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當前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>天然蛋白,、重組蛋白>>活性蛋白/AP>> 脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNASE1)活性蛋白
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所 在 地上海市
更新時間:2023-03-22 22:26:03瀏覽次數(shù):409次
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主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Active Deoxyribonuclease I (DNASE1) |
種屬 | Homo sapiens (Human,,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用,,不得用于臨床,!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNASE1)活性蛋白 | Active Deoxyribonuclease I (DNASE1) | Homo sapiens (Human,人) |
商品介紹:
DNaseI; DNL1; DRNI; DNase-I; Dornase alfa 酶與激酶 發(fā)育科學 物種:Homo sapiens (Human,,人) 緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300) 性狀:凍干粉 純度:> 90% 等電點:5.0 應(yīng)用:Cellculture;ActivityAssays. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白,。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,,離子交換,,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性,。
相關(guān)產(chǎn)品:
基質(zhì)金屬蛋白酶17(MMP17)重組蛋白Recombinant Isoleucyl tRNA Synthetase (IARS)
基質(zhì)金屬蛋白酶16(MMP16)重組蛋白Recombinant Ribonuclease A2 (RNASE2)
基質(zhì)金屬蛋白酶15(MMP15)重組蛋白Recombinant Lipase A, Lysosomal Acid (LIPA)
基質(zhì)金屬蛋白酶14(MMP14)重組蛋白Recombinant Proteasome Subunit Alpha Type 1 (PSMa1)
注意事項:
1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,,應(yīng)當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間,。
2、雖然作用溫和,,但能硬化組織,,固定時間過久會導致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時,。
3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,,影響免疫組化結(jié)果,。因此,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,,有時需要對抗原先進行修復(fù),,然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。
4,、本產(chǎn)品對人體有害,,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi),。
5,、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,,離心10000轉(zhuǎn)/分,,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,,即為全蛋白提取物,,蛋白定量(Bradford法、BCA法),;
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中,, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min,;
6. 14,000rpm,,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法,、BCA法),;
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
HMCN2產(chǎn)品名稱: 半椎蛋白2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Dog, Cow, Horse, Sheep
應(yīng)用類型: Other英文名稱: Cdk5英文別名: Cdk 5; Cell division protein kinase 5; Crk6; Cyclin dependent kinase 5; Protein kinase CDK5 splicing; PSSALRE; Serine threonine protein kinase PSSALRE; Tau protein kinase II catalytic subunit; TPKII catalytic subunit; CDK5_HUMAN.
SIK1產(chǎn)品名稱: 絲氨suan/蘇氨suan蛋白激meiSIK1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse
ZNF589產(chǎn)品名稱: 鋅指蛋白589抗體交叉反應(yīng): Human
KIAA0195產(chǎn)品名稱: KIAA0195蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Rabbit
GCNT7產(chǎn)品名稱: β1-6 N-乙酰氨基葡萄糖轉(zhuǎn)移mei7抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Horse
LPPR2產(chǎn)品名稱: 脂質(zhì)磷suan磷suanmei相關(guān)蛋白2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Cat
human CD34/PE-Cy5產(chǎn)品名稱: PE-Cy5標記小鼠抗人CD34單克隆抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian
RBMS1/Cervical cancer oncogene 4產(chǎn)品名稱: 宮頸基因4抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
CCR10產(chǎn)品名稱: 細胞表面趨化因子受體10抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit
脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNASE1)活性蛋白大鼠I型膠原(COL1)ELISA試劑盒COL1I型膠原ELISA試劑盒Rat Collagen Type I,COL1 ELISA Kit
大鼠Ghrelin受體(Ghsr)ELISA試劑盒GhsrGhrelin受體elisamei聯(lián)免疫試劑盒Rat growth hormone secretagogue receptor type 1,Ghsr ELISA kit
大鼠FK506結(jié)合蛋白12-雷帕霉su相關(guān)蛋白1(FRAP1)ELISA試劑盒FRAP1FK506結(jié)合蛋白12-雷帕霉su相關(guān)蛋白1elisa檢測試劑盒Rat FK506 binding protein 12-rapamycin associated protein 1,FRAP1 ELISA kit
大鼠E鈣黏蛋白/上皮鈣黏蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒E-CadE鈣黏蛋白/上皮鈣黏蛋白elisa kitRat Epithelial-Cadherin,E-Cad ELISA Kit
大鼠CXC趨化因子受體5(CXCR5)ELISA試劑盒CXCR5CXC趨化因子受體5ELISA試劑盒Rat CXC-chemokine receptor 5,CXCR5 ELISA Kit
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