細(xì)胞特性：

1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織,。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽性,。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1,、 HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長方式：上皮樣,，不規(guī)則細(xì)胞,，貼壁培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱：胰腺腺泡上皮癌;HPAC

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號：YS-02X9867

細(xì)胞生長實驗 ：細(xì)胞生長良好,，形態(tài)正常

儲存條件：2℃-8℃,，避光儲存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,；Glutamax（invitrogen 35050061）,，1%,；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070）,，1%,；雙抗,，1%,。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

注意事項：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài),，細(xì)胞最好在對數(shù)生長期,，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,，過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,，而且消化時不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低,，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管）,，10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細(xì)胞）分成兩管,。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度,，吹打不可太用力,，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,，不是加入凍存液再吹打,。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格,，我從10%-90%都用過,，問題不大，個人認(rèn)為10%-20%可以了,，能節(jié)約處就節(jié)約點嘛,！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,，放在4度冰箱預(yù)冷,。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍",，傳統(tǒng)的方法,，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h,，-20度2h或更長,，-80度過夜，最后液氮,。對于條件較好的實驗室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實驗室,，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇,，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,，很方便，省了包棉花,、4度,、-20度了。

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途,，選擇適宜的培養(yǎng)基,，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),，標(biāo)記劃線,，加熱溶解，補(bǔ)充水分,，測定酸堿度,，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi),。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上,，再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明,。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL,；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好,，準(zhǔn)備滅菌,。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的,。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,，即壓力越大,，蒸汽溫度就越高。因此,，在同一溫度條件下,，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,，菌體吸收水分后,，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因為蒸汽的穿透力強(qiáng),，殺菌效果好,。

WNT5A/FITC 熒光素標(biāo)記信號通路Wnt5a抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

CNTF(Ciliary Neurotrophic Factor) 睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1抗體  ABCA1 0.1ml

MOP5 英文名稱： 單核細(xì)胞蛋白5抗體 0.2ml

phospho-EPB41 (Tyr418 + Tyr660) 英文名稱： 磷酸化紅細(xì)胞膜條帶4.1蛋白抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-FoxO1(Thr24)/FoxO3a(Thr32) 磷酸化叉頭蛋白家族抗體 規(guī)格 0.1ml

CNTF(Ciliary Neurotrophic Factor) 睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

galectin 9 半乳糖凝集素9(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

 CD46/MCP 膜輔蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh p53 DINP1 p53誘導(dǎo)核蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml

FAS Kit Human 人 FAS / CD95 / APO-1 / TNFRSF6 ELISA配對抗體 ELISA

TET1 英文名稱： Ten-eleven轉(zhuǎn)運(yùn)基因1蛋白抗體 0.2ml

Cyclin L 英文名稱： 周期素L抗體 0.2ml

 CD46/MCP 膜輔蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Goat  Mouse IgG/Bio 生物素標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 0.1ml

FOXN2 英文名稱： 叉頭蛋白N2抗體 0.2ml

半乳糖凝集素-3抗體  Galectin-3 0.1ml

 -phospho-P70 S6 Kinase beta (Thr228) /FITC 熒光素標(biāo)記抗磷酸化核糖體S6蛋白激酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-SOX9(Ser181) 磷酸化轉(zhuǎn)錄因子SOX9蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

Goat  human IgG 羊抗人IgG (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格： 1mg
胰腺腺泡上皮癌;HPACBrdU標(biāo)記法細(xì)胞繁殖熒光定量檢測試劑盒10/50 次人纖維介素蛋白（fgl2）ELISA試劑盒,

BrdU標(biāo)記法載玻片細(xì)胞繁殖熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次小鼠β-防御素（β-DF）ELISA試劑盒,

BrdU標(biāo)記法組織凍切片細(xì)胞繁殖熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次小鼠骨退化特異標(biāo)志物（CTX-2）ELISA試劑盒,

BrdU標(biāo)記法組織石蠟切片細(xì)胞繁殖熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次小鼠促腎上腺皮質(zhì)素（ACTH）ELISA試劑盒,

BrdU標(biāo)記法載玻片細(xì)胞繁殖NBT顯色檢測試劑盒10/20次大鼠胞漿型磷脂酶A2（cPLA2）ELISA試劑盒,

BrdU標(biāo)記法組織凍切片細(xì)胞繁殖NBT顯色檢測試劑盒10/20次大鼠視黃醇結(jié)合蛋白（RBP）ELISA試劑盒,

BrdU標(biāo)記法組織石蠟切片細(xì)胞繁殖NBT顯色檢測試劑盒10/20次大鼠可溶性CD14（sCD14）ELISA試劑盒,

細(xì)胞衰老特異性β-半乳糖苷酶原位染色試劑盒100/250次大鼠甲狀腺素抗體（TAb）ELISA試劑盒,

全組織衰老特異性β-半乳糖苷酶原位染色試劑盒10次大鼠甲狀腺球蛋白（TG）ELISA試劑盒,

凍切片組織衰老特異性β-半乳糖苷酶原位染色試劑盒50次大鼠性素結(jié)合球蛋白（SHBG）ELISA試劑盒,

通用型組織/細(xì)胞衰老特異性β-半乳糖苷酶原位染色試劑盒10/100次大鼠相關(guān)血漿蛋白A（PAPP-A）ELISA試劑盒,

細(xì)胞衰老特異性脂褐素靛酚原位染色試劑盒50次大鼠骨成型蛋白7（BMP-7）ELISA試劑盒,

（適合與紅細(xì)胞分別；不適合人體心肌和小鼠腦組織）豬白介素17（IL-17）ELISA試劑盒,

全組織衰老特異性脂褐素靛酚原位染色試劑盒10次綿羊白介素1（IL-1）ELISA試劑盒,

凍切片組織衰老特異性脂褐素靛酚原位染色試劑盒50次兔子間粘附分子1（ICAM-1/CD54）ELISA試劑盒,