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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2023-03-22 21:08:42瀏覽次數(shù):317次
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主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Methionine Adenosyltransferase II Beta |
種屬 | Homo sapiens (Human,,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:蛋氨酸腺苷轉(zhuǎn)移酶Ⅱβ(MAT2b)重組蛋白
物種:Homo sapiens (Human,人)
英文名稱:Recombinant Methionine Adenosyltransferase II Beta (MAT2b)
MATIIbeta; TGR; SDR23E1; Short Chain Dehydrogenase/Reductase Family 23E,Member 1; Putative dTDP-4-keto-6-deoxy-D-glucose 4-reductase
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,,人) 來源:原核表達(dá) 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定) 亞細(xì)胞定位::細(xì)胞核, 細(xì)胞質(zhì) 預(yù)測(cè)分子量:41.3kDa 實(shí)際分子量:43kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書) 片段與標(biāo)簽:Met1~His334 with N-terminal His Tag 緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300) 性狀:凍干粉 純度:> 95% 等電點(diǎn):6.9 應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
特點(diǎn):
標(biāo)記:標(biāo)記反應(yīng)簡(jiǎn)單、溫和且很少抑制抗體活性,,將與抗體共價(jià)結(jié)合是一種非常簡(jiǎn)便,、直接的標(biāo)記方法。
酶標(biāo)記:酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成,,其應(yīng)用范圍非常廣泛,,結(jié)果即時(shí)可見、敏感性高,。
熒光標(biāo)記:熒光基團(tuán)AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一,,產(chǎn)品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團(tuán)經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光,, 從而得知抗體的定位和待測(cè)抗原的分布情況,,主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色,是一種非常好的亞細(xì)胞水平定位的方法。
相關(guān)產(chǎn)品:
同源域相互作用蛋白激酶2(HIPK2)重組蛋白R(shí)ecombinant Pyruvate Dehydrogenase Beta (PDHb)
同源域相互作用蛋白激酶1(HIPK1)重組蛋白R(shí)ecombinant Matrix Metalloproteinase 25 (MMP25)
通道激活蛋白酶1(CAP1)重組蛋白R(shí)ecombinant Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase (GAPDH)
鐵氧還蛋白還原酶(FDXR)重組蛋白R(shí)ecombinant Cathepsin S (CTSS)
標(biāo)簽選擇:
親和標(biāo)簽:蛋白重組表達(dá)過程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易,;另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶,。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽;一類是長(zhǎng)肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達(dá),。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析,。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:
真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表達(dá)載體的構(gòu)建
c. 無(wú)內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提
d. 細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染
e. 表達(dá)小試,,條件優(yōu)化
f. 表達(dá)分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表達(dá)
h. 親和純化
i. 檢測(cè)和鑒定
原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株
e. 蛋白表達(dá)小試分析
f. 如果蛋白可溶,,蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白,。
h. 鑒定,,包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白;表達(dá)蛋白的分析,、純化,、檢測(cè)
誘導(dǎo)表達(dá)成功后,表達(dá)蛋白的分析,、純化,、檢測(cè)應(yīng)該順當(dāng),按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒太大的問題,。
Staufen產(chǎn)品名稱: 雙鏈RNA結(jié)合蛋白Staufen抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Cow, Horse
DRG1產(chǎn)品名稱: GTP發(fā)育調(diào)控結(jié)合蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse
ZNF350產(chǎn)品名稱: 鋅指蛋白350/乳易感基因1結(jié)合蛋白抗體交叉反應(yīng): Human
ING3產(chǎn)品名稱: 生長(zhǎng)蛋白3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
phospho-ATF2 (Thr71 + Thr53)產(chǎn)品名稱: 活化復(fù)制因子2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep
MRPS18A產(chǎn)品名稱: 線粒體核糖體蛋白S18A抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Sheep
HLTF產(chǎn)品名稱: 解旋mei樣轉(zhuǎn)錄因子抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
PEX13產(chǎn)品名稱: 過氧化物mei體生物合成因子13抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Rabbit, Sheep
RANBP9產(chǎn)品名稱: 核蛋白9 / Ran結(jié)合蛋白M抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
HPRT產(chǎn)品名稱: 次磷suan核糖基轉(zhuǎn)移mei1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
蛋氨酸腺苷轉(zhuǎn)移酶Ⅱβ(MAT2b)重組蛋白人43kDa人Tar人DNA結(jié)合蛋白(TDP43)ELISA試劑盒TDP4343kDaTarDNA結(jié)合蛋白elisa kitHuman Tar DNA Binding Protein 43kDa(TDP43)ELISA Kit
人43kDa核孔蛋白(NUP43)ELISA試劑盒NUP4343kDa核孔蛋白ELISA試劑盒Human Nucleoporin 43kDa(NUP43)ELISA Kit
人3-羥基異丁suan脫氫mei(HIBADH)ELISA試劑盒HIBADH3-羥基異丁suan脫氫meielisamei聯(lián)免疫試劑盒Human 3-Hydroxyisobutyrate Dehydrogenase(HIBADH)ELISA Kit
人3-羥基丁suan脫氫mei2(BDH2)ELISA試劑盒BDH23-羥基丁suan脫氫mei2elisa檢測(cè)試劑盒Human 3-Hydroxybutyrate Dehydrogenase 2(BDH2)ELISA Kit
人3-羥基丁suan脫氫mei1(BDH1)ELISA試劑盒BDH13-羥基丁suan脫氫mei1elisa kitHuman 3-Hydroxybutyrate Dehydrogenase 1(BDH1)ELISA Kit
操作步驟 :
根據(jù)使用量,,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM,?;靹騻溆茫≒MSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。
1,、樣品前處理:
a)對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,,用 PBS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍,。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸,。
b)對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞,。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,,必需分裝成 50-100 萬(wàn)細(xì)胞/管,,然后再裂解,。
c)對(duì)于組織樣品: 把切成細(xì)小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量),。用玻璃勻漿器勻漿,,直至充分裂解。
2,、后處理:
將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測(cè)定,、SDS-PAGE,、Western blotting 和免疫沉淀等操作
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