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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2023-03-22 21:02:50瀏覽次數(shù):266次
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主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Proteasome Subunit Beta Type 3 (PSMb3) |
種屬 | Homo sapiens (Human,,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性:
特點(diǎn):
標(biāo)記:標(biāo)記反應(yīng)簡(jiǎn)單、溫和且很少抑制抗體活性,將與抗體共價(jià)結(jié)合是一種非常簡(jiǎn)便、直接的標(biāo)記方法,。
酶標(biāo)記:酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成,,其應(yīng)用范圍非常廣泛,結(jié)果即時(shí)可見,、敏感性高,。
熒光標(biāo)記:熒光基團(tuán)AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一,產(chǎn)品覆蓋350-770nm,。不同的AbFluor基團(tuán)經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光,, 從而得知抗體的定位和待測(cè)抗原的分布情況,主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色,,是一種非常好的亞細(xì)胞水平定位的方法。
產(chǎn)品名稱:蛋白酶體亞基β3(PSMb3)重組蛋白
物種:Homo sapiens (Human,,人)
英文名稱:Recombinant Proteasome Subunit Beta Type 3 (PSMb3)
HC10-II; Proteasome theta chain; Proteasome component C10-II; Proteasome chain 13
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,,人) 來源:原核表達(dá) 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定) 亞細(xì)胞定位::細(xì)胞核, 細(xì)胞質(zhì) 預(yù)測(cè)分子量:26.6kDa 實(shí)際分子量:27kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書) 片段與標(biāo)簽:Met1~Asp205 with N-terminal His Tag 緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.) 性狀:凍干粉 純度:> 95% 等電點(diǎn):6.1 應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
相關(guān)產(chǎn)品:
脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNASE1)重組蛋白R(shí)ecombinant Caspase 4 (CASP4)
脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNASE1)活性蛋白R(shí)ecombinant Phosphofructokinase, Platelet (PFKP)
脫氧輔蛋白羥化酶/單加氧酶(DOHH)重組蛋白R(shí)ecombinant Ribonuclease A3 (RNASE3)
脫氧輔蛋白合酶(DHPS)重組蛋白R(shí)ecombinant Phospholipid Scramblase 1 (PLSCR1)
標(biāo)簽選擇:
親和標(biāo)簽:蛋白重組表達(dá)過程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易,;另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶,。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽;一類是長(zhǎng)肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達(dá),。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析,。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:
真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表達(dá)載體的構(gòu)建
c. 無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提
d. 細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染
e. 表達(dá)小試,,條件優(yōu)化
f. 表達(dá)分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表達(dá)
h. 親和純化
i. 檢測(cè)和鑒定
原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株
e. 蛋白表達(dá)小試分析
f. 如果蛋白可溶,,蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白,。
h. 鑒定,,包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白;表達(dá)蛋白的分析,、純化,、檢測(cè)
誘導(dǎo)表達(dá)成功后,表達(dá)蛋白的分析,、純化,、檢測(cè)應(yīng)該順當(dāng),按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒太大的問題,。
操作步驟 :
根據(jù)使用量,,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM,?;靹騻溆茫≒MSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。
1,、樣品前處理:
a)對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,,用 PBS,、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。用槍吹打數(shù)下,,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。
b)對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,,用手指把細(xì)胞用力彈散,。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞,。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀,。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管,,然后再裂解,。
c)對(duì)于組織樣品: 把切成細(xì)小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量),。用玻璃勻漿器勻漿,,直至充分裂解。
2,、后處理:
將裂解后
的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測(cè)定,、SDS-PAGE,、Western blotting 和免疫沉淀等操作
FUCA1產(chǎn)品名稱: α-L巖藻糖苷mei抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse
CA II產(chǎn)品名稱: mei2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
TAB1產(chǎn)品名稱: 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β活化激mei結(jié)合蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
PEX14產(chǎn)品名稱: 過氧化物mei體生物合成因子14抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
HNMT產(chǎn)品名稱: 組織胺N-甲基轉(zhuǎn)移mei抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse, Sheep
英文名稱: Avi-Tag英文別名: AviTag; Avi; Avi Tag; GLNDIFEAQKIEWHE
Muscarinic Acetylcholine receptor M3產(chǎn)品名稱: 毒蕈堿型乙酰受體M3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
AMPD3產(chǎn)品名稱: 紅細(xì)胞苷脫氨mei3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
NLRP8產(chǎn)品名稱: NLRP8蛋白抗體交叉反應(yīng): Human
RIT1產(chǎn)品名稱: RIT1蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep
蛋白酶體亞基β3(PSMb3)重組蛋白人85kDa核孔蛋白(NUP85)ELISA試劑盒NUP8585kDa核孔蛋白elisa kitHuman Nucleoporin 85kDa(NUP85)ELISA Kit
人7-脫氫還原mei(DHCR7)ELISA試劑盒DHCR77-脫氫還原meiELISA試劑盒Human 7-Dehydrocholesterol Reductase(DHCR7)ELISA Kit
人70kDa熱休克蛋白結(jié)合蛋白1(HSPBP1)ELISA試劑盒HSPBP170kDa熱休克蛋白結(jié)合蛋白1elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Heat Shock 70kDa Binding Protein 1(HSPBP1)ELISA Kit
人70kDa熱休克蛋白9(HSPA9)ELISA試劑盒HSPA970kDa熱休克蛋白9elisa檢測(cè)試劑盒Human Heat Shock 70kDa Protein 9(HSPA9)ELISA Kit
人70kDa熱休克蛋白4(HSPA4)ELISA試劑盒HSPA470kDa熱休克蛋白4elisa kitHuman Heat Shock 70kDa Protein 4(HSPA4)ELISA Kit
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