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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2022-03-16 20:45:25瀏覽次數(shù):267次
聯(lián)系我時(shí),,請告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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貨號 | YS-02X9637 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研使用 |
產(chǎn)品名稱:套細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞;JeKo-1
規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號:YS-02X9637
細(xì)胞生長實(shí)驗(yàn) :細(xì)胞生長良好,,形態(tài)正常
儲存條件:2℃-8℃,,避光儲存
運(yùn)輸條件:冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%,;Glutamax(invitrogen 35050061),1%,;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),,1%;雙抗,,1%,。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
注意事項(xiàng):
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),,細(xì)胞最好在對數(shù)生長期,細(xì)胞密度適合,,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,,過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時(shí)不容易分散,;
(2)凍存的密度不宜過低,,10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),,一瓶凍一管(1.5ml凍存管),,10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個(gè)細(xì)胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,,切忌胰酶消化過度,,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡,。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液,。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格,,我從10%-90%都用過,問題不大,,個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,,能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛!另外,,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,,移入凍存管,。
(5)關(guān)于“慢凍",傳統(tǒng)的方法,,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,,4度2h,-20度2h或更長,,-80度過夜,,最后液氮。對于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,,推薦使用程序降溫盒,,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,,很方便,,省了包棉花、4度,、-20度了,。
使用步驟:
一)準(zhǔn)確稱量試劑:根據(jù)不同的菌類和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈,。
(二)校正pH值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),,標(biāo)記劃線,加熱溶解,,補(bǔ)充水分,,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計(jì)測定,。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi),。
(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,,將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明,。
(四)分裝:將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)(試管內(nèi)每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),,塞好棉塞用牛皮紙包扎好,,準(zhǔn)備滅菌。
(五)滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,,常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性,,須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的,。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,,蒸汽溫度就越高,。因此,在同一溫度條件下,,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,,其蛋白質(zhì)易于凝固變性,,因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng),殺菌效果好,。
細(xì)胞特性:
1)】組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織,。
2)細(xì)胞鑒定:細(xì)胞免疫熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%,。
4)不含有 HIV-1,、 HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌。
5)細(xì)胞生長方式:上皮樣,,不規(guī)則細(xì)胞,,貼壁培養(yǎng)。
Reprimo/Rprm/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的糖基化蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
GRGDS peptide 粘附多肽GRGDSMulti-class antibodies規(guī)格: 1mg
Lpin1 抗體 Lpin1 protein 0.1ml
SH2D1A 英文名稱: 信號傳導(dǎo)T細(xì)胞活化相關(guān)蛋白抗體 0.2ml
FAM82A1 英文名稱: 微管動(dòng)力調(diào)節(jié)蛋白FAM82A抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-PKMYT1(Thr495) 磷酸化髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1激酶抗體 規(guī)格 0.1ml
GRGDS peptide 粘附多肽GRGDSMulti-class antibodies規(guī)格: 1mg
CEAcam8/CD67 (carcinoembryonic gen-related cell adhesion molecule 8) 癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子8(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
CCL3/MIP-1 Alpha 巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PCDHA8 原鈣粘附蛋白α8抗體 規(guī)格 0.2ml
TF Kit Human 人 Transferrin / TF ELISA配對抗體 ELISA
TRAP220 英文名稱: 甲狀腺受體相關(guān)蛋白220抗體 0.2ml
Cytokeratin 5 英文名稱: 細(xì)胞角蛋白5抗體 0.1ml
CCL3/MIP-1 Alpha 巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
STAT1 p84+p91 英文名稱: 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體 0.2ml
FOXM1 英文名稱: 叉頭蛋白M1抗體 0.2ml
髓樣分化蛋白抗體 MyD88 0.1ml
Sema6A/FITC 熒光素標(biāo)記抗Sema6A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-PARK2(Ser378) 磷酸化帕金蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
AGER(Advanced glycosylation end product-specific receptor) 晚期糖基化終末產(chǎn)物特異性受體(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
套細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞;JeKo-13-(3-吡啶基)-L-氨酸環(huán)己烷HPV6(HUMAN PAPILLOMAVIRUS-6)病標(biāo)準(zhǔn)曲線定量PCR擴(kuò)增檢測試劑盒
3-(3-吡啶基)-D-氨酸氯霉素通用型HPV7(HUMAN PAPILLOMAVIRUS-7)病定性檢測試劑盒
FMOC-D-3-(3-吡啶基)-氨酸土霉素HPV7(HUMAN PAPILLOMAVIRUS-7)病定性檢測試劑盒
L-瓜氨酸環(huán)素組織HPV7(HUMAN PAPILLOMAVIRUS-7)病定性檢測試劑盒
Fmoc-L-瓜氨酸紅霉素體液HPV7(HUMAN PAPILLOMAVIRUS-7)病定性檢測試劑盒
Boc-L-β-高氨酸鏈霉素通用型HPV7(HUMAN PAPILLOMAVIRUS-7)病定量PCR擴(kuò)增檢測試劑盒
Boc-L-beta-谷氨酸5-芐酯新霉素HPV7(HUMAN PAPILLOMAVIRUS-7)病定量PCR擴(kuò)增檢測試劑盒
Fmoc-L-β-谷氨酸5-叔丁基酯多素B組織HPV7(HUMAN PAPILLOMAVIRUS-7)病定量PCR擴(kuò)增檢測試劑盒
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