蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,，通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和,，離子交換,，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。

5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性,。
公司產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于臨床,！

商品介紹：

相關(guān)產(chǎn)品：

Recombinant Mouse FGL1宿主: HEK 293 cells標(biāo)簽: C-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Mouse

Recombinant Human EFTUD2宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human POMC宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human KCNAB2宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human   

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer,，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,，離心10000轉(zhuǎn)/分,，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,，即為全蛋白提取物,，蛋白定量（Bradford法、BCA法）,；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后,，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后,，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上,，溫和振蕩15 min,；

6． 14,000rpm，4℃離心15min,，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法,、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

注意事項：

1,、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時間有所不同，應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。

2,、雖然作用溫和,，但能硬化組織，固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,，切片時易碎,。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。

3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,，使之不能充分暴露，可造成假陰性的染色,，影響免疫組化結(jié)果,。因此，4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時,，有時需要對抗原先進(jìn)行修復(fù),，然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。

4,、本產(chǎn)品對人體有害,，操作時請小心，并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi),。

5,、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作 
MDH1交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian抗體來源: Mouse

TOMM5產(chǎn)品名稱: 線粒體外膜蛋白TOM5抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Cow, Sheep

A2ML1產(chǎn)品名稱: α2巨球蛋白樣蛋白1抗體 α2ML1產(chǎn)品別名: α2ML1

GSTA1產(chǎn)品名稱: GSTA1單克隆抗體交叉反應(yīng): Human, Rat

MAGOH/Mago nashi homolog 2產(chǎn)品名稱: MAGOH蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow

HOXB8產(chǎn)品名稱: 同源盒蛋白B8抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow

C1orf87產(chǎn)品名稱: 1號染色體開放閱讀框87抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Sheep

Nkx2.6產(chǎn)品名稱: 轉(zhuǎn)錄因子同源蛋白Nkx2.6抗體交叉反應(yīng): Mouse

Mo-Methyl-Histone H3 (Lys14)交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian抗體來源: Rabbit

CLDN7產(chǎn)品名稱: 緊密連接蛋白7抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Rabbit, Sheep   

胍基丁胺脲水解酶(AGMAT)重組蛋白人水通道蛋白12B(AQP12B)ELISA試劑盒AQP12B水通道蛋白12Belisa kitHuman Aquaporin 12B(AQP12B)ELISA Kit

人水通道蛋白12(AQP12)ELISA試劑盒AQP12水通道蛋白12ELISA試劑盒Human Aquaporin 12(AQP12)ELISA Kit

人水通道蛋白11(AQP11)ELISA試劑盒AQP11水通道蛋白11elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Aquaporin 11(AQP11)ELISA Kit

人水通道蛋白10(AQP10)ELISA試劑盒AQP10水通道蛋白10elisa檢測試劑盒Human Aquaporin 10(AQP10)ELISA Kit

人雙氧化mei1(DUOX1)ELISA試劑盒DUOX1雙氧化mei1elisa kitHuman Dual Oxidase 1(DUOX1)ELISA Kit