蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中,，通過瞬時表達產生目標蛋白,。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和,，離子交換,，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量,。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性,。
公司產品僅供科研使用，不得用于臨床,！

商品介紹：

相關產品：

假尿苷酸合酶1(PUS1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Pseudouridylate Synthase 1 (PUS1)Homo sapiens (Human,，人)

堿性磷酸酶(ALP)重組蛋白英文名稱：Recombinant Alkaline Phosphatase (ALP)Bos taurus; Bovine (Cattle，牛)

堿性鞘磷脂磷酸二酯酶(Alk-Smase)重組蛋白英文名稱：Recombinant Alkaline Sphingomyelinase (Alk-Smase)Homo sapiens (Human,，人)

角鯊烯單加氧酶(SQLE)重組蛋白英文名稱：Recombinant Squalene Epoxidase (SQLE)Homo sapiens (Human,，人)   

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,，混勻,。冰上保存數分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,，剪碎成3mm×3mm左右的小塊,，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,，注意低溫操作,；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分,，4℃離心5 min,；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中,，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法,、BCA法）,；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞,，吸去培養(yǎng)基后,，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養(yǎng)液,；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min,，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,，混勻。冰上保存數分鐘待用,。

4． 細胞洗滌后,，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer,，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上,，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm,，4℃離心15min,，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）,；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

注意事項：

1,、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,，應當根據細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調整固定時間。

2,、雖然作用溫和,，但能硬化組織，固定時間過久會導致組織變脆,，切片時易碎,。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。

3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,，使抗原決定簇的三維構象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網格結構可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露,，可造成假陰性的染色,，影響免疫組化結果。因此,，4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,，有時需要對抗原先進行修復，然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作,。

4,、本產品對人體有害，操作時請小心,，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內,。

5、為了您的安全和健康,，請穿實驗服并戴一次性手套操作 
DLK1產品名稱: 穿膜蛋白DLK1抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Pig, Rabbit, Sheep

CD1b交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian抗體來源: Mouse

ZBTB46產品名稱: 鋅指蛋白340抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Horse, Sheep

PCDHB12產品名稱: 鈣粘蛋白β12抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Cow, Sheep

phospho-PTK9 (Tyr321)產品名稱: 蛋白酪氨suan激mei9抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow

PARP1產品名稱: 多苷二磷suan多聚mei/多聚ADP-核糖聚合mei1單克隆抗體交叉反應: Human, Mouse

PLK1產品名稱: 絲氨suan/蘇氨suan蛋白激meiPlk1抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Pig, Horse, Rabbit

PKX1產品名稱: 同源盒蛋白PKX1抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

ANP32B交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian抗體來源: Mouse

MRas產品名稱: 原基因M-ras抗體交叉反應: Mouse, Rat   

磷酸乙醇酸磷酸酶(PGP)重組蛋白人端錨聚合mei2(TNKS2)ELISA試劑盒TNKS2端錨聚合mei2ELISA試劑盒Human Tankyrase 2(TNKS2)ELISA Kit

人端錨聚合mei1(TNKS1)ELISA試劑盒TNKS1端錨聚合mei1elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Tankyrase 1(TNKS1)ELISA Kit

人端粒重復結合因子2相互作用蛋白(TERF2IP)ELISA試劑盒TERF2IP端粒重復結合因子2相互作用蛋白elisa檢測試劑盒Human Telomeric Repeat Binding Factor 2 Interacting Protein(TERF2IP)ELISA Kit

人端粒重復結合因子2(TERF2)ELISA試劑盒TERF2端粒重復結合因子2elisa kitHuman Telomeric Repeat Binding Factor 2(TERF2)ELISA Kit

人端粒重復結合因子1(TERF1)ELISA試劑盒TERF1端粒重復結合因子1ELISA試劑盒Human Telomeric Repeat Binding Factor 1(TERF1)ELISA Kit