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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2023-03-22 14:09:34瀏覽次數(shù):287次
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主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱(chēng) | Recombinant NUAK Family SNF1 Like Kinase 1 (NUAK1) |
種屬 | Homo sapiens (Human,,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床,!
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 物種 |
NUAK家族SNF1樣激酶1(NUAK1)重組蛋白 | Recombinant NUAK Family SNF1 Like Kinase 1 (NUAK1) | Homo sapiens (Human,,人) |
商品介紹:
ARK5; OMPHK1; NuaK1; AMP-Activated Protein Kinase Family Member 5; Omphalocele kinase 1 酶與激酶 物種:Homo sapiens (Human,,人) 來(lái)源:原核表達(dá) 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定) 亞細(xì)胞定位::細(xì)胞核, 細(xì)胞質(zhì) 預(yù)測(cè)分子量:29.9kDa 實(shí)際分子量:34kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū)) 片段與標(biāo)簽:Val421~Ser658 with N-terminal His Tag 緩沖液成份:PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose. 性狀:凍干粉 純度:> 97% 等電點(diǎn):6.2 應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過(guò)親和,,離子交換,,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。
5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性,。
相關(guān)產(chǎn)品:
睪蛋白(TEST1)重組蛋白英文名稱(chēng):Recombinant Testisin (TEST1)Rattus norvegicus (Rat,,大鼠)
睪丸特異性激酶1(TESK1)重組蛋白英文名稱(chēng):Recombinant Testis Specific Kinase 1 (TESK1)Homo sapiens (Human,,人)
睪丸特異性激酶2(TESK2)重組蛋白英文名稱(chēng):Recombinant Testis Specific Kinase 2 (TESK2)Mus musculus (Mouse,,小鼠)
谷氨氨肽酶(ENPEP)重組蛋白英文名稱(chēng):Recombinant Aminopeptidase A (ENPEP)Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
注意事項(xiàng):
1,、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類(lèi)以及組織塊的大小來(lái)調(diào)整固定時(shí)間,。
2,、雖然作用溫和,,但能硬化組織,,固定時(shí)間過(guò)久會(huì)導(dǎo)致組織變脆,,切片時(shí)易碎,。因此固定時(shí)間通常不宜超過(guò) 24 小時(shí),。
3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,,影響免疫組化結(jié)果。因此,,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測(cè)時(shí),,有時(shí)需要對(duì)抗原先進(jìn)行修復(fù),,然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。
4,、本產(chǎn)品對(duì)人體有害,操作時(shí)請(qǐng)小心,,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi),。
5,、為了您的安全和健康,,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,,注意低溫操作,;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,,4℃離心5 min,;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,,即為全蛋白提取物,,蛋白定量(Bradford法,、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min,;
6. 14,000rpm,,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法,、BCA法),;
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
CDKN3產(chǎn)品名稱(chēng): 細(xì)胞周期蛋白依賴(lài)性激mei蛋白3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep
C9orf93產(chǎn)品名稱(chēng): 9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框93抗體交叉反應(yīng): Human, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
SDCCAG3產(chǎn)品名稱(chēng): 抗原3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep
Carboxypeptidase H產(chǎn)品名稱(chēng): 胰羧肽meiE抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
TIP39產(chǎn)品名稱(chēng): 甲狀旁(激)su及類(lèi)似物抗體產(chǎn)品別名: 牙根管肽; 甲狀旁激su2;
C4orf29產(chǎn)品名稱(chēng): 4號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框29抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Horse, Rabbit
ILF2產(chǎn)品名稱(chēng): 白細(xì)胞介su增強(qiáng)子結(jié)合因子2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Horse
STOX1產(chǎn)品名稱(chēng): STOX1蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Pig, Cow
應(yīng)用類(lèi)型: Other英文名稱(chēng): Histone H3 (Butyryl-Lys14)英文別名: H3K122me2; Butyryl-Histone H3 Histone H3/l; H3.1; H3/d; H3C1; H3C10; H3C11; H3C12; H3C2; H3C3; H3C4; H3C7; H3C8; H3FD;
F1 operon positive regulatory protein產(chǎn)品名稱(chēng): 肺耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體(C端)產(chǎn)品別名: F1-操縱子陽(yáng)性調(diào)節(jié)蛋白;
NUAK家族SNF1樣激酶1(NUAK1)重組蛋白人輔激活因子激活因子(COAA)ELISA試劑盒COAA輔激活因子激活因子ELISA試劑盒Human Coactivator Activator(COAA)ELISA Kit
人輔肌動(dòng)蛋白α4(ACTN4)ELISA試劑盒ACTN4輔肌動(dòng)蛋白α4elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Actinin Alpha 4(ACTN4)ELISA Kit
人輔肌動(dòng)蛋白α3(ACTN3)ELISA試劑盒ACTN3輔肌動(dòng)蛋白α3elisa檢測(cè)試劑盒Human Actinin Alpha 3(ACTN3)ELISA Kit
人輔肌動(dòng)蛋白α1(ACTN1)ELISA試劑盒ACTN1輔肌動(dòng)蛋白α1elisa kitHuman Actinin Alpha 1(ACTN1)ELISA Kit
人弗林蛋白mei(FUR)ELISA試劑盒FUR弗林蛋白meiELISA試劑盒Human Furin(FUR)ELISA Kit
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