蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中，通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）,。

3.通過親和，離子交換,，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白,。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性,。
公司產(chǎn)品僅供科研使用,，不得用于臨床！

商品介紹：

相關產(chǎn)品：

Recombinant Human PURA宿主: E.Coli標簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human ALDH1L1宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human AGRP宿主: E.Coli標簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human DNAJC19宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human   

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,，剪碎成3mm×3mm左右的小塊,，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,，注意低溫操作,；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分,，4℃離心5 min,；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物,，蛋白定量（Bradford法,、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融,。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞,，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中,， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

4． 細胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預冷的離心管中,，加入上述配制好的冷Lysis Buffer,，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min,；

6． 14,000rpm,，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法,、BCA法）,；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

注意事項：

1,、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,，應當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。

2,、雖然作用溫和,，但能硬化組織，固定時間過久會導致組織變脆,，切片時易碎,。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。

3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,，使之不能充分暴露,，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結(jié)果,。因此,，4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,，有時需要對抗原先進行修復，然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作,。

4,、本產(chǎn)品對人體有害，操作時請小心,，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi),。

5、為了您的安全和健康,，請穿實驗服并戴一次性手套操作 
ATP6V0A2產(chǎn)品名稱: 液泡膜質(zhì)子轉(zhuǎn)運ATPmei2型抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep

PLK5產(chǎn)品名稱: 絲氨suan/蘇氨suan蛋白激mei5抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Sheep

ATF1產(chǎn)品名稱: 活化轉(zhuǎn)錄因子1抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat

應用類型: Other英文名稱: PSMB8英文別名: Proteasome 20S LMP7; D6S216; D6S216E; Large PER2產(chǎn)品名稱: 節(jié)律蛋白2抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat

Phospho-CHEK1 (Ser296)產(chǎn)品名稱: 細胞周期檢測點激mei1抗體交叉反應: Human, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

Ankyrin G產(chǎn)品名稱: 錨定蛋白G抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit

C6orf146產(chǎn)品名稱: 6號染色體開放閱讀框146抗體交叉反應: Human

MYH8產(chǎn)品名稱: 肌球蛋白8抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Rabbit, Sheep

應用類型: IVD原料???英文名稱: Azurocidin/HBP英文別名: Azu 1; Azu1; CAP37; CAP7_HUMAN; cationic antimicrobial protein 37; Cationic antimicrobial protein CAP37; HBP; Heparin binding protein; Heparin-binding protein; HUMAZUR.   

單氨氧化酶A(MAOA)重組蛋白人內(nèi)收蛋白2(ADD2)ELISA試劑盒ADD2內(nèi)收蛋白2elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Adducin 2(ADD2)ELISA Kit

人內(nèi)收蛋白1(ADD1)ELISA試劑盒ADD1內(nèi)收蛋白1elisa檢測試劑盒Human Adducin 1(ADD1)ELISA Kit

人內(nèi)切核suanmeiV(ENDOV)ELISA試劑盒ENDOV內(nèi)切核suanmeiVelisa kitHuman Endonuclease V(ENDOV)ELISA Kit

人內(nèi)切核suanmeiG(ENDOG)ELISA試劑盒ENDOG內(nèi)切核suanmeiGELISA試劑盒Human Endonuclease G, Mitochondrial(ENDOG)ELISA Kit

人內(nèi)皮細胞粘附分子(ESAM)ELISA試劑盒ESAM內(nèi)皮細胞粘附分子elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Endothelial Cell Adhesion Molecule(ESAM)ELISA Kit