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當前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>天然蛋白,、重組蛋白>>重組蛋白/RP>> 雙腎上腺皮質(zhì)激素樣激酶3(DCLK3)重組蛋白
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所 在 地上海市
更新時間:2023-03-22 20:18:05瀏覽次數(shù):303次
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主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Recombinant Doublecortin Like Kinase 3 (DCLK3) |
種屬 | Mus musculus (Mouse,,小鼠) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
商品介紹:
DCAMKL3; DCDC3C; Doublecortin And CaM Kinase-Like 3; Doublecortin domain-containing protein 3C; Serine/threonine-protein kinase DCLK3 酶與激酶 物種:Mus musculus (Mouse,,小鼠) 來源:原核表達 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細胞定位::分泌 預(yù)測分子量:21.4kDa 實際分子量:21kDa(差異分析請參閱說明書) 片段與標簽:Asp635~Ser790 with N-terminal His Tag 緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.) 性狀:凍干粉 純度:> 90% 等電點:4.8 應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
公司產(chǎn)品僅供科研使用,,不得用于臨床,!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
雙腎上腺皮質(zhì)激素樣激酶3(DCLK3)重組蛋白 | Recombinant Doublecortin Like Kinase 3 (DCLK3) | Mus musculus (Mouse,小鼠) |
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白,。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,,離子交換,,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性,。
相關(guān)產(chǎn)品:
永離有絲分裂基因A相關(guān)激酶2(NEK2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Never In Mitosis Gene A Related Kinase 2 (NEK2)Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(NOS2)活性蛋白英文名稱:Active Nitric Oxide Synthase 2, Inducible (NOS2)Mus musculus (Mouse,,小鼠)
誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(NOS2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Nitric Oxide Synthase 2, Inducible (NOS2)Canis familiaris; Canine (Dog,,犬)
原卟啉原氧化酶(PPOX)重組蛋白英文名稱:Recombinant Protoporphyrinogen Oxidase (PPOX)Homo sapiens (Human,人)
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,,離心10000轉(zhuǎn)/分,,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,,即為全蛋白提取物,,蛋白定量(Bradford法、BCA法),;
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,,吸去培養(yǎng)基后,,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,,溫和振蕩15 min,;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法,、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
PPM1D產(chǎn)品名稱: 原基因WIP1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow
Septin 8產(chǎn)品名稱: 細胞分化蛋白SEPT8抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow
ATG7產(chǎn)品名稱: 自噬相關(guān)蛋白7單克隆抗體交叉反應(yīng): Human
PRR9產(chǎn)品名稱: 富含脯氨suan蛋白9抗體交叉反應(yīng): Human
KCNK17產(chǎn)品名稱: 鉀離子通道蛋白17抗體交叉反應(yīng): Human
Cyclin D1產(chǎn)品名稱: 周期suD1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Rabbit, Sheep
HGV Polyprotein產(chǎn)品名稱: 庚型毒多聚蛋白/Hepatitis G Virus抗體標記: Unconjugated
EpCAM產(chǎn)品名稱: 上皮細胞粘附分子(CD326)單克隆抗體交叉反應(yīng): Human
Laminin Beta 2產(chǎn)品名稱: 層粘連蛋白β2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
beta-Amyloid (1-40)產(chǎn)品名稱: β淀粉樣肽1-40單克隆抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
雙腎上腺皮質(zhì)激素樣激酶3(DCLK3)重組蛋白人Nei內(nèi)切核suanmeiⅧ樣蛋白1(NEIL1)ELISA試劑盒NEIL1Nei內(nèi)切核suanmeiⅧ樣蛋白1elisa kitHuman Nei Endonuclease VIII Like Protein 1(NEIL1)ELISA Kit
人Necdin蛋白(NDN)ELISA試劑盒NDNNecdin蛋白ELISA試劑盒Human Necdin(NDN)ELISA Kit
人Nebulette蛋白(NEBL)ELISA試劑盒NEBLNebulette蛋白elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Nebulette(NEBL)ELISA Kit
人NAP關(guān)聯(lián)蛋白(SNAPAP)ELISA試劑盒SNAPAPNAP關(guān)聯(lián)蛋白elisa檢測試劑盒Human SNAP Associated Protein(SNAPAP)ELISA Kit
人NAD激mei(NADK)ELISA試劑盒NADKNAD激meielisa kitHuman NAD Kinase(NADK)ELISA Kit
注意事項:
1,、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應(yīng)當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間,。
2,、雖然作用溫和,但能硬化組織,,固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時,。
3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,,影響免疫組化結(jié)果,。因此,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,,有時需要對抗原先進行修復(fù),,然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。
4,、本產(chǎn)品對人體有害,,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi),。
5,、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作
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