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所 在 地上海市
更新時間:2023-03-22 14:39:52瀏覽次數(shù):263次
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主要用途 | 僅供科研研究實驗 | 英文名稱 | Recombinant Protein O-Fucosyltransferase 1 (POFUT1 |
物種 | Homo sapiens (Human,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用,,不得用于臨床!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
蛋白O-巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶1(POFUT1)重組蛋白 | Recombinant Protein O-Fucosyltransferase 1 (POFUT1) | Homo sapiens (Human,,人) |
商品介紹:
O-FUT; O-Fuc-T; FUT12; GDP-Fucose Protein O-Fucosyltransferase 1; Peptide-O-fucosyltransferase 1 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 酶與激酶 物種:Homo sapiens (Human,,人) 來源:原核表達 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細胞定位::分泌 預(yù)測分子量:20.6kDa 實際分子量:21kDa(差異分析請參閱說明書) 片段與標簽:His238~Phe388 with N-terminal His Tag 緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300) 性狀:凍干粉 純度:> 97% 等電點:8.7 應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白,。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,,離子交換,,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性,。
相關(guān)產(chǎn)品:
靜止素Q6硫基氧化酶1(QSOX1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Quiescin Q6 Sulfhydryl Oxidase 1 (QSOX1)Homo sapiens (Human,人)
抗酶抑制因子1(AZIN1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Antizyme Inhibitor 1 (AZIN1)Homo sapiens (Human,,人)
顆粒酶A(GZMA)活性蛋白英文名稱:Active Granzyme A (GZMA)Homo sapiens (Human,,人)
顆粒酶A(GZMA)真核蛋白英文名稱:Eukaryotic Granzyme A (GZMA)Homo sapiens (Human,人)
注意事項:
1,、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,,應(yīng)當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。
2,、雖然作用溫和,,但能硬化組織,固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,,切片時易碎,。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。
3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,,影響免疫組化結(jié)果,。因此,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,,有時需要對抗原先進行修復(fù),,然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。
4,、本產(chǎn)品對人體有害,,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
5,、為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,,注意低溫操作,;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,,4℃離心5 min,;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,,蛋白定量(Bradford法,、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中,, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min,;
6. 14,000rpm,,4℃離心15min,,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法),;
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
RNF169產(chǎn)品名稱: 環(huán)指蛋白169抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
PER2產(chǎn)品名稱: 節(jié)律蛋白2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse
phospho-Tau (Ser739)產(chǎn)品名稱: 微管相關(guān)蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Rabbit
ALK產(chǎn)品名稱: 間變型淋巴激mei抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Dog, Cow, Rabbit
RNF180產(chǎn)品名稱: 環(huán)指蛋白180抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse
FAM43B產(chǎn)品名稱: FAM43B蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig
CACNG3產(chǎn)品名稱: 神經(jīng)元電壓門控鈣通道γ3/L-type Ca++CP γ3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, GuineaPig
ARRDC3產(chǎn)品名稱: 蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
IGFBP2產(chǎn)品名稱: 因子結(jié)合蛋白2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
蛋白O-巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶1(POFUT1)重組蛋白人抵抗su樣蛋白β(RETNLβ)ELISA試劑盒RETNLβ抵抗su樣蛋白βelisa檢測試劑盒Human Resistin Like Beta(RETNLb)ELISA Kit
人低氧上調(diào)節(jié)因子1(HYOU1)ELISA試劑盒HYOU1低氧上調(diào)節(jié)因子1elisa kitHuman Hypoxia Up Regulated 1(HYOU1)ELISA Kit
人低分子量激肽原(LMWK)ELISA試劑盒LMWK低分子量激肽原elisa kitHuman Low Molecular Weight Kininogen(LMWK)ELISA Kit
人蛋白mei體亞基β6(PSMβ6)ELISA試劑盒PSMβ6蛋白mei體亞基β6ELISA試劑盒Human Proteasome Subunit Beta Type 6(PSMb6)ELISA Kit
人蛋白mei體亞基α1(PSMα1)ELISA試劑盒PSMα1蛋白mei體亞基α1elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Proteasome Subunit Alpha Type 1(PSMa1)ELISA Kit
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