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當(dāng)前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>天然蛋白、重組蛋白>>真核蛋白/EP>> 中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)真核蛋白

中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)真核蛋白

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品       牌其他品牌

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更新時間:2023-03-22 21:34:08瀏覽次數(shù):464次

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供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實驗 英文名稱 Eukaryotic Neutrophil Elastase (NE)
種屬 Mus musculus (Mouse,,小鼠) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
品牌 研生
中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)真核蛋白的相關(guān)產(chǎn)品:類胰(TPS)重組蛋白英文名稱:Recombina Tryptase (TPS)類胰(TPS)重組蛋白英文名稱:Recombina Tryptase (TPS)類胰(TPS)重組蛋白英文名稱:Recombina Tryptase (TPS)

商品介紹:

ELANE; HLE; HNE; ELA2; PMN-E; Neutrophil Elastase; Medullasin; Polymorphonuclear Leukocyte Elastase; Bone Marrow Serine Protease; Human Leukocyte Elastase; PMN Elastase

酶與激酶

感染免疫

物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

來源:真核表達

宿主293F Cell

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位::細胞質(zhì), 細胞外基質(zhì)

預(yù)測分子量:21.7kDa

實際分子量:33kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Ser27~Asn265 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

性狀:凍干粉

純度:> 97%

等電點:9.6

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg   

公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床,!

產(chǎn)品名稱

英文名稱

物種

中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)真核蛋白

Eukaryotic Neutrophil Elastase (NE)

Mus musculus (Mouse,小鼠)

蛋白表達及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,,通過瞬時表達產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清),。

3.通過親和,,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白,。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。

5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。

圖片5.png

圖片1.png


相關(guān)產(chǎn)品:

鞘氨醇激酶2(SPHK2)重組蛋白Recombinant Doublecortin Like Kinase 1 (DCLK1)

鞘氨醇激酶1(SPHK1)重組蛋白Recombinant Fatty Acid Desaturase 2 (FADS2)

羥酸氧化酶2(HAO2)重組蛋白Recombinant Fatty Acid Desaturase 3 (FADS3)

羥酸氧化酶1(HAO1)重組蛋白Recombinant Hyaluronan Synthase 2 (HAS2)   
操作步驟:

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作,;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min,;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法,、BCA法),;

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,,吸去培養(yǎng)基后,,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,;

2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中,, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細胞洗滌后,,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

細胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個

0.5 mL~1 mL

5×106個

0.2 mL~0.5 mL

5.置于4℃搖床平臺上,,溫和振蕩15 min,;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法,、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

SLC5A11產(chǎn)品名稱: 碳suan氫鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白4-A11抗體交叉反應(yīng): Mouse, Rat

PEG10產(chǎn)品名稱: 高表達基因抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow

HRSP12產(chǎn)品名稱: 熱反應(yīng)蛋白12抗體交叉反應(yīng): Mouse

OR52D1產(chǎn)品名稱: 嗅覺受體52D1抗體交叉反應(yīng): Human

ZBTB7C產(chǎn)品名稱: 鋅指蛋白ZBTB7C抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Horse, Sheep

LRIG1產(chǎn)品名稱: LRIG1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

MAL產(chǎn)品名稱: MAL蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Rat

EGFL8產(chǎn)品名稱: 表皮生長因子樣蛋白8抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Horse, Rabbit, Sheep

ABI3產(chǎn)品名稱: ABI基因家族2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep

Ki-67產(chǎn)品名稱: Ki-67單克隆抗體交叉反應(yīng): Human   

中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)真核蛋白小鼠醛脫氫mei9家族成員A1(ALDH9A1)ELISA試劑盒ALDH9A1醛脫氫mei9家族成員A1ELISA試劑盒Mouse Aldehyde Dehydrogenase 9 Family, Member A1(ALDH9A1)ELISA Kit

小鼠趨化因子C-C-基元受體8(CCR8)ELISA試劑盒CCR8趨化因子C-C-基元受體8elisamei聯(lián)免疫試劑盒Mouse Chemokine C-C-Motif Receptor 8(CCR8)ELISA Kit

小鼠氫/鉀離子交換ATPmeiβ肽(ATP4β)ELISA試劑盒ATP4β氫/鉀離子交換ATPmeiβ肽elisa檢測試劑盒Mouse ATPase, H+/K+ Exchanging Beta Polypeptide(ATP4b)ELISA Kit

小鼠氫/鉀離子交換ATPmeiα肽(ATP4α)ELISA試劑盒ATP4α氫/鉀離子交換ATPmeiα肽elisa kitMouse ATPase, H+/K+ Exchanging Alpha Polypeptide(ATP4a)ELISA Kit

小鼠鞘氨醇1磷suan酯裂解mei1(SGPL1)ELISA試劑盒SGPL1鞘氨醇1磷suan酯裂解mei1ELISA試劑盒Mouse Sphingosine 1 Phosphate Lyase 1(SGPL1)ELISA Kit  
注意事項:

1,、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間,。

2,、雖然作用溫和,但能硬化組織,,固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時,。

3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,,影響免疫組化結(jié)果,。因此,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,,有時需要對抗原先進行修復(fù),,然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。

4、本產(chǎn)品對人體有害,,操作時請小心,,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5,、為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作 

 


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