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更新時(shí)間:2023-03-22 22:17:02瀏覽次數(shù):286次
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主要用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Active Malic Enzyme 2, NADP+ Dependent, Mitochondr |
物種 | Homo sapiens (Human,,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
商品介紹:
酶與激酶 物種:Homo sapiens (Human,人) 緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300) 性狀:凍干粉 純度:> 90% 等電點(diǎn):- 應(yīng)用:Cellculture;ActivityAssays. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
公司產(chǎn)品僅供科研使用,,不得用于臨床,!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
NADP依賴性蘋果酶2(ME2)活性蛋白 | Active Malic Enzyme 2, NADP+ Dependent, Mitochondrial (ME2) | Homo sapiens (Human,人) |
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清),。
3.通過(guò)親和,,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白,。
4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。
5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
相關(guān)產(chǎn)品:
賴氨酸特異性去甲基化酶4C(KDM4C)重組蛋白R(shí)ecombinant RNA Exonuclease 2 Homolog (REXO2)
賴氨酸特異性去甲基化酶4A(KDM4A)重組蛋白R(shí)ecombinant Relaxin/Insulin Like Family Peptide Receptor 1 (RXFP1)
賴氨酸特異性去甲基化酶3B(KDM3B)重組蛋白R(shí)ecombinant Glucosidase Alpha, Acid (GaA)
賴氨酸tRNA合成酶(KARS)重組蛋白R(shí)ecombinant Ribonuclease A13 (RNASE13)
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,,注意低溫操作,;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,,4℃離心5 min,;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,,蛋白定量(Bradford法,、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,,溫和振蕩15 min,;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法,、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
MMP15產(chǎn)品名稱: 基質(zhì)金屬蛋白mei-15抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse
FGF1產(chǎn)品名稱: suan性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Horse, Rabbit
SLC7A3產(chǎn)品名稱: 溶質(zhì)載體家族蛋白7成員3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Sheep
Mouse CD25(IL2RA)/PE-Cy7產(chǎn)品名稱: PE-Cy7標(biāo)記小鼠CD25單克隆抗體交叉反應(yīng): Mouse
BAG6產(chǎn)品名稱: Bcl2相關(guān)抗凋亡基因6抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
DUX4L4產(chǎn)品名稱: 雙同源盒蛋白4樣蛋白4交叉反應(yīng): Human
CCRK產(chǎn)品名稱: 細(xì)胞周期相關(guān)激mei抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
應(yīng)用類型: IVD原料???英文名稱: Azurocidin/HBP英文別名: Azu 1; Azu1; CAP37; CAP7_HUMAN; cationic antimicrobial protein 37; Cationic antimicrobial protein CAP37; HBP; Heparin binding protein; Heparin-binding protein; HUMAZUR.
CCDC106產(chǎn)品名稱: 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白106抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse
MTM1產(chǎn)品名稱: 肌微管su1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Rabbit
NADP依賴性蘋果酶2(ME2)活性蛋白大鼠磷suan化胰島su受體(phosphorylated ISR)ELISA試劑盒phosphorylated ISR磷suan化胰島su受體elisamei聯(lián)免疫試劑盒 Rat phosphorylated insulin receptor (phosphorylated ISR) ELISA kit
大鼠磷suan化Tau蛋白(pMAPT/pTAU)ELISA試劑盒pMAPT/pTAU磷suan化Tau蛋白elisa檢測(cè)試劑盒Rat phosphorylated microtubule-associated protein tau,pMAPT/pTAU ELISA kit
大鼠磷蛋白關(guān)聯(lián)鞘糖脂微區(qū)1(PAG1)ELISA試劑盒PAG1磷蛋白關(guān)聯(lián)鞘糖脂微區(qū)1elisa kitRat PAG1 ELISA kit
大鼠粒細(xì)胞克隆刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒G-CSF粒細(xì)胞克隆刺激因子ELISA試劑盒Rat G-CSF ELISA Kit
大鼠酪氨suan蛋白激meiJAK3(Jak3)ELISA試劑盒Jak3酪氨suan蛋白激meiJAK3elisamei聯(lián)免疫試劑盒Rat tyrosine-protein kinase JAK3,Jak3 ELISA kit
注意事項(xiàng):
1,、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來(lái)調(diào)整固定時(shí)間。
2,、雖然作用溫和,,但能硬化組織,固定時(shí)間過(guò)久會(huì)導(dǎo)致組織變脆,,切片時(shí)易碎,。因此固定時(shí)間通常不宜超過(guò) 24 小時(shí)。
3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,,使之不能充分暴露,,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果,。因此,,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測(cè)時(shí),有時(shí)需要對(duì)抗原先進(jìn)行修復(fù),,然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作,。
4、本產(chǎn)品對(duì)人體有害,,操作時(shí)請(qǐng)小心,,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
5,、為了您的安全和健康,,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作
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請(qǐng)輸驗(yàn)證碼
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