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當(dāng)前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>天然蛋白,、重組蛋白>>重組蛋白/RP>> 睪蛋白(TEST1)重組蛋白
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所 在 地上海市
更新時間:2023-03-22 20:41:28瀏覽次數(shù):293次
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主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Recombinant Testisin (TEST1) |
種屬 | Rattus norvegicus (Rat,,大鼠) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研實驗產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:睪蛋白(TEST1)重組蛋白
物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
英文名稱:Recombinant Testisin (TEST1)
ESP-1; PRSS21; Protease, Serine 21; Eosinophil serine protease 1
酶與激酶
物種:Rattus norvegicus (Rat,,大鼠) 來源:原核表達 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細(xì)胞定位::分泌 預(yù)測分子量:35.1kDa 實際分子量:35kDa(差異分析請參閱說明書) 片段與標(biāo)簽:His51~Ala328 with N-terminal His Tag 緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.) 性狀:凍干粉 純度:> 90% 等電點:7.3 應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
相關(guān)產(chǎn)品:
脂肪酸去飽和酶1(FADS1)卵白蛋白偶聯(lián)物Recombinant Matrix Metalloproteinase 23B (MMP23B)
脂肪酸羥化酶(FAAH)重組蛋白Recombinant Matrix Metalloproteinase 11 (MMP11)
脂肪酸合酶(FASN)重組蛋白Recombinant Protein Kinase C Eta (PKCh)
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標(biāo)簽選擇:
親和標(biāo)簽:蛋白重組表達過程中采用親和標(biāo)簽融合表達有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易;另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶,。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽,;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析,。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,,大致步驟如下:
真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:
a. 選擇表達載體和宿主細(xì)胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表達載體的構(gòu)建
c. 無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提
d. 細(xì)胞瞬時轉(zhuǎn)染
e. 表達小試,條件優(yōu)化
f. 表達分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表達
h. 親和純化
i. 檢測和鑒定
原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:
a. 選擇表達載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉(zhuǎn)化表達菌株
e. 蛋白表達小試分析
f. 如果蛋白可溶,,蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶,,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白。
h. 鑒定,,包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白,;表達蛋白的分析、純化,、檢測
誘導(dǎo)表達成功后,,表達蛋白的分析、純化、檢測應(yīng)該順當(dāng),,按一般的實驗步驟做沒太大的問題,。
操作步驟 :
根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM,。混勻備用(PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加),。
1,、樣品前處理:
a)對于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS,、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍,。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,,使裂解液和細(xì)胞充分接觸,。
b)對于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,,用手指把細(xì)胞用力彈散,。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞,。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀,。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管,,然后再裂解,。
c)對于組織樣品: 把切成細(xì)小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量),。用玻璃勻漿器勻漿,,直至充分裂解。
2,、后處理:
將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,,取上清,即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定,、SDS-PAGE,、Western blotting 和免疫沉淀等操作
特點:
標(biāo)記:標(biāo)記反應(yīng)簡單、溫和且很少抑制抗體活性,,將與抗體共價結(jié)合是一種非常簡便,、直接的標(biāo)記方法。
酶標(biāo)記:酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成,其應(yīng)用范圍非常廣泛,,結(jié)果即時可見,、敏感性高。
熒光標(biāo)記:熒光基團AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一,,產(chǎn)品覆蓋350-770nm,。不同的AbFluor基團經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光, 從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況,,主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色,,是一種非常好的亞細(xì)胞水平定位的方法。
ERK1產(chǎn)品名稱: 絲裂原活化蛋白激mei1(MAPK3/1)單克隆抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow
TMEFF1產(chǎn)品名稱: TMEFF1蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
PAX8產(chǎn)品名稱: 配對盒基因8單克隆抗體交叉反應(yīng): Human, Rat
EPHB4產(chǎn)品名稱: 酪氨suan蛋白激mei受體B4抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
CSB產(chǎn)品名稱: ATP依賴解旋meiERCC6抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
A4GALT產(chǎn)品名稱: 乳糖神經(jīng)酰胺4-α-半乳糖基轉(zhuǎn)移mei抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig
英文名稱: Human IgE交叉反應(yīng): Human
C5ORF4產(chǎn)品名稱: 5號染色體開放閱讀框4抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Rabbit
CSN7b產(chǎn)品名稱: 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白9復(fù)合體7b抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Horse, Sheep
C11ORF77產(chǎn)品名稱: 11號染色體開放閱讀框77抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
睪蛋白(TEST1)重組蛋白人Duffy血型趨化因子受體(DARC)ELISA試劑盒DARCDuffy血型趨化因子受體elisa kitHuman Duffy Blood Group Chemokine Receptor(DARC)ELISA Kit
人DR1關(guān)聯(lián)蛋白1(DRAP1)ELISA試劑盒DRAP1DR1關(guān)聯(lián)蛋白1ELISA試劑盒Human DR1 Associated Protein 1(DRAP1)ELISA Kit
人DNA指導(dǎo)聚合meiγ1(POLγ1)ELISA試劑盒POLγ1DNA指導(dǎo)聚合meiγ1elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Polymerase DNA Directed Gamma 1(POLg1)ELISA Kit
人DnaJ/Hsp40同源物亞家族C成員12(DNAJC12)ELISA試劑盒DNAJC12DnaJ/Hsp40同源物亞家族C成員12elisa檢測試劑盒Human DnaJ/HSP40 Homolog Subfamily C, Member 12(DNAJC12)ELISA Kit
人Discs大同源物關(guān)聯(lián)蛋白5(DLGAP5)ELISA試劑盒DLGAP5Discs大同源物關(guān)聯(lián)蛋白5elisa kitHuman Discs, Large Homolog Associated Protein 5(DLGAP5)ELISA Kit
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