細(xì)胞特性：

1)】組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽性,。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%,。

4)不含有 HIV-1,、 HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌,。

5)細(xì)胞生長方式：上皮樣,，不規(guī)則細(xì)胞,，貼壁培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱：小鼠T細(xì)胞;CTLL-2

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào)：YS-02X9838

細(xì)胞生長實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長良好,，形態(tài)正常

儲(chǔ)存條件：2℃-8℃,，避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,；Glutamax（invitrogen 35050061），1%,；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070）,，1%；雙抗,，1%,。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài),，細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長期,，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,，過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,，而且消化時(shí)不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低,，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好,，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管）,，10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管,。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度,，吹打不可太用力,，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,，不是加入凍存液再吹打,。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格,，我從10%-90%都用過,，問題不大，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛,！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,，放在4度冰箱預(yù)冷,。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍",，傳統(tǒng)的方法,，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h,，-20度2h或更長,，-80度過夜，最后液氮,。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇,，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,，很方便，省了包棉花,、4度,、-20度了。

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途,，選擇適宜的培養(yǎng)基,，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈,。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),，標(biāo)記劃線，加熱溶解,，補(bǔ)充水分,，測定酸堿度,，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測定,。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi),。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明,。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL,；三角瓶中裝100～150ml）,，塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準(zhǔn)備滅菌,。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性,，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的,。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大,，蒸汽溫度就越高,。因此,，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下,，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性,，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng),，殺菌效果好。

YY1/FITC 熒光素標(biāo)記核轉(zhuǎn)錄因子YY1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

CX3CR1(CX3C-chemokine receptor 1) CX3C趨化因子受體1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

神經(jīng)元突觸前膜蛋白抗體  Amph 0.1ml

ZBTB3 英文名稱： 鋅指蛋白ZBTB3抗體 0.2ml

DRES17 英文名稱： 癌相關(guān)蛋白DRES17抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-FADD(Ser194) 磷酸化Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

CX3CR1(CX3C-chemokine receptor 1) CX3C趨化因子受體1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

ALCAM Human 人白細(xì)胞活化粘附因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 CK-HMW 高分子量細(xì)胞角蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh NR2C/NMDAR2C 谷受體2C抗體 規(guī)格 0.2ml

PBS (0.01M pH7.4) packages 磷酸鹽緩沖液(0.01M pH7.4)(干粉包) 1000ml

TGF beta 2 英文名稱： 轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)抗體 0.1ml

C7orf44 英文名稱： 7號(hào)染色體開放閱讀框44抗體 0.2ml

 CK-HMW 高分子量細(xì)胞角蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Goat  Bovine IgG/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記的羊抗IgG 0.1ml

FRMD4A 英文名稱： FRMD4A蛋白抗體 0.2ml

結(jié)腸癌抗原糖蛋白A33抗體  GPA33 0.2ml

 Phospho-HP1 gamma (Ser83) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化染色質(zhì)相關(guān)蛋白1-γ抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-SGK1 (Thr256) 磷酸化糖皮質(zhì)調(diào)節(jié)激酶1抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit  human IgM 兔抗人IgM (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格： 1mg
小鼠T細(xì)胞;CTLL-2LEIBOVITZ’S L15培養(yǎng)基1/10升（片劑）游離甲狀腺素（FT4）ELISA試劑盒--動(dòng)物,，人

ISCOVE’S MDM培養(yǎng)基1/10升（片劑）L-賴乙酯

GRACE’S 昆蟲培養(yǎng)基1/10升（片劑）人葡萄糖酶（GCK）ELISA試劑盒,GCK ELISA

干細(xì)胞檢測試劑專題小鼠α甘露糖苷酶（α Manase）ELISA試劑盒,

名稱規(guī)格小鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子（vWF）ELISA試劑盒,

胚胎干細(xì)胞（ES）基礎(chǔ)培養(yǎng)基500毫升小鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物（PAP）ELISA試劑盒,

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞（MEF）*培養(yǎng)基500毫升抗糖蛋白抗體（GP）ELISA試劑盒--動(dòng)物,，人

胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)生長因子5毫升百日咳素（PT）ELISA試劑盒--動(dòng)物，人

胚胎干細(xì)胞基質(zhì)膠溶液10毫升血吸蟲（schistosoma）ELISA試劑盒--動(dòng)物，人

胚胎干細(xì)胞補(bǔ)充培養(yǎng)基100毫升輪狀病抗原（RV Ag）ELISA試劑盒--動(dòng)物，人

人體胚胎干細(xì)胞條件培養(yǎng)基100毫升鈣調(diào)素（CAM）ELISA試劑盒--動(dòng)物,，人

人體胚胎干細(xì)胞*培養(yǎng)基100毫升小鼠P選擇素（P-Selectin/CD62P）ELISA試劑盒,

小鼠胚胎干細(xì)胞*培養(yǎng)基100毫升小鼠β內(nèi)酰酶抑制劑（BLI）ELISA試劑盒,

大鼠胚胎干細(xì)胞*培養(yǎng)基100毫升小鼠游離甲狀腺素（FT4）ELISA試劑盒,

滋養(yǎng)細(xì)胞法胚胎干細(xì)胞繁殖試劑盒10次小鼠補(bǔ)體片斷5a（C5a）ELISA試劑盒,