產(chǎn)品名稱：高分化;HCC94

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號：YS-02X9784

細胞生長實驗 ：細胞生長良好,，形態(tài)正常

儲存條件：2℃-8℃,，避光儲存

運輸條件：冰袋冷藏運輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1） 準備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質胎牛血清,，10%,；Glutamax（invitrogen 35050061），1%,；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070）,，1%；雙抗,，1%,。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細胞處理：

1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入250px皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細胞密度,。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。

注意事項：

（1）凍存前細胞狀態(tài),，細胞最好在對數(shù)生長期,，細胞密度適合,，剛剛發(fā)生細胞融合，過密或連成片的細胞狀態(tài)不好,，而且消化時不容易分散,；

（2）凍存的密度不宜過低,，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,，我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管）,，10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細胞）分成兩管,。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度,，吹打不可太用力,，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,，不是加入凍存液再吹打,。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格,，我從10%-90%都用過,，問題不大，個人認為10%-20%可以了,，能節(jié)約處就節(jié)約點嘛,！另外，凍存液可以在處理細胞前配置,，放在4度冰箱預冷,。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸，移入凍存管,。

（5）關于“慢凍",，傳統(tǒng)的方法，LLC細胞凍存管用棉花包好,，4度2h,，-20度2h或更長，-80度過夜,，最后液氮,。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室，推薦使用程序降溫盒,，內裝異丙醇,，在-80度并內可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花,、4度,、-20度了。

使用步驟：

一）準確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途,，選擇適宜的培養(yǎng)基,，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內,，標記劃線,，加熱溶解，補充水分,，測定酸堿度,，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調節(jié)pH值到適宜范圍內,。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上,，再用人子宮成纖維細胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明,。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內（試管內每支裝5mL,；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好,，準備滅菌,。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死,，但細菌的芽胞有較強的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的,。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,，即壓力越大，蒸汽溫度就越高,。因此,，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下,，菌體吸收水分后，其蛋白質易于凝固變性,，因為蒸汽的穿透力強,，殺菌效果好。

細胞特性：

1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織,。

2)細胞鑒定：細胞免疫熒光染色為陽性,。

3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%,。

4)不含有 HIV-1,、 HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌。

5)細胞生長方式：上皮樣,，不規(guī)則細胞,，貼壁培養(yǎng)。
phospho-Smad2(p-Ser465) /FITC 熒光素標記兔抗人,、大,、小鼠、,，馬,，犬，雞磷酸化Smad2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

DRADA/ADAR1(Double-stranded RNA-specific adenosine deaminase)N terminal 雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗原(N端)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

陰離子轉運蛋白-1  OAT-1 human 0.1ml

SEN1 英文名稱： 細胞衰老相關蛋白1抗體 0.2ml

EIF4B 英文名稱： 真核翻譯起始因子4B抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-NR1D1(Ser55/59) 磷酸化細胞核受體Rev-Erbα抗體 規(guī)格 0.1ml

DRADA/ADAR1(Double-stranded RNA-specific adenosine deaminase)N terminal 雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗原(N端)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

CDK4(Cyclin Dependent Kinase 4) 周期素依賴性激酶4(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5ml

 CCL16/HCC-4 巨噬細胞炎性蛋白16抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PCDHA1 原鈣粘附蛋白α1抗體 規(guī)格 0.2ml

CR2 Kit Human 人 CD21 / C3DR ELISA配對抗體 ELISA

TIM4 英文名稱： T細胞膜蛋白4抗體 0.1ml

Exportin-2 英文名稱： 細胞凋亡敏感性基因抗體 0.1ml

 CCL16/HCC-4 巨噬細胞炎性蛋白16抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rabbit  rat IgM 兔抗大鼠IgM 1mg

Fibulin 5 英文名稱： 衰老關鍵蛋白抗體 0.2ml

熱休克蛋白-27抗體  HSP-27 0.1ml

 PLGF/FITC 熒光素標記胎盤生長因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-Rb/p105-Rb(Ser780) 磷酸化成視網(wǎng)膜細胞瘤抑癌蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

Anthrax 炭疽沉淀素血清(馬來源)Multi-class antibodies規(guī)格： 1ml
高分化;HCC94馬尿酸擬人參皂苷-RT5通用型豬細小?。≒PV）基因檢測試劑盒

馬來酸溴那敏鳥苷通用型豬沙門氏菌（Swine Salmonella）基因檢測試劑盒

馬來酸溴那敏(標準品)尿囊素通用型豬傳染性胃腸炎/豬呼吸（TGEV/PRCV）基因檢測試劑盒

扁蓄苷(標準品)檸檬苦素通用型豬圓環(huán)?。–IRCOVIRUS）基因檢測試劑盒

匹莫丹牛蒡子苷通用型豬輪狀病（Porcine rotavirus）基因檢測試劑盒

2-氨基-4'-氟二甲酮牛蒡子苷元通用型豬胸膜肺炎（APP）基因檢測試劑盒

2-氨基-4'-氯二甲酮歐當歸內酯A通用型豬副豬嗜血桿菌（HPS）基因檢測試劑盒

原百部堿(標準品)歐前胡素通用型豬布病基因檢測試劑盒