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當前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>天然蛋白,、重組蛋白>>重組蛋白/RP>> 碳酸酐酶Ⅸ(CA9)重組蛋白
參 考 價 | 面議 |
產(chǎn)品型號
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時間:2023-03-21 21:56:21瀏覽次數(shù):325次
聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應用領域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
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主要用途 | 僅供科研研究實驗 | 英文名稱 | Recombinant Carbonic Anhydrase IX (CA9) |
物種 | Rattus norvegicus (Rat,,大鼠) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研實驗產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:碳酸酐酶Ⅸ(CA9)重組蛋白
物種:Rattus norvegicus (Rat,,大鼠)
英文名稱:Recombinant Carbonic Anhydrase IX (CA9)
CA-IX; CAIX; MN; pMW1; P54/58N; Carbonic Dehydratase; Renal cell carcinoma-associated antigen G250; RCC-Associated Protein G250; Carbonate dehydratase IX
酶與激酶
物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠) 來源:原核表達 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細胞定位::n/a 預測分子量:- 實際分子量:-(差異分析請參閱說明書) 片段與標簽:N-terminal His Tag 緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.) 性狀:凍干粉 純度:> 97% 等電點:- 應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
特點:
標記:標記反應簡單,、溫和且很少抑制抗體活性,將與抗體共價結(jié)合是一種非常簡便,、直接的標記方法,。
酶標記:酶標記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當方法連接而成,其應用范圍非常廣泛,,結(jié)果即時可見,、敏感性高。
熒光標記:熒光基團AbFluorTM是新型的熒光標記物之一,,產(chǎn)品覆蓋350-770nm,。不同的AbFluor基團經(jīng)恰當?shù)募す饪砂l(fā)光, 從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況,,主要用于細胞分選或高分辨率免疫染色,,是一種非常好的亞細胞水平定位的方法。
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標簽選擇:
親和標簽:蛋白重組表達過程中采用親和標簽融合表達有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易,;另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶,。蛋白標簽可分兩類:一類是短肽類標簽;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達,。使用不同的蛋白標簽需要根據(jù)具體案例來分析,。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:
真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:
a. 選擇表達載體和宿主細胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表達載體的構(gòu)建
c. 無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提
d. 細胞瞬時轉(zhuǎn)染
e. 表達小試,,條件優(yōu)化
f. 表達分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表達
h. 親和純化
i. 檢測和鑒定
原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:
a. 選擇表達載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉(zhuǎn)化表達菌株
e. 蛋白表達小試分析
f. 如果蛋白可溶,,蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶,則需要變復性來制備可溶蛋白,。
h. 鑒定,,包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白;表達蛋白的分析,、純化,、檢測
誘導表達成功后,表達蛋白的分析,、純化,、檢測應該順當,按一般的實驗步驟做沒太大的問題,。
ADORA2B產(chǎn)品名稱: 苷A2b受體/神經(jīng)生長因子1受體抗體交叉反應: Human, Mouse
應用類型: Other英文名稱: Mo/Di-Methyl-Histone H3 (Lys79)標記: Unconjugated
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操作步驟 :
根據(jù)使用量,,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM?;靹騻溆茫≒MSF 現(xiàn)用現(xiàn)加),。
1、樣品前處理:
a)對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,,用 PBS,、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。用槍吹打數(shù)下,,使裂解液和細胞充分接觸。
b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,,用手指把細胞用力彈散,。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細胞,。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀,。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管,,然后再裂解。
c)對于組織樣品: 把切成細小的碎片,。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,,可以適當減少裂解液的用量),。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解,。
2,、后處理:
將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,,即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定,、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作
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