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當(dāng)前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>天然蛋白、重組蛋白>>活性蛋白/AP>> 肝素酶(HPSE)活性蛋白
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所 在 地上海市
更新時間:2023-03-23 08:40:00瀏覽次數(shù):342次
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主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Active Heparanase (HPSE) |
種屬 | Homo sapiens (Human,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
商品介紹:
HPA; HPR1; HPSE1; HSE1; Endo-glucoronidase; 酶與激酶 物種:Homo sapiens (Human,,人) 緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300) 性狀:凍干粉 純度:> 97% 等電點:9.9 應(yīng)用:Cellculture;ActivityAssays. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
公司產(chǎn)品僅供科研使用,,不得用于臨床!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
肝素酶(HPSE)活性蛋白 | Active Heparanase (HPSE) | Homo sapiens (Human,,人) |
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞,,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清),。
3.通過親和,離子交換,,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白,。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性,。
相關(guān)產(chǎn)品:
胱天蛋白酶9(CASP9)重組蛋白Recombinant Protein Kinase C Iota (PKCi)
胱天蛋白酶8關(guān)聯(lián)蛋白2(CASP8AP2)重組蛋白Recombinant ATP Dependent DNA ligase I (LIG1)
胱天蛋白酶8(CASP8)重組蛋白Recombinant Adenylate Cyclase 4 (ADCY4)
胱天蛋白酶7(CASP7)重組蛋白Recombinant Proteasome 26S Subunit, ATPase 1 (PSMC1)
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作,;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,,4℃離心5 min,;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,,蛋白定量(Bradford法,、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
4. 細(xì)胞洗滌后,,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,,4℃離心15min,,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法),;
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
DOK2產(chǎn)品名稱: D酪氨suan激mei衰減蛋白2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
SLC6A18產(chǎn)品名稱: 溶質(zhì)載體家族6成員18抗體交叉反應(yīng): Human
PCCB交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian抗體來源: Mouse
C21orf88產(chǎn)品名稱: 21號染色體開放閱讀框88抗體交叉反應(yīng): Human
Ceruloplasmin產(chǎn)品名稱: 銅藍(lán)蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Rabbit
TMEM106B交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian抗體來源: Mouse
phospho-MST1R (Tyr1353)產(chǎn)品名稱: 原基因c-Met相關(guān)酪氨suan激mei抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse
SCARA3產(chǎn)品名稱: 細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
PHD3產(chǎn)品名稱: 脯氨suan羥化mei抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow
PNPLA3產(chǎn)品名稱: 脂肪營養(yǎng)suPNPLA3抗體交叉反應(yīng): Human
肝素酶(HPSE)活性蛋白兔子Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)ELISA試劑盒Col ⅠⅠ型膠原elisa檢測試劑盒rabbit Collagen Type Ⅰ,Col Ⅰ ELISA Kit
兔轉(zhuǎn)化生長因子β3(TGFB3)ELISA試劑盒TGFB3兔轉(zhuǎn)化生長因子β3ELISA試劑盒Rabbit Transforming growth factor beta-3,TGFB3 ELISA kit
兔轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒TGFβ2兔轉(zhuǎn)化生長因子β2elisamei聯(lián)免疫試劑盒Rabbit transforming growth factorβ2,TGFβ2 ELISA Kit
兔轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGFβ1)ELISA試劑盒TGFβ1兔轉(zhuǎn)化生長因子β1elisa檢測試劑盒Rabbit TGFβ1 ELISA Kit
兔主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/RLAⅡ)ELISA試劑盒MHCⅡ/RLAⅡ兔主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類elisa kitRabbit major histocompatibility complexⅡ,MHCⅡ/RLAⅡ ELISA Kit
注意事項:
1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間,。
2、雖然作用溫和,,但能硬化組織,,固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,切片時易碎,。因此固定時間通常不宜超過 24 小時,。
3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,,可造成假陰性的染色,,影響免疫組化結(jié)果。因此,,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時,,有時需要對抗原先進(jìn)行修復(fù),然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作,。
4,、本產(chǎn)品對人體有害,,操作時請小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi),。
5,、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作
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