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更新時(shí)間:2023-03-22 13:28:49瀏覽次數(shù):336次
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主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Endonuclease G, Mitochondrial (ENDOG) |
種屬 | Homo sapiens (Human,,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
商品介紹:
ENDO-G 酶與激酶 發(fā)育科學(xué) 物種:Homo sapiens (Human,,人) 來(lái)源:原核表達(dá) 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定) 亞細(xì)胞定位::線粒體 預(yù)測(cè)分子量:34.2KDa 實(shí)際分子量:34kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書) 片段與標(biāo)簽:Leu16~Lys290 with N-terminal His Tag 緩沖液成份:PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose. 性狀:凍干粉 純度:> 97% 等電點(diǎn):9.2 應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
公司產(chǎn)品僅供科研使用,,不得用于臨床,!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
內(nèi)切核酸酶G(ENDOG)重組蛋白 | Recombinant Endonuclease G, Mitochondrial (ENDOG) | Homo sapiens (Human,人) |
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清),。
3.通過(guò)親和,,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白,。
4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。
5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
相關(guān)產(chǎn)品:
白介素1受體關(guān)聯(lián)激酶4(IRAK4)重組蛋白英文名稱:Recombinant Interleukin 1 Receptor Associated Kinase 4 (IRAK4)Homo sapiens (Human,,人)
白三烯A4水解酶(LTA4H)重組蛋白英文名稱:Recombinant Leukotriene A4 Hydrolase (LTA4H)Homo sapiens (Human,,人)
半胱氨酰tRNA合成酶(CARS)重組蛋白英文名稱:Recombinant Cysteinyl tRNA Synthetase (CARS)Mus musculus (Mouse,小鼠)
半胱氨酰tRNA合成酶2(CARS2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Cysteinyl tRNA Synthetase 2, Mitochondrial (CARS2)Mus musculus (Mouse,,小鼠)
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作,;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min,;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,,即為全蛋白提取物,,蛋白定量(Bradford法、BCA法),;
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
4. 細(xì)胞洗滌后,,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,,4℃離心15min,,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法),;
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
EpCAM產(chǎn)品名稱: 上皮特異性抗原(CD326)抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit
FIBP產(chǎn)品名稱: aFGF胞內(nèi)結(jié)合蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
GABPA產(chǎn)品名稱: GA結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄因子α/GABP-α抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep
ARS2產(chǎn)品名稱: 鹽耐藥蛋白ARS2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse
GLYAT產(chǎn)品名稱: 甘胺suan-N-酰基轉(zhuǎn)移mei抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse
MS4A18產(chǎn)品名稱: MS4A18蛋白抗體交叉反應(yīng): Human
SEPT10產(chǎn)品名稱: 細(xì)胞分化蛋白SEPT10抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Horse, Rabbit
phospho-IKB alpha (Ser32 + Ser36)產(chǎn)品名稱: p-IκB-α抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep
Karyopherin beta 3產(chǎn)品名稱: 核轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白β3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Sheep
MEGF5產(chǎn)品名稱: 復(fù)合型表皮生長(zhǎng)因子樣結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Rabbit, Sheep
內(nèi)切核酸酶G(ENDOG)重組蛋白人黑su瘤缺乏因子2(AIM2)ELISA試劑盒AIM2黑su瘤缺乏因子2elisa檢測(cè)試劑盒Human Absent In Melanoma 2(AIM2)ELISA Kit
人黑su瘤缺乏因子1(AIM1)ELISA試劑盒AIM1黑su瘤缺乏因子1elisa kitHuman Absent In Melanoma 1(AIM1)ELISA Kit
人黑色su聚集激su受體1(MCHR1)ELISA試劑盒MCHR1黑色su聚集激su受體1elisa kitHuman Melanin Concentrating Hormone Receptor 1(MCHR1)ELISA Kit
人黑色suA(MLANA)ELISA試劑盒MLANA黑色suAELISA試劑盒Human Melan A(MLANA)ELISA Kit
人赫曼斯基普德拉克綜合征蛋白6(HPS6)ELISA試劑盒HPS6赫曼斯基普德拉克綜合征蛋白6elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Hermansky Pudlak Syndrome Protein 6(HPS6)ELISA Kit
注意事項(xiàng):
1,、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來(lái)調(diào)整固定時(shí)間。
2,、雖然作用溫和,,但能硬化組織,固定時(shí)間過(guò)久會(huì)導(dǎo)致組織變脆,,切片時(shí)易碎,。因此固定時(shí)間通常不宜超過(guò) 24 小時(shí)。
3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,,可造成假陰性的染色,,影響免疫組化結(jié)果。因此,,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測(cè)時(shí),,有時(shí)需要對(duì)抗原先進(jìn)行修復(fù),然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作,。
4,、本產(chǎn)品對(duì)人體有害,操作時(shí)請(qǐng)小心,,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi),。
5、為了您的安全和健康,,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作
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