產(chǎn)品名稱：神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;SK-N-SH

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào)：YS-02X9723

細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長(zhǎng)良好，形態(tài)正常

儲(chǔ)存條件：2℃-8℃，避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%；Glutamax（invitrogen 35050061）,，1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070）,，1%,；雙抗，1%,。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài),，細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，細(xì)胞密度適合,，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,，過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時(shí)不容易分散,；

（2）凍存的密度不宜過(guò)低,，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107）,，一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管）,，10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管。

（3）消化和吹打,，切忌胰酶消化過(guò)度,，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,，不是加入凍存液再吹打,。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很?chē)?yán)格,，我從10%-90%都用過(guò),，問(wèn)題不大，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛,！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,，放在4度冰箱預(yù)冷,。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管,。

（5）關(guān)于“慢凍",，傳統(tǒng)的方法，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,，4度2h,，-20度2h或更長(zhǎng)，-80度過(guò)夜,，最后液氮,。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室，推薦使用程序降溫盒,，內(nèi)裝異丙醇,，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便,，省了包棉花,、4度、-20度了,。

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類(lèi)和用途,，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈,。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),，標(biāo)記劃線，加熱溶解,，補(bǔ)充水分,，測(cè)定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定,。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi),。

（三）過(guò)濾：將玻璃漏斗置鐵架上,，再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過(guò)濾至透明,。

（四）分裝：將過(guò)濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL,；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好,，準(zhǔn)備滅菌,。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的,。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,，即壓力越大，蒸汽溫度就越高,。因此,，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下,，菌體吸收水分后,，其蛋白質(zhì)易于凝固變性,，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng)，殺菌效果好,。

細(xì)胞特性：

1)】組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織,。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽(yáng)性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%,。

4)不含有 HIV-1,、 HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌,。

5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：上皮樣,，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng),。
V.cholera Ogawa/Biotin 生物素化01群小川型霍亂弧菌抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

GHRP-2 Acetate peptide(Growth hormone-releasing peptides 2) 醋酸促生長(zhǎng)釋放肽2Multi-class antibodies規(guī)格： 1g

黑色素瘤細(xì)胞粘附分子CD146抗體  CD146/MCAM 0.1ml

SARS putative orflab polyprotein 英文名稱： 冠狀病毒抗體 0.2ml

phospho-EphB1/Eph receptor B1(Tyr968) 英文名稱： 磷酸化酪酸蛋白激酶受體B1抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-HDAC4(Ser246)/HDAC5(Ser259)/HDAC7(Ser155) 磷酸化組蛋白去乙?；?/5/7抗體 規(guī)格 0.1ml

GHRP-2 Acetate peptide(Growth hormone-releasing peptides 2) 醋酸促生長(zhǎng)釋放肽2Multi-class antibodies規(guī)格： 1g

DA 人多巴胺Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 Cyclin C 周期素C抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh NF-κB p105/p50(Phospho-Ser373) 磷酸化細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體 規(guī)格 0.1ml

Human Linker for activation of T cell,LAT ELISA Kit 人T細(xì)胞活化連接蛋白 96T

TNF alpha 英文名稱： 壞死因子-α/TNFα抗體 0.1ml

Claudin 15 英文名稱： 緊密連接蛋白15抗體 0.1ml

 Cyclin C 周期素C抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Goat  rat IgG whole serum 羊抗大鼠IgG抗血清 1ml

FOXA2 英文名稱： 肝細(xì)胞核因子3抗體 0.1ml

胰島素受體底物-3抗體  IRS-3 0.2ml

 Phospho-PTEN (Ser380/Thr382/Thr383)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化抑制基因PTEN抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-PRKACB(Thr198) 磷酸化蛋白激酶C亞性抗體 規(guī)格 0.1ml

OVA (ovalbumin) 雞卵白蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 10mg
神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;SK-N-SH舒林酸人參皂苷Rd/酵母非蛋白/游離巰基含量比色法定量檢測(cè)試劑盒

舒林酸(標(biāo)準(zhǔn)品)人參皂苷Rg1非蛋白/游離巰基含量比色法定量檢測(cè)試劑盒

托品酸(標(biāo)準(zhǔn)品)人參皂苷Rg2通用型非蛋白/游離巰基含量熒光定量檢測(cè)試劑盒

α-酮戊二酸(標(biāo)準(zhǔn)品)人參皂苷Rh1非蛋白/游離巰基含量熒光定量檢測(cè)試劑盒

α-酮戊二酸人參皂苷Rh3組織非蛋白/游離巰基含量熒光定量檢測(cè)試劑盒

卡博替尼 ;XL184人參皂苷Ro體液非蛋白/游離巰基含量熒光定量檢測(cè)試劑盒

D-絲乙酯鹽酸鹽鞣花酸植物非蛋白/游離巰基含量熒光定量檢測(cè)試劑盒

馬來(lái)酸阿森那平瑞香素/酵母非蛋白/游離巰基含量熒光定量檢測(cè)試劑盒