產(chǎn)品名稱：慢性骨髓性白血病細(xì)胞;K-562

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào)：YS-02X9639

細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長(zhǎng)良好,，形態(tài)正常

儲(chǔ)存條件：2℃-8℃，避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞特性：

1)】組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織,。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽(yáng)性,。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1,、 HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：上皮樣，不規(guī)則細(xì)胞,，貼壁培養(yǎng),。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,；Glutamax（invitrogen 35050061），1%,；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070）,，1%；雙抗,，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過(guò)夜）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,，細(xì)胞密度適合,，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,，而且消化時(shí)不容易分散,；

（2）凍存的密度不宜過(guò)低，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107）,，一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管）,，10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管。

（3）消化和吹打,，切忌胰酶消化過(guò)度,，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡,。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液,。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很?chē)?yán)格,，我從10%-90%都用過(guò)，問(wèn)題不大,，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛！另外,，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,，移入凍存管,。

（5）關(guān)于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法,，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,，4度2h，-20度2h或更長(zhǎng),，-80度過(guò)夜,，最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,，推薦使用程序降溫盒,，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,，很方便,，省了包棉花、4度,、-20度了,。

GFP (Green Fluorecent protein) 綠色熒光蛋白多肽抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

GOLM1 GOLM1 / GP73 鼠單抗 (FITC) Human

Rhesus antibody Rh Phospho-Dab1 (Ser491) 磷酸化Disabled 1抗體 規(guī)格 0.1ml

預(yù)染蛋白Marker分子量標(biāo)準(zhǔn)(10-250kDa) 10次 MBI分裝

ZNF230 英文名稱： 鋅指蛋白230抗體 0.2ml

DACH1 英文名稱： 細(xì)胞命運(yùn)決定因子DACH1抗體 0.2ml

GOLM1 GOLM1 / GP73 鼠單抗 (FITC) Human

Galectin-3(human) 人半乳糖凝集素-3Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 CPSF4/CPSF30 剪切和多聚腺苷酸化特異性因子4抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh NMDA-NR1/NR1/NMDAR1 天冬氨酸受體抗體 規(guī)格 0.1ml

Human Gliadin IgA ELISA Kit 人蛋白IgA 96T

TRAP1 英文名稱： 熱休克蛋白75抗體 0.2ml

CSGLCAT 英文名稱： 軟骨素聚合酶3抗體 0.2ml

 CPSF4/CPSF30 剪切和多聚腺苷酸化特異性因子4抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

SOX8 英文名稱： 核轉(zhuǎn)錄因子SOX8抗體 0.2ml

Phospho-FAK(Tyr576 + Tyr577) 英文名稱： 磷酸化粘著斑激酶抗體 0.1ml

褪黑素受體/松果體素受體抗體  MTR-1A 0.1ml

 Sema3F/FITC 熒光素標(biāo)記臂板蛋白3F抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Paxillin(Ser178) 磷酸化樁蛋白Paxillin抗體 規(guī)格 0.1ml

AEBP1 (Adipocyte enhance binding protein 1) 脂肪細(xì)胞增強(qiáng)結(jié)合蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
慢性骨髓性白血病細(xì)胞;K-562L-焦谷氨酸;氧脯氨酸卷曲霉素組織KSHV（KAPOSI SARCOMA-ASSOCIATED HERPESVIRUS）病定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒

CBZ-L-焦谷氨酸妥布霉素體液KSHV（KAPOSI SARCOMA-ASSOCIATED HERPESVIRUS）病定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒

DL-m-酪氨酸麥白霉素KSHV（KAPOSI SARCOMA-ASSOCIATED HERPESVIRUS）病標(biāo)準(zhǔn)曲線定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒

肌氨酸甲酯鹽酸鹽小諾霉素通用型WNV（WEST NILE）病定性檢測(cè)試劑盒

Tris,三羥甲基氨烷;氨丁三;緩血酸銨制霉素WNV（WEST NILE）病定性檢測(cè)試劑盒

N-(叔丁氧羰基)乙 磺芐西林組織WNV（WEST NILE）病定性檢測(cè)試劑盒

L-異亮氨 乙酰螺旋霉素體液WNV（WEST NILE）病定性檢測(cè)試劑盒

L-亮氨 核糖霉素通用型WNV（WEST NILE）病定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基,，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈,。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),，標(biāo)記劃線，加熱溶解,，補(bǔ)充水分,，測(cè)定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定,。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi),。

（三）過(guò)濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,，將上述培養(yǎng)基倒入其中過(guò)濾至透明,。

（四）分裝：將過(guò)濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml）,，塞好棉塞用牛皮紙包扎好,，準(zhǔn)備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌,，常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性,，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,，即壓力越大,，蒸汽溫度就越高。因此,，在同一溫度條件下,，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,，菌體吸收水分后,，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng),，殺菌效果好,。