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當(dāng)前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>天然蛋白,、重組蛋白>>重組蛋白/RP>> Ⅹ組磷脂酶A2(PLA2G10)重組蛋白
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所 在 地上海市
更新時間:2023-03-22 11:50:20瀏覽次數(shù):270次
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主要用途 | 僅供科研研究實驗 | 英文名稱 | Recombinant Phospholipase A2, Group X (PLA2G10) |
物種 | Homo sapiens (Human,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
商品介紹:
GXPLA2; GX sPLA2; sPLA2-X; Group 10 secretory phospholipase A2; Phosphatidylcholine 2-acylhydrolase 10 酶與激酶 物種:Homo sapiens (Human,人) 來源:原核表達 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細胞定位::分泌 預(yù)測分子量:18.7KDa 實際分子量:19kDa(差異分析請參閱說明書) 片段與標(biāo)簽:Glu32~Asp165 with N-terminal His Tag 緩沖液成份:100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液(pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300) 性狀:凍干粉 純度:> 95% 等電點:6.1 應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
Ⅹ組磷脂酶A2(PLA2G10)重組蛋白 | Recombinant Phospholipase A2, Group X (PLA2G10) | Homo sapiens (Human,,人) |
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,,通過瞬時表達產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,,離子交換,,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白,。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性,。
相關(guān)產(chǎn)品:
Recombinant Human PRKAB2宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human ARL2宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human HBB宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human IMPDH2宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作,;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min,;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法,、BCA法),;
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中,, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min,;
6. 14,000rpm,,4℃離心15min,,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法),;
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
Alpha 1 microglobulin產(chǎn)品名稱: α1微球蛋白單克隆抗體交叉反應(yīng): Human
phospho-RPS6KA1 (Thr359)產(chǎn)品名稱: 絲氨suan/蘇氨suan激meip90RSK蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
PPARGC1A產(chǎn)品名稱: 過氧化物mei體增殖物激活受體γ輔激活子1α抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
HIC5產(chǎn)品名稱: 轉(zhuǎn)化生長因子β1誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
RIN1產(chǎn)品名稱: RAS互動/干擾蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow
ELAVL4產(chǎn)品名稱: ELAVL4蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Horse, Rabbit
Myf6產(chǎn)品名稱: 生肌調(diào)節(jié)因子6抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
PTF1A產(chǎn)品名稱: 胰特異轉(zhuǎn)錄因子PTF1A抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow
MBOAT2產(chǎn)品名稱: 溶磷脂酰酰基轉(zhuǎn)移mei2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
C1ORF190產(chǎn)品名稱: 1號染色體開放閱讀框190抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse, Rabbit
Ⅹ組磷脂酶A2(PLA2G10)重組蛋白人類固醇硫suan酯mei同工meiS(STS)ELISA試劑盒STS類固醇硫suan酯mei同工meiSelisa檢測試劑盒Human Steroid Sulfatase Isozyme S(STS)ELISA Kit
人類固醇合成急性調(diào)節(jié)蛋白(STAR)ELISA試劑盒STAR類固醇合成急性調(diào)節(jié)蛋白elisa kitHuman Steroidogenic Acute Regulatory Protein(STAR)ELISA Kit
人酪蛋白激mei1δ(CSNK1δ)ELISA試劑盒CSNK1δ酪蛋白激mei1δELISA試劑盒Human Casein Kinase 1 Delta(CSNK1d)ELISA Kit
人酪氨suan轉(zhuǎn)氨mei(TAT)ELISA試劑盒TAT酪氨suan轉(zhuǎn)氨meielisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Tyrosine Aminotransferase(TAT)ELISA Kit
人酪氨suan激mei2(Tyk2)ELISA試劑盒Tyk2酪氨suan激mei2elisa檢測試劑盒Human Tyrosine Kinase 2(Tyk2)ELISA Kit
注意事項:
1,、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。
2,、雖然作用溫和,,但能硬化組織,固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,,切片時易碎,。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。
3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,,使之不能充分暴露,,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果,。因此,,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復(fù),,然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作,。
4、本產(chǎn)品對人體有害,,操作時請小心,,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
5,、為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作
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