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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2023-03-22 20:40:35瀏覽次數(shù):410次
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主要用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Enterokinase (ENTK) |
物種 | Mus musculus (Mouse,小鼠) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性:
特點(diǎn):
標(biāo)記:標(biāo)記反應(yīng)簡(jiǎn)單,、溫和且很少抑制抗體活性,將與抗體共價(jià)結(jié)合是一種非常簡(jiǎn)便、直接的標(biāo)記方法,。
酶標(biāo)記:酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成,其應(yīng)用范圍非常廣泛,,結(jié)果即時(shí)可見(jiàn),、敏感性高,。
熒光標(biāo)記:熒光基團(tuán)AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一,產(chǎn)品覆蓋350-770nm,。不同的AbFluor基團(tuán)經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光,, 從而得知抗體的定位和待測(cè)抗原的分布情況,主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色,,是一種非常好的亞細(xì)胞水平定位的方法,。
產(chǎn)品名稱:腸激酶(ENTK)重組蛋白
物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
英文名稱:Recombinant Enterokinase (ENTK)
PRSS7; TMPRSS15; Protease, Serine 7; Proenterokinase; Enteropeptidase; Transmembrane protease serine 15
酶與激酶
物種:Mus musculus (Mouse,,小鼠) 來(lái)源:原核表達(dá) 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定) 亞細(xì)胞定位::細(xì)胞膜 預(yù)測(cè)分子量:22.6kDa 實(shí)際分子量:25kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū)) 片段與標(biāo)簽:Gln902~His1069 with N-terminal His Tag 緩沖液成份:PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose. 性狀:凍干粉 純度:> 97% 等電點(diǎn):5.0 應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
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標(biāo)簽選擇:
親和標(biāo)簽:蛋白重組表達(dá)過(guò)程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過(guò)程變得更加容易,;另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽,;一類是長(zhǎng)肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達(dá),。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來(lái)分析。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,,大致步驟如下:
真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表達(dá)載體的構(gòu)建
c. 無(wú)內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提
d. 細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染
e. 表達(dá)小試,,條件優(yōu)化
f. 表達(dá)分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表達(dá)
h. 親和純化
i. 檢測(cè)和鑒定
原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株
e. 蛋白表達(dá)小試分析
f. 如果蛋白可溶,蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶,,則需要變復(fù)性來(lái)制備可溶蛋白,。
h. 鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白,;表達(dá)蛋白的分析,、純化、檢測(cè)
誘導(dǎo)表達(dá)成功后,,表達(dá)蛋白的分析,、純化、檢測(cè)應(yīng)該順當(dāng),,按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒(méi)太大的問(wèn)題,。
操作步驟 :
根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM,。混勻備用(PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加),。
1,、樣品前處理:
a)對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS,、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍,。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,,使裂解液和細(xì)胞充分接觸,。
b)對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞,。充分裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,,必需分裝成 50-100 萬(wàn)細(xì)胞/管,,然后再裂解。
c)對(duì)于組織樣品: 把切成細(xì)小的碎片,。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,,可以適當(dāng)減少裂解液的用量),。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解,。
2,、后處理:
將裂解后
的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,,即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測(cè)定,、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作
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KCTD1產(chǎn)品名稱: 鉀離子通道多聚體結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Rabbit
C8orf47產(chǎn)品名稱: 8號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框47抗體交叉反應(yīng): Human
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MO1產(chǎn)品名稱: MO蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse
腸激酶(ENTK)重組蛋白人Enamelin蛋白(ENAM)ELISA試劑盒ENAMEnamelin蛋白elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Enamelin(ENAM)ELISA Kit
人Enah/Vasp樣蛋白(EVL)ELISA試劑盒EVLEnah/Vasp樣蛋白elisa檢測(cè)試劑盒Human Enah/Vasp Like Protein(EVL)ELISA Kit
人Embigin蛋白(EMB)ELISA試劑盒EMBEmbigin蛋白elisa kitHuman Embigin(EMB)ELISA Kit
人D組著色性干皮病偶聯(lián)因子(XPD)ELISA試劑盒XPDD組著色性干皮病偶聯(lián)因子ELISA試劑盒Human Xeroderma Pigmentosum, Complementation Group D(XPD)ELISA Kit
人D-天冬氨suan氧化mei(DDO)ELISA試劑盒DDOD-天冬氨suan氧化meielisamei聯(lián)免疫試劑盒Human D-Aspartate Oxidase(DDO)ELISA Kit
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