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當前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>天然蛋白、重組蛋白>>真核蛋白/EP>> 胞外超氧化物歧化酶(SOD3)真核蛋白
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所 在 地上海市
更新時間:2023-03-22 21:34:56瀏覽次數(shù):389次
聯(lián)系我時,,請告知來自 化工儀器網(wǎng)脂蛋白關(guān)聯(lián)磷脂酶A2(LpPLA2)真核蛋白
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
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主要用途 | 僅供科研研究實驗 | 英文名稱 | Eukaryotic Superoxide Dismutase 3, Extracellular ( |
物種 | Homo sapiens (Human,,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白,。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清),。
3.通過親和,,離子交換,,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性,。
公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床,!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
胞外超氧化物歧化酶(SOD3)真核蛋白 | Eukaryotic Superoxide Dismutase 3, Extracellular (SOD3) | Homo sapiens (Human,,人) |
商品介紹:
SOD-3; EC-SOD; Extracellular Superoxide Dismutase Cu-Zn 酶與激酶 物種:Homo sapiens (Human,人) 來源:真核表達 宿主CHO Cells 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細胞定位::分泌 預(yù)測分子量:25.8kDa 實際分子量:30kDa(差異分析請參閱說明書) 片段與標簽:Trp19~Ala240 with N-terminal His Tag 緩沖液成份:PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose. 性狀:凍干粉 純度:> 97% 等電點:6.3 應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
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操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,,注意低溫操作,;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,,4℃離心5 min,;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,,蛋白定量(Bradford法,、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融,。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中,, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min,;
6. 14,000rpm,,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法,、BCA法),;
7. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
注意事項:
1,、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,,應(yīng)當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。
2、雖然作用溫和,,但能硬化組織,,固定時間過久會導致組織變脆,切片時易碎,。因此固定時間通常不宜超過 24 小時,。
3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,,可造成假陰性的染色,,影響免疫組化結(jié)果。因此,,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,,有時需要對抗原先進行修復,然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作,。
4,、本產(chǎn)品對人體有害,操作時請小心,,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi),。
5、為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作
human CD3/PE-Cy5產(chǎn)品名稱: PE-Cy5標記小鼠抗人CD3單克隆抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian
FOS B產(chǎn)品名稱: FosB抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, GuineaPig
EV71 polyprotein 3D產(chǎn)品名稱: 腸道毒71型/手足口毒3D抗體標記: Unconjugated
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SNX1產(chǎn)品名稱: 分選連接蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Horse, Rabbit
SLC12A3產(chǎn)品名稱: 鈉氯離子轉(zhuǎn)運蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Rabbit
USP3產(chǎn)品名稱: 去泛su化mei3抗體交叉反應(yīng): Human
HCP5產(chǎn)品名稱: 紅su轉(zhuǎn)運蛋白5抗體交叉反應(yīng): Human
胞外超氧化物歧化酶(SOD3)真核蛋白小鼠精氨suan加壓su受體1B(AVPR1B)ELISA試劑盒AVPR1B精氨suan加壓su受體1Belisa檢測試劑盒Mouse Arginine Vasopressin Receptor 1B(AVPR1B)ELISA Kit
小鼠精氨suan/絲氨suan豐富剪接因子4(SRSF4))ELISA試劑盒SRSF4精氨suan/絲氨suan豐富剪接因子4elisa kitMouse Serine/Arginine Rich Splicing Factor 4(SRSF4)ELISA Kit
小鼠膠質(zhì)細胞系來源神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)ELISA試劑盒GDNF膠質(zhì)細胞系來源神經(jīng)營養(yǎng)因子ELISA試劑盒Mouse Glial Cell Line Derived Neurotrophic Factor(GDNF)ELISA Kit
小鼠腱蛋白樣蛋白2(CHRDL2)ELISA試劑盒CHRDL2腱蛋白樣蛋白2elisamei聯(lián)免疫試劑盒Mouse Chordin Like Protein 2(CHRDL2)ELISA Kit
小鼠剪接因子3B亞基3(SF3B3)ELISA試劑盒SF3B3剪接因子3B亞基3elisa檢測試劑盒Mouse Splicing Factor 3B Subunit 3(SF3B3)ELISA Kit
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