公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：兒茶酚-O-甲基轉(zhuǎn)移酶(COMT)活性蛋白   

物種：Homo sapiens (Human,，人)

英文名稱：Active Catechol-O-Methyltransferase (COMT)

酶與激酶

相關(guān)產(chǎn)品：
過(guò)氧蛋白同源物(PXDN)重組蛋白R(shí)ecombinant Polymerase DNA Directed Beta (POLb)

果糖二磷酸醛縮酶A(ALDOA)重組蛋白R(shí)ecombinant Proteasome 26S Subunit, ATPase 6 (PSMC6)

果糖胺-3-激酶(FN3K)重組蛋白R(shí)ecombinant Phosphodiesterase 4B, cAMP Specific (PDE4B)

果糖-1,6-二磷酸酶2(FBP2)重組蛋白R(shí)ecombinant Mitogen Activated Protein Kinase 7 (MAPK7)

標(biāo)簽選擇：

親和標(biāo)簽：蛋白重組表達(dá)過(guò)程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用：一方面是為了使蛋白純化過(guò)程變得更加容易；另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶,。蛋白標(biāo)簽可分兩類：一類是短肽類標(biāo)簽,；一類是長(zhǎng)肽以融合蛋白（fused partner）形式共表達(dá)。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來(lái)分析,。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,，大致步驟如下：

真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟：

a.      選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞（常用的CHO和HEK293）

b.      表達(dá)載體的構(gòu)建

c.      無(wú)內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染

e.      表達(dá)小試，條件優(yōu)化

f.       表達(dá)分析和鑒定（SDS-PGAE和WB）

g.      大量表達(dá)

h.      親和純化

i.        檢測(cè)和鑒定

原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟：

a.      選擇表達(dá)載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株

e.      蛋白表達(dá)小試分析

f.       如果蛋白可溶,，蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶,，則需要變復(fù)性來(lái)制備可溶蛋白。

h.      鑒定,，包括SDS-PAGE和WB鑒定

GZMH蛋白,；表達(dá)蛋白的分析、純化,、檢測(cè)

　　誘導(dǎo)表達(dá)成功后,，表達(dá)蛋白的分析、純化,、檢測(cè)應(yīng)該順當(dāng),，按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒(méi)太大的問(wèn)題。

操作步驟 ：

根據(jù)使用量,，取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,，使 PMSF 的zui終濃度為 1mM?；靹騻溆茫≒MSF 現(xiàn)用現(xiàn)加）,。

1、樣品前處理：

a)對(duì)于貼壁細(xì)胞：去除培養(yǎng)液,，用 PBS,、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。用槍吹打數(shù)下,，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。

b)對(duì)于懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞,，用手指把細(xì)胞用力彈散,。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液，再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞,。充分裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的細(xì)胞沉淀,。如果細(xì)胞量較多，必需分裝成 50-100 萬(wàn)細(xì)胞/管,，然后再裂解,。

c)對(duì)于組織樣品： 把切成細(xì)小的碎片,。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,，如果需要高濃度的蛋白樣品,，可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,，直至充分裂解,。

2、后處理：

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,，取上清,，即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測(cè)定、SDS-PAGE,、Western blotting 和免疫沉淀等操作

特點(diǎn)：

標(biāo)記：標(biāo)記反應(yīng)簡(jiǎn)單,、溫和且很少抑制抗體活性，將與抗體共價(jià)結(jié)合是一種非常簡(jiǎn)便,、直接的標(biāo)記方法,。

酶標(biāo)記：酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成，其應(yīng)用范圍非常廣泛,，結(jié)果即時(shí)可見,、敏感性高。

熒光標(biāo)記：熒光基團(tuán)AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一,，產(chǎn)品覆蓋350-770nm,。不同的AbFluor基團(tuán)經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光， 從而得知抗體的定位和待測(cè)抗原的分布情況,，主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色,，是一種非常好的亞細(xì)胞水平定位的方法。

PAGE4產(chǎn)品名稱: 前列相關(guān)蛋白4抗體交叉反應(yīng): Human

CD1E產(chǎn)品名稱: T細(xì)胞表面糖蛋白CD1E抗體交叉反應(yīng): Human

PI-15產(chǎn)品名稱: 肽mei劑15抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep

SerpinB8產(chǎn)品名稱: 絲氨suan蛋白mei劑B8抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit, GuineaPig, Cat

HRSP12產(chǎn)品名稱: 熱反應(yīng)蛋白12抗體交叉反應(yīng): Human

LENG1產(chǎn)品名稱: LENG1蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

CNKSR3產(chǎn)品名稱: Ras激mei因子連接增強(qiáng)蛋白3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

FAM80A產(chǎn)品名稱: FAM80A蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow

AADACL4產(chǎn)品名稱: 芳香乙酰胺脫乙?；鵰ei樣蛋白4抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Rabbit

ACKR3產(chǎn)品名稱: 型趨化因子受體3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
兒茶酚-O-甲基轉(zhuǎn)移酶(COMT)活性蛋白兔子低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒HIF-1α低氧誘導(dǎo)因子1αelisamei聯(lián)免疫試劑盒 Rabbit hypoxia-inducible factor 1α(HIF-1α) ELISA Kit

兔子白介su9(IL-9)ELISA試劑盒IL-9白介su9elisa檢測(cè)試劑盒Rabbit Interleukin 9,IL-9 ELISA Kit

兔子白介su1可溶性受體I(IL-1sR Ⅰ)ELISA試劑盒IL-1sR Ⅰ白介su1可溶性受體Ielisa kitRabbit soluble interleukin-1 receptor Ⅰ,IL-1sR Ⅰ ELISA Kit

兔子α2巨球蛋白(A2M)ELISA試劑盒A2Mα2巨球蛋白ELISA試劑盒Rabbit alpha-2-macroglobulin,A2M ELISA kit

兔子L選擇su(L-Selectin)ELISA試劑盒L-SelectinL選擇suelisamei聯(lián)免疫試劑盒Rabbit L-Selectin ELISA Kit