tryptophan 5 Monooxygenase Activation Protein Theta (YWHAq)弗林(FUR)重組蛋白英文名稱(chēng):Recombina Furin (FUR)非神經(jīng)元性烯醇化mei(ENO1)重組蛋白

公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!

產(chǎn)品名稱(chēng)

英文名稱(chēng)

物種

堿性磷酸酶(ALP)重組蛋白

Recombinant Alkaline Phosphatase (ALP)

Bos taurus; Bovine (Cattle,牛)

商品介紹:

AKP; ALKP; Basic Phosphatase

酶與激酶

代謝通路

腫瘤免疫

感染免疫

肝膽病學(xué)

骨骼代謝

物種:Bos taurus; Bovine (Cattle,,牛)

來(lái)源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::細(xì)胞膜

預(yù)測(cè)分子量:39.2kDa

實(shí)際分子量:42kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽:N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 90%

等電點(diǎn):7.3

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.   

蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清),。

3.通過(guò)親和,,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白,。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

圖片5.png

圖片1.png


相關(guān)產(chǎn)品:

碳酸酐酶Ⅰ(CA1)重組蛋白R(shí)ecombinant Furin (FUR)

肽酶抑制因子16(PI16)重組蛋白R(shí)ecombinant Glyoxalase I (GLO1)

肽酶D(PEPD)重組蛋白R(shí)ecombinant Glucocerebrosidase (GBA)

肽基脯氨酰異構(gòu)酶F(PPIF)重組蛋白R(shí)ecombinant Hyaluronan Synthase 1 (HAS1)   

注意事項(xiàng):

1,、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類(lèi)以及組織塊的大小來(lái)調(diào)整固定時(shí)間,。

2、雖然作用溫和,,但能硬化組織,,固定時(shí)間過(guò)久會(huì)導(dǎo)致組織變脆,切片時(shí)易碎,。因此固定時(shí)間通常不宜超過(guò) 24 小時(shí),。

3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,,可造成假陰性的染色,,影響免疫組化結(jié)果。因此,,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測(cè)時(shí),,有時(shí)需要對(duì)抗原先進(jìn)行修復(fù),然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作,。

4,、本產(chǎn)品對(duì)人體有害,操作時(shí)請(qǐng)小心,,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi),。

5、為了您的安全和健康,,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作                                            

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作,;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min,;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法,、BCA法),;

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,,溫和振蕩15 min,;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法,、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

MCP4產(chǎn)品名稱(chēng): 單核細(xì)胞趨化蛋白4抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Rabbit

FRYL產(chǎn)品名稱(chēng): FRYL蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow, Horse, Sheep

SOSSC產(chǎn)品名稱(chēng): 單鏈DNA結(jié)合蛋白相互作用蛋白1交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Rabbit

Calsequestrin產(chǎn)品名稱(chēng): 肌鈣集蛋白/收鈣su抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit

human CD8/PE-Cy7產(chǎn)品名稱(chēng): PE-Cy7標(biāo)記小鼠抗人CD8單克隆抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian

PADI4產(chǎn)品名稱(chēng): 相關(guān)基因抗體交叉反應(yīng): Human

HSBP1產(chǎn)品名稱(chēng): 熱休克因子結(jié)合蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human, Bee

Desmocollin 2 + 3產(chǎn)品名稱(chēng): 橋粒糖蛋白2/橋粒糖蛋白3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Horse

Slc26a5產(chǎn)品名稱(chēng): 感覺(jué)神經(jīng)性常染色體隱性遺傳61抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Rabbit

Gas1產(chǎn)品名稱(chēng): 生長(zhǎng)休止特定蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Sheep   

堿性磷酸酶(ALP)重組蛋白小鼠神經(jīng)細(xì)胞粘附分子1(NCAM1)ELISA試劑盒NCAM1神經(jīng)細(xì)胞粘附分子1ELISA試劑盒Mouse Neural cell adhesion molecule 1,NCAM1 ELISA kit

小鼠少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘糖蛋白抗體(OMgp-Ab)ELISA試劑盒OMgp-Ab少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘糖蛋白抗體elisamei聯(lián)免疫試劑盒Mouse anti-oligodendrocyte-myelin glycoprotein antibody,OMgp-Ab ELISA Kit

小鼠趨化因子配體1(CCL1)ELISA試劑盒CCL1趨化因子配體1elisa kitMouse chemokine (C-C motif) ligand 1 ELISA Kit

小鼠趨化因子5(CCL5/RANTES)ELISA試劑盒CCL5/RANTES趨化因子5ELISA試劑盒Mouse CCL5/RANTES ELISA Kit

小鼠葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(GRP78)ELISA試劑盒GRP78葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78elisa檢測(cè)試劑盒Mouse Glucose Regulated Protein 78,GRP78 Elisa kit 


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