公司產(chǎn)品僅供科研使用,，不得用于臨床,！

商品介紹：

蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞,，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）,。

3.通過親和,，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白,。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

相關(guān)產(chǎn)品：

谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)重組蛋白Recombinant Aminopeptidase A (ENPEP)

谷氨酰脯氨酰tRNA合成酶(EPRS)重組蛋白Recombinant N-Acylsphingosine Amidohydrolase 2 (ASAH2)

谷氨酰tRNA合成酶2(EARS2)重組蛋白Recombinant Protein Kinase C Theta (PKCq)

脫羧酶樣蛋白1(GADL1)重組蛋白Recombinant Aminopeptidase B (RNPEP)   

注意事項(xiàng)：

1,、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,，應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時(shí)間,。

2、雖然作用溫和,，但能硬化組織,，固定時(shí)間過久會導(dǎo)致組織變脆，切片時(shí)易碎,。因此固定時(shí)間通常不宜超過 24 小時(shí),。

3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露,，可造成假陰性的染色,，影響免疫組化結(jié)果。因此,，4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時(shí),，有時(shí)需要對抗原先進(jìn)行修復(fù)，然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作,。

4,、本產(chǎn)品對人體有害，操作時(shí)請小心,，并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi),。

5、為了您的安全和健康,，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作                                            

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊,，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer,，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作,；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min,；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）,；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后,，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后,，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上,，溫和振蕩15 min,；

6． 14,000rpm，4℃離心15min,，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法,、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

H2BFWT產(chǎn)品名稱: H2B組蛋白家族成員W蛋白抗體(睪丸特異性)交叉反應(yīng): Human

英文名稱: Myoglobin英文別名: MYO; MB; MGC13548; PVALB; MYG_HUMAN.

Cappucci產(chǎn)品名稱: Cappucci蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep, GuineaPig

PARG產(chǎn)品名稱: 聚ADP核糖水解meiPARG抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

CRIM1產(chǎn)品名稱: 富含半胱氨suan運(yùn)動神經(jīng)元蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

KLC3產(chǎn)品名稱: 驅(qū)動蛋白輕鏈3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow, Horse

factor V產(chǎn)品名稱: 凝因子5抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig

PDE6B產(chǎn)品名稱: 磷suan二酯mei6β抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

ornithine amitransferase產(chǎn)品名稱: 鳥氨suan氨基轉(zhuǎn)移mei抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Horse

GJB3產(chǎn)品名稱: 間隙連接蛋白31抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, GuineaPig   

酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM)活性蛋白兔血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA試劑盒CH50兔血清總補(bǔ)體elisa kitRabbit 50% complement hemolysis,CH50 ELISA Kit

兔血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒SAA兔血清淀粉樣蛋白AELISA試劑盒Rabbit Serum amyloid A,SAA ELISA Kit

兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒GMP-140兔血漿α顆粒膜蛋白elisamei聯(lián)免疫試劑盒Rabbit alpha-granular membrane protein,GMP-140 ELISA Kit

兔血紅su氧合mei1(HMOX1)ELISA試劑盒HMOX1兔血紅su氧合mei1elisa檢測試劑盒Rabbit heme oxygenase(decycling)1,HMOX1 ELISA kit

兔血紅蛋白(HB)ELISA試劑盒HB兔血紅蛋白elisa kitRabbit HB ELISA Kit