產(chǎn)品名稱：張氏肝細(xì)胞;Chang liver

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào)：YS-02X9836

細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長(zhǎng)良好,，形態(tài)正常

儲(chǔ)存條件：2℃-8℃,，避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞特性：

1)】組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽性,。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%,。

4)不含有 HIV-1、 HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：上皮樣,，不規(guī)則細(xì)胞,，貼壁培養(yǎng),。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,；Glutamax（invitrogen 35050061），1%,；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070）,，1%；雙抗,，1%,。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài),，細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，細(xì)胞密度適合,，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,，過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時(shí)不容易分散,；

（2）凍存的密度不宜過低,，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107）,，一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管）,，10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管,。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度,，吹打不可太用力,，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,，不是加入凍存液再吹打,。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格,，我從10%-90%都用過,，問題不大，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛,！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,，放在4度冰箱預(yù)冷,。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管,。

（5）關(guān)于“慢凍",，傳統(tǒng)的方法，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,，4度2h,，-20度2h或更長(zhǎng)，-80度過夜,，最后液氮,。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室，推薦使用程序降溫盒,，內(nèi)裝異丙醇,，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便,，省了包棉花,、4度、-20度了,。

UMOD/FITC 熒光素標(biāo)記UMOD抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

CXCL10/IP-10 CXCL10趨化因子10/干擾素誘導(dǎo)蛋白10抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

組織蛋白酶H抗體  cath-H/CH 0.1ml

Sec8 英文名稱： 胞吐分泌蛋白Sec8抗體 0.2ml

EDRF1 英文名稱： 紅細(xì)胞分化相關(guān)因子1抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Histone H3 (Thr11) 磷酸化組蛋白H3抗體 規(guī)格 0.1ml

CXCL10/IP-10 CXCL10趨化因子10/干擾素誘導(dǎo)蛋白10抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Angiopoietin-2 Human 人血管生成素-2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 CKMT2 肌酸磷酸激酶2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh NR2A/NMDAR2A 谷受體2A抗體 規(guī)格 0.1ml

mouse serum 封閉用正常小鼠血清(原液) 5ml

TGF beta 3 英文名稱： 轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β3(TGFβ3)抗體 0.1ml

C7orf42 英文名稱： 7號(hào)染色體開放閱讀框42抗體 0.2ml

 CKMT2 肌酸磷酸激酶2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rabbit  Bovine IgM/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記的兔抗IgM 0.1ml

FRMD4B 英文名稱： FRMD4B蛋白抗體 0.2ml

糖皮質(zhì)受體抗體  GR 0.1ml

 PI3K p85 (Tyr458)/p55 (Tyr199) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化磷脂酰肌醇激酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-SGK1 (Ser422) 磷酸化糖皮質(zhì)調(diào)節(jié)激酶1抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit  human IgGF(ab')2 兔抗人IgGF(ab')2 (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格： 1mg
張氏肝細(xì)胞;Chang liver 細(xì)胞培養(yǎng)污染性支原體M.hyorhinis鑒定16S rDNA20次小鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子4（NT-4）ELISA試劑盒,

PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒小鼠組蛋白H2b（histon-H2b）ELISA試劑盒,

細(xì)胞培養(yǎng)污染性支原體M.orale鑒定16S rDNA20次小鼠超敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）ELISA試劑盒,

PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒小鼠白介素27（IL-27）ELISA試劑盒,

細(xì)胞培養(yǎng)污染性支原體M.hominis鑒定16S rDNA20次兔子皮質(zhì)醇（Cortisol）ELISA試劑盒,

PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒促卵泡素（FSH）ELISA試劑盒--動(dòng)物,，人

細(xì)胞培養(yǎng)污染性支原體M.arginini鑒定16S rDNA20次小鼠催產(chǎn)素（OT）ELISA試劑盒,

PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒小鼠抑瘤素M（OSM）ELISA試劑盒,

細(xì)胞培養(yǎng)污染性支原體A.laidlawii鑒定16S rDNA20次小鼠中性粒彈性蛋白酶（NE）ELISA試劑盒,

PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒小鼠抗凝血酶受體（ATR）ELISA試劑盒,

細(xì)胞培養(yǎng)抗支原體污染試劑盒10次內(nèi)肽-2（EM-2）ELISA試劑盒--動(dòng)物，人

細(xì)胞脂質(zhì)生成比色法定量檢測(cè)試劑盒卵巢癌標(biāo)志物CA125ELISA試劑盒--動(dòng)物,，人

地塞米松細(xì)胞脂肪誘導(dǎo)生成比色法定量檢測(cè)試劑盒20次卵清蛋白特異性IgE（OVA sIgE）ELISA試劑盒--動(dòng)物,，人

異丁甲基細(xì)胞脂肪誘導(dǎo)生成比色法定量檢測(cè)試劑盒20次氧化低密度脂蛋白抗體（OLAb）ELISA試劑盒--動(dòng)物，人

胰島素細(xì)胞脂肪誘導(dǎo)生成比色法定量檢測(cè)試劑盒20次神經(jīng)髓鞘蛋白（p2）ELISA試劑盒--動(dòng)物,，人

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途,，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈,。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),，標(biāo)記劃線，加熱溶解,，補(bǔ)充水分,，測(cè)定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定,。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi),。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明,。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml）,，塞好棉塞用牛皮紙包扎好,，準(zhǔn)備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌,，常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性,，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的,。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大,，蒸汽溫度就越高,。因此，在同一溫度條件下,，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后,，其蛋白質(zhì)易于凝固變性,，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng)，殺菌效果好,。