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當(dāng)前位置:上海研生實(shí)業(yè)有限公司>>天然蛋白,、重組蛋白>>重組蛋白/RP>> 腺苷酸激酶1(AK1)重組蛋白
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更新時(shí)間:2023-03-22 20:15:39瀏覽次數(shù):349次
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主要用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Adenylate Kinase 1 (AK1) |
物種 | Mus musculus (Mouse,,小鼠) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
商品介紹:
ADK; Myokinase; Adenylate monophosphate kinase; ATP-AMP transphosphorylase 1; ATP:AMP phosphotransferase 酶與激酶 物種:Mus musculus (Mouse,小鼠) 來源:原核表達(dá) 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細(xì)胞定位::分泌 預(yù)測分子量:25.2kDa 實(shí)際分子量:25kDa(差異分析請參閱說明書) 片段與標(biāo)簽:Met1~Lys194 with N-terminal His Tag 緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.) 性狀:凍干粉 純度:> 90% 等電點(diǎn):5.7 應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
公司產(chǎn)品僅供科研使用,,不得用于臨床!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
腺苷酸激酶1(AK1)重組蛋白 | Recombinant Adenylate Kinase 1 (AK1) | Mus musculus (Mouse,,小鼠) |
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清),。
3.通過親和,離子交換,,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白,。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性,。
相關(guān)產(chǎn)品:
巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶6(FUT6)重組蛋白英文名稱:Recombinant Fucosyltransferase 6 (FUT6)Homo sapiens (Human,,人)
巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶8(FUT8)重組蛋白英文名稱:Recombinant Fucosyltransferase 8 (FUT8)Mus musculus (Mouse,小鼠)
鹽誘導(dǎo)激酶2(SIK2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Salt Inducible Kinase 2 (SIK2)Homo sapiens (Human,,人)
氧鯊烯環(huán)化酶(OSC)重組蛋白英文名稱:Recombinant Oxidosqualene Cyclase (OSC)Homo sapiens (Human,,人)
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,,注意低溫操作,;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min,;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法,、BCA法),;
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,,吸去培養(yǎng)基后,,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
4. 細(xì)胞洗滌后,,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,,溫和振蕩15 min,;
6. 14,000rpm,,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法,、BCA法),;
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
KMT2G產(chǎn)品名稱: 組蛋白賴氨suanN-甲基2G抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow, Horse, Rabbit
C9orf140產(chǎn)品名稱: 9號(hào)染色體開放閱讀框140抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Cow, Horse, Rabbit
TBK1產(chǎn)品名稱: NF-κB活化激mei抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit
phospho-Filamin A (Ser2151)產(chǎn)品名稱: 細(xì)絲蛋白A抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow
human CD3/Cy5.5產(chǎn)品名稱: Cy5.5標(biāo)記小鼠抗人CD3單克隆抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian
VAX2產(chǎn)品名稱: 視神經(jīng)視網(wǎng)膜相關(guān)蛋白VAX2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow, Rabbit, Sheep
MAGEA4產(chǎn)品名稱: 黑色su相關(guān)抗原4抗體交叉反應(yīng): Human
TNNT1產(chǎn)品名稱: 骨骼肌慢肌肌鈣蛋白T抗體交叉反應(yīng): Human
STXBP1/Munc18-1產(chǎn)品名稱: 神經(jīng)突觸前膜胞內(nèi)蛋白18抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Horse
phospho-MYL9 (Thr19)產(chǎn)品名稱: 肌球蛋白調(diào)節(jié)多肽9(平滑肌亞型)抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep
腺苷酸激酶1(AK1)重組蛋白人N-α-乙酰轉(zhuǎn)移mei15(NαA15)ELISA試劑盒NαA15N-α-乙酰轉(zhuǎn)移mei15elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human N-Alpha-Acetyltransferase 15(NaA15)ELISA Kit
人N-α-乙酰轉(zhuǎn)移mei11(NαA11)ELISA試劑盒NαA11N-α-乙酰轉(zhuǎn)移mei11elisa檢測試劑盒Human N-Alpha-Acetyltransferase 11(NaA11)ELISA Kit
人N-α-乙酰轉(zhuǎn)移mei10(NαA10)ELISA試劑盒NαA10N-α-乙酰轉(zhuǎn)移mei10elisa kitHuman N-Alpha-Acetyltransferase 10(NaA10)ELISA Kit
人NSFL1輔因子(NSFL1C)ELISA試劑盒NSFL1CNSFL1輔因子ELISA試劑盒Human NSFL1 Cofactor(NSFL1C)ELISA Kit
人Notchless蛋白(NLE)ELISA試劑盒NLENotchless蛋白elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Notchless(NLE)ELISA Kit
注意事項(xiàng):
1,、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時(shí)間。
2,、雖然作用溫和,,但能硬化組織,固定時(shí)間過久會(huì)導(dǎo)致組織變脆,,切片時(shí)易碎,。因此固定時(shí)間通常不宜超過 24 小時(shí),。
3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,,可造成假陰性的染色,,影響免疫組化結(jié)果。因此,,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時(shí),,有時(shí)需要對抗原先進(jìn)行修復(fù),然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作,。
4,、本產(chǎn)品對人體有害,操作時(shí)請小心,,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi),。
5、為了您的安全和健康,,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作
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