細(xì)胞特性：

1)】組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽(yáng)性,。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%,。

4)不含有 HIV-1,、 HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌,。

5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：上皮樣,，不規(guī)則細(xì)胞,，貼壁培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱(chēng)：腦瘤細(xì)胞;SF767

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào)：YS-02X9944

細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長(zhǎng)良好,，形態(tài)正常

儲(chǔ)存條件：2℃-8℃,，避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,；Glutamax（invitrogen 35050061），1%,；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070）,，1%；雙抗,，1%,。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài),，細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，細(xì)胞密度適合,，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,，過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時(shí)不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過(guò)低,，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好,，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管）,，10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管,。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過(guò)度,，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡,。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液,。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很?chē)?yán)格,，我從10%-90%都用過(guò)，問(wèn)題不大,，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛！另外,，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,，移入凍存管,。

（5）關(guān)于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法,，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,，4度2h，-20度2h或更長(zhǎng),，-80度過(guò)夜,，最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,，推薦使用程序降溫盒,，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,，很方便,，省了包棉花、4度,、-20度了,。

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱(chēng)量試劑：根據(jù)不同的菌類(lèi)和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈,。

（二）校正pH值：將稱(chēng)量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),，標(biāo)記劃線，加熱溶解,，補(bǔ)充水分,，測(cè)定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定,。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi),。

（三）過(guò)濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,，將上述培養(yǎng)基倒入其中過(guò)濾至透明,。

（四）分裝：將過(guò)濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml）,，塞好棉塞用牛皮紙包扎好,，準(zhǔn)備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌,，常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性,，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的,。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大,，蒸汽溫度就越高,。因此，在同一溫度條件下,，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后,，其蛋白質(zhì)易于凝固變性,，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng)，殺菌效果好,。

Phospho-Smad3 (Ser423/425) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

CD31 (PECAM-1) 血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子-1(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

陽(yáng)離子轉(zhuǎn)運(yùn)器1抗體  OCT1 0.2ml

STK3 英文名稱(chēng)： 絲酸/蘇酸蛋白激酶3抗體 0.2ml

Phospho-ELk1(Thr417) 英文名稱(chēng)： 磷酸化細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-NPM (Thr199) 磷酸化核仁磷酸蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

CD31 (PECAM-1) 血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子-1(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

OAT-1 (Organic anion transporter 1)human 陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1(人源)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

  CD44v10 CD44V10抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh P53(wt-p53) (D2F7) 抑制基因野生型P53單抗 規(guī)格 0.1ml

SEMA4D Kit Mouse 小鼠 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 ELISA配對(duì)抗體 ELISA

TALLA-1 英文名稱(chēng)： T細(xì)胞急性母細(xì)胞白血病相關(guān)抗原1抗體 0.2ml

Cyclin T2 英文名稱(chēng)： 周期素T2抗體 0.2ml

  CD44v10 CD44V10抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rabbit  horse IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗馬IgG 0.1ml

FBXO11 英文名稱(chēng)： F-box蛋白家族FBXO11抗體 0.2ml

TNF-α膜受體抗體/DR3 死亡受體3抗體  DR3/TNF-αR/TRAMP 0.1ml

 PDGF-B/FITC 熒光素標(biāo)記血小板源性生長(zhǎng)因子-B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Torc2/Crtc2(Ser171) 磷酸化CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC2抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit   guinea pig IgG/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗豚鼠IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml
腦瘤細(xì)胞;SF767載玻片細(xì)胞RHO 蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次人纖溶酶原活物抑制因子（PAI）ELISA試劑盒,

凍切片組織RHO 蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次人Agouti相關(guān)蛋白（AGRP）ELISA試劑盒,

石蠟切片組織RHO 蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次人著絲粒蛋白B（CENP-B）ELISA試劑盒,

細(xì)胞RHO 蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒10/50 次小鼠白介素8（IL-8/CXCL8）ELISA試劑盒,

細(xì)胞RHO 蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒10/50 次大鼠c-Jun氨基末端酶（JNK）ELISA試劑盒,

RHO 蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒5次大鼠糖原磷酸化酶同工酶BB（GP-BB）ELISA試劑盒,

RHO 蛋白共沉淀分析試劑盒5次大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶5（MMP-5）ELISA試劑盒,

RHO 蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒25次山羊生長(zhǎng)素釋放多肽（GHRP）ELISA試劑盒,

細(xì)胞TRAIL 蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測(cè)試劑盒10/20次兔子胰島素（INS）ELISA試劑盒,

載玻片細(xì)胞TRAIL 蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次亞硫酸鹽-多粘菌素-磺嘧啶瓊脂基礎(chǔ)   用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的平板計(jì)數(shù)（GB標(biāo)準(zhǔn)）

細(xì)胞CREB蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測(cè)試劑盒10/20次緩沖李氏菌增菌肉湯基礎(chǔ)用于李氏菌的增菌培養(yǎng)（MercK標(biāo)準(zhǔn)）

載玻片細(xì)胞CREB蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次朝藿定B Epimedin B

凍切片組織CREB蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次人腦鈉素/腦鈉尿肽（BNP）ELISA試劑盒,BNP ELISA kit

石蠟切片組織CREB蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次人膀胱癌抗原（UBC）ELISA試劑盒,UBC ELISA kit

載玻片細(xì)胞CREB蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次人脫氧膠原吡啶交聯(lián)（DPD）ELISA試劑盒,DPD ELISA