商品介紹：

公司產(chǎn)品僅供科研使用,，不得用于臨床！

蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）,。

3.通過親和，離子交換,，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白,。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性,。

相關(guān)產(chǎn)品：

丙酮酸脫氫酶β(PDHb)重組蛋白英文名稱：Recombinant Pyruvate Dehydrogenase Beta (PDHb)Homo sapiens (Human,，人)

丙酮酸脫氫酶復(fù)合體成分X(PDHX)重組蛋白英文名稱：Recombinant Pyruvate Dehydrogenase Complex Component X (PDHX)Homo sapiens (Human，人)

丙酮酸脫氫酶激酶同工酶1(PDK1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Pyruvate Dehydrogenase Kinase Isozyme 1 (PDK1)Homo sapiens (Human,，人)

丙酮酸脫氫酶激酶同工酶2(PDK2)重組蛋白英文名稱：Recombinant Pyruvate Dehydrogenase Kinase Isozyme 2 (PDK2)Mus musculus (Mouse,，小鼠)   
操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,，剪碎成3mm×3mm左右的小塊,，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,，注意低溫操作,；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分,，4℃離心5 min,；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物,，蛋白定量（Bradford法,、BCA法）,；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,，吸去培養(yǎng)基后,，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

4． 細(xì)胞洗滌后,，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,，加入上述配制好的冷Lysis Buffer,，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min,；

6． 14,000rpm,，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法,、BCA法）,；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

PRL3產(chǎn)品名稱: 磷suan酯mei3蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Cow, Horse, Rabbit, Sheep, GuineaPig

Cyclophilin B產(chǎn)品名稱: 親環(huán)蛋白PPIB抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit

SLC22A10產(chǎn)品名稱: 溶質(zhì)載體家族22成員10抗體交叉反應(yīng): Human

human IL-6產(chǎn)品名稱: 白介su6單克隆抗體交叉反應(yīng): Human

CD44產(chǎn)品名稱: CD44抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit

GSC產(chǎn)品名稱: 同源盒蛋白GSC抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Zebrafish, Sheep

TIPRL產(chǎn)品名稱: TIP41樣蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, GuineaPig

AADACL3產(chǎn)品名稱: 芳香乙酰胺脫乙?；鵰ei樣蛋白3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

MIG7產(chǎn)品名稱: 富含半胱氨suan蛋白質(zhì)MIG7抗體交叉反應(yīng): Human

LRCH3產(chǎn)品名稱: 富含亮氨suan重復(fù)家庭蛋白3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Horse, Rabbit, Sheep   

腺苷酸環(huán)化酶3(ADCY3)重組蛋白人核糖核suanmeiA6(RNASE6)ELISA試劑盒RNASE6核糖核suanmeiA6elisa kitHuman Ribonuclease A6(RNASE6)ELISA Kit

人核糖核suanmeiA4(RNASE4)ELISA試劑盒RNASE4核糖核suanmeiA4ELISA試劑盒Human Ribonuclease A4(RNASE4)ELISA Kit

人核糖核suanmeiA2(RNASE2)ELISA試劑盒RNASE2核糖核suanmeiA2elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Ribonuclease A2(RNASE2)ELISA Kit

人核糖核suanmeiA13(RNASE13)ELISA試劑盒RNASE13核糖核suanmeiA13elisa檢測(cè)試劑盒Human Ribonuclease A13(RNASE13)ELISA Kit

人核糖核suanmeiA12(RNASE12)ELISA試劑盒RNASE12核糖核suanmeiA12elisa kitHuman Ribonuclease A12(RNASE12)ELISA Kit  
注意事項(xiàng)：

1,、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同，應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時(shí)間,。

2,、雖然作用溫和，但能硬化組織,，固定時(shí)間過久會(huì)導(dǎo)致組織變脆,，切片時(shí)易碎。因此固定時(shí)間通常不宜超過 24 小時(shí),。

3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,，使之不能充分暴露,，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結(jié)果,。因此,，4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測(cè)時(shí)，有時(shí)需要對(duì)抗原先進(jìn)行修復(fù),，然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作,。

4、本產(chǎn)品對(duì)人體有害,，操作時(shí)請(qǐng)小心,，并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5,、為了您的安全和健康,，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作