產(chǎn)品名稱：肝癌細胞;SMMC-7721

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號：YS-02X9725

細胞生長實驗 ：細胞生長良好,，形態(tài)正常

儲存條件：2℃-8℃，避光儲存

運輸條件：冰袋冷藏運輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細胞特性：

1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織,。

2)細胞鑒定：細胞免疫熒光染色為陽性,。

3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1,、 HBV,、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌,。

5)細胞生長方式：上皮樣,，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng),。

細胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1） 準備RPMI-1640 培養(yǎng)基,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%；Glutamax（invitrogen 35050061）,，1%,；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%,；雙抗,，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細胞處理：

1） 復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?50px皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細胞密度,。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。

注意事項：

（1）凍存前細胞狀態(tài),，細胞最好在對數(shù)生長期,，細胞密度適合，剛剛發(fā)生細胞融合,，過密或連成片的細胞狀態(tài)不好，而且消化時不容易分散,；

（2）凍存的密度不宜過低,，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好，我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107）,，一瓶凍一管（1.5ml凍存管）,，10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細胞）分成兩管。

（3）消化和吹打,，切忌胰酶消化過度,，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡,。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液,。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格,，我從10%-90%都用過，問題不大,，個人認為10%-20%可以了,，能節(jié)約處就節(jié)約點嘛！另外，凍存液可以在處理細胞前配置,，放在4度冰箱預(yù)冷,。細胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管,。

（5）關(guān)于“慢凍",，傳統(tǒng)的方法，LLC細胞凍存管用棉花包好,，4度2h,，-20度2h或更長，-80度過夜,，最后液氮,。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室，推薦使用程序降溫盒,，內(nèi)裝異丙醇,，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便,，省了包棉花,、4度、-20度了,。

Runx3/FITC 熒光素標記新型抑癌基因/一種新發(fā)現(xiàn)的抑癌基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Ghrelin 腦腸肽(一種新的生長釋放肽)多肽抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

線粒體融合蛋白1抗體  Mfn1 0.1ml

SIAH2 英文名稱： 泛素連接酶Siah2 0.1ml

FGFBP2 英文名稱： 纖維細胞生長因子結(jié)合蛋白2抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-PI3K p85(Tyr458)/p55(Tyr199) 磷酸化磷脂酰肌醇激酶抗體 規(guī)格 0.1ml

Ghrelin 腦腸肽(一種新的生長釋放肽)多肽抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

IL-13 人白介素-13Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 Chloramphenicol 氯霉素抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh NUDEL/NDEL1 中心粒蛋白Nudel抗體 規(guī)格 0.2ml

MTT 噻唑蘭 250mg

TMUB1 英文名稱： 跨膜和泛素樣結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 0.2ml

CSFV Polyprotein 英文名稱： 豬瘟病毒抗體 0.1ml

 Chloramphenicol 氯霉素抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Goat  human IgG whole serum 羊抗人IgG抗血清 1ml

Fructose 6 Phosphate Kinase 英文名稱： 6磷酸果糖激酶抗體 0.1ml

胰島素受體底物-1抗體  IRS-1 0.2ml

 PTEN/MMAC1 /FITC 熒光素標記一種抑制基因抗體(C端)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-PRKCA(Thr637) 磷酸化蛋白激酶C抗體 規(guī)格 0.1ml

BSA (bovine serum albumin) 血清白蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 5g
肝癌細胞;SMMC-7721連翹酯苷E(標準品)商陸皂苷元通用型蛋白巰基/結(jié)合巰基含量熒光定量檢測試劑盒

羅通定/延胡索乙素/氫巴馬汀(標準品）芍藥內(nèi)酯苷蛋白巰基/結(jié)合巰基含量熒光定量檢測試劑盒

表沒食子兒茶素沒食子酸酯（標準品）圣草次苷,圣草枸楷苷組織蛋白巰基/結(jié)合巰基含量熒光定量檢測試劑盒

去氧膽酸（標準品）石吊蘭素  體液蛋白巰基/結(jié)合巰基含量熒光定量檢測試劑盒

鈣黃綠素乙酰甲酯石杉堿植物蛋白巰基/結(jié)合巰基含量熒光定量檢測試劑盒

煙酰（標準品）石杉堿甲/酵母蛋白巰基/結(jié)合巰基含量熒光定量檢測試劑盒

丁東莨菪堿（標準品）石杉堿乙蛋白巰基/結(jié)合巰基含量熒光定量檢測試劑盒

雪膽素甲（標準品）石松靈堿通用型硝酸鹽含量比色法定量檢測試劑盒

使用步驟：

一）準確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途,，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈,。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),，標記劃線，加熱溶解,，補充水分,，測定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計測定,。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi),。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用人子宮成纖維細胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明,。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml）,，塞好棉塞用牛皮紙包扎好,，準備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌,，常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死,，但細菌的芽胞有較強的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的,。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,，即壓力越大，蒸汽溫度就越高,。因此,，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下,，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性,，因為蒸汽的穿透力強,，殺菌效果好。