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腺苷酸激酶1(AK1)重組蛋白

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產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2023-03-22 20:15:39瀏覽次數(shù):374次

聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)
供貨周期 現(xiàn)貨 應用領域 化工,生物產業(yè)
主要用途 僅供科研研究實驗 英文名稱 Recombinant Adenylate Kinase 1 (AK1)
物種 Mus musculus (Mouse,,小鼠) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
品牌 研生
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商品介紹:

ADK; Myokinase; Adenylate monophosphate kinase; ATP-AMP transphosphorylase 1; ATP:AMP phosphotransferase

酶與激酶

物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

來源:原核表達

宿主E.coli

內毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位::分泌

預測分子量:25.2kDa

實際分子量:25kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽:Met1~Lys194 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

性狀:凍干粉

純度:> 90%

等電點:5.7

應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg   

公司產品僅供科研使用,,不得用于臨床!

產品名稱

英文名稱

物種

腺苷酸激酶1(AK1)重組蛋白

Recombinant Adenylate Kinase 1 (AK1)

Mus musculus (Mouse,,小鼠)

蛋白表達及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,,然后將重組質粒轉染到細胞中,,通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清),。

3.通過親和,,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白,。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量,。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

圖片5.png

圖片1.png


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操作步驟:

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作,;

3. 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管,,離心10000轉/分,4℃離心5 min,;

4. 取上清轉移至新的預冷的離心管中,,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法,、BCA法),;

5. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,,吸去培養(yǎng)基后,,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,;

2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉/分離心10 min,,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,,1000轉/分離心5 min洗兩次,;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細胞洗滌后,轉至新的預冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,,加入量如下表所示:

細胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個

0.5 mL~1 mL

5×106個

0.2 mL~0.5 mL

5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min,;

6. 14,000rpm,,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法,、BCA法),;

7. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

KMT2G產品名稱: 組蛋白賴氨suanN-甲基2G抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Cow, Horse, Rabbit

C9orf140產品名稱: 9號染色體開放閱讀框140抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Cow, Horse, Rabbit

TBK1產品名稱: NF-κB活化激mei抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit

phospho-Filamin A (Ser2151)產品名稱: 細絲蛋白A抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow

human CD3/Cy5.5產品名稱: Cy5.5標記小鼠抗人CD3單克隆抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian

VAX2產品名稱: 視神經視網(wǎng)膜相關蛋白VAX2抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Cow, Rabbit, Sheep

MAGEA4產品名稱: 黑色su相關抗原4抗體交叉反應: Human

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N-α-乙酰轉移mei11(NαA11)ELISA試劑盒NαA11N-α-乙酰轉移mei11elisa檢測試劑盒Human N-Alpha-Acetyltransferase 11(NaA11)ELISA Kit

N-α-乙酰轉移mei10(NαA10)ELISA試劑盒NαA10N-α-乙酰轉移mei10elisa kitHuman N-Alpha-Acetyltransferase 10(NaA10)ELISA Kit

NSFL1輔因子(NSFL1C)ELISA試劑盒NSFL1CNSFL1輔因子ELISA試劑盒Human NSFL1 Cofactor(NSFL1C)ELISA Kit

Notchless蛋白(NLE)ELISA試劑盒NLENotchless蛋白elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Notchless(NLE)ELISA Kit  
注意事項:

1,、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,,應當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調整固定時間。

2,、雖然作用溫和,但能硬化組織,,固定時間過久會導致組織變脆,,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時,。

3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結構可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,,影響免疫組化結果,。因此,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,,有時需要對抗原先進行修復,,然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。

4,、本產品對人體有害,,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內,。

5,、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作 

 


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