您好, 歡迎來到化工儀器網(wǎng)! 登錄| 免費(fèi)注冊| 產(chǎn)品展廳| 收藏商鋪|
當(dāng)前位置:上海研生實(shí)業(yè)有限公司>>天然蛋白、重組蛋白>>活性蛋白/AP>> 顆粒酶M(GZMM)活性蛋白
參 考 價(jià) | 面議 |
產(chǎn)品型號(hào)
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2023-03-22 22:18:49瀏覽次數(shù):486次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
---|---|---|---|
主要用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Active Granzyme M (GZMM) |
物種 | Homo sapiens (Human,,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用,,不得用于臨床,!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
顆粒酶M(GZMM)活性蛋白 | Active Granzyme M (GZMM) | Homo sapiens (Human,,人) |
商品介紹:
GZM-M; LMET1; MET1; Hu-Met-1; Met-ase; Lymphocyte Met Ase 1; Met-1 serine protease; Natural killer cell granular protease 酶與激酶 物種:Homo sapiens (Human,,人) 緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300) 性狀:凍干粉 純度:> 90% 等電點(diǎn):10.3 應(yīng)用:Cellculture;ActivityAssays. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清),。
3.通過親和,離子交換,,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白,。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。
5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
相關(guān)產(chǎn)品:
精脒/精胺N1-乙?;D(zhuǎn)移酶1(SAT1)重組蛋白R(shí)ecombinant Lysyl Oxidase Like Protein 3 (LOXL3)
精胺氧化酶(SMOX)重組蛋白R(shí)ecombinant Hydroxyacid Oxidase 1 (HAO1)
精胺合酶(SMS)重組蛋白R(shí)ecombinant TTK Protein Kinase (TTK)
精氨酰氨基肽酶(RNPEP)重組蛋白R(shí)ecombinant Salt Inducible Kinase 2 (SIK2)
注意事項(xiàng):
1,、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時(shí)間,。
2,、雖然作用溫和,但能硬化組織,,固定時(shí)間過久會(huì)導(dǎo)致組織變脆,,切片時(shí)易碎。因此固定時(shí)間通常不宜超過 24 小時(shí),。
3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,,影響免疫組化結(jié)果,。因此,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時(shí),,有時(shí)需要對抗原先進(jìn)行修復(fù),,然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。
4,、本產(chǎn)品對人體有害,,操作時(shí)請小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi),。
5、為了您的安全和健康,,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作,;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,,離心10000轉(zhuǎn)/分,,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,,即為全蛋白提取物,,蛋白定量(Bradford法、BCA法),;
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,,溫和振蕩15 min,;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法,、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
Thrombin Activation peptide fragment 1產(chǎn)品名稱: 凝mei(凝因子II)激活肽1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, GuineaPig
SMAD5產(chǎn)品名稱: 細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD5抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep, GuineaPig
C1ORF111產(chǎn)品名稱: 1號(hào)染色體開放閱讀框111抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow
HMG4/HMGB3產(chǎn)品名稱: 高遷移率家族蛋白3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
Cathepsin S產(chǎn)品名稱: 組織蛋白meiS抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Horse, Rabbit
sLOX 1產(chǎn)品名稱: 可溶性凝集su樣氧化受體1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
Phospho-Mcl1 (Ser159 + Thr163)產(chǎn)品名稱: 髓樣細(xì)胞白-1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse
IGFL1產(chǎn)品名稱: 胰島su生長因子樣家族成員1抗體交叉反應(yīng): Human
SNTB2/Syntrophin-3產(chǎn)品名稱: 互養(yǎng)蛋白3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow
NDRG3產(chǎn)品名稱: 抑基因NDRG3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Horse, Rabbit
顆粒酶M(GZMM)活性蛋白大鼠激肽原(KNG)ELISA試劑盒KNG激肽原elisamei聯(lián)免疫試劑盒Rat kininogen,KNG ELISA Kit
大鼠基質(zhì)金屬蛋白mei14(MMP-14)ELISA試劑盒MMP-14基質(zhì)金屬蛋白mei14elisa檢測試劑盒Rat Matrix Metalloproteinase 14,MMP-14 ELISA Kit
大鼠肌質(zhì)網(wǎng)膜鈣ATPmei(SERCA)ELISA試劑盒SERCA肌質(zhì)網(wǎng)膜鈣ATPmeielisa kitRat Sarcoplasmic/endoplasmic reticulum calcium ATPase 3 ELISA Kit
大鼠活性氧調(diào)制因子1(ROMO1)ELISA試劑盒ROMO1活性氧調(diào)制因子1ELISA試劑盒Rat Reactive oxygen species modulator 1,ROMO1 ELISA kit
大鼠活化suA受體抗體IgM(ACV-RAb IgM)ELISA試劑盒ACV-RAb IgM活化suA受體抗體IgMelisamei聯(lián)免疫試劑盒Rat anti-Activin A receptor antibody IgM,ACV-RAb IgM ELISA Kit
請輸入賬號(hào)
請輸入密碼
請輸驗(yàn)證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性,、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),,化工儀器網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險(xiǎn),,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量,。