細胞特性：

1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。

2)細胞鑒定：細胞免疫熒光染色為陽性,。

3)經鑒定細胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1,、 HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌。

5)細胞生長方式：上皮樣,，不規(guī)則細胞,，貼壁培養(yǎng)。
產品名稱：SV40轉染成骨細胞;hFOB 1.19

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號：YS-02X9860

細胞生長實驗 ：細胞生長良好,，形態(tài)正常

儲存條件：2℃-8℃,，避光儲存

運輸條件：冰袋冷藏運輸
公司產品僅用于科研

細胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1） 準備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質胎牛血清,，10%,；Glutamax（invitrogen 35050061），1%,；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070）,，1%；雙抗,，1%,。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO,，現用現配,。

二． 細胞處理：

1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入250px皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細胞密度,。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。

注意事項：

（1）凍存前細胞狀態(tài),，細胞最好在對數生長期，細胞密度適合,，剛剛發(fā)生細胞融合,，過密或連成片的細胞狀態(tài)不好，而且消化時不容易分散,；

（2）凍存的密度不宜過低,，10的6次方-7次方的數量級比較好，我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107）,，一瓶凍一管（1.5ml凍存管）,，10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細胞）分成兩管。

（3）消化和吹打,，切忌胰酶消化過度,，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡,。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液,。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格,，我從10%-90%都用過，問題不大,，個人認為10%-20%可以了,，能節(jié)約處就節(jié)約點嘛！另外,，凍存液可以在處理細胞前配置,，放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸，移入凍存管,。

（5）關于“慢凍",，傳統(tǒng)的方法，LLC細胞凍存管用棉花包好,，4度2h,，-20度2h或更長，-80度過夜,，最后液氮,。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數量多的實驗室，推薦使用程序降溫盒,，內裝異丙醇,，在-80度并內可以逐漸降溫，很方便,，省了包棉花,、4度、-20度了,。

使用步驟：

一）準確稱量試劑：根據不同的菌類和用途,，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈,。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內,，標記劃線，加熱溶解,，補充水分,，測定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計測定,。用1N NaOH和1N HCl調節(jié)pH值到適宜范圍內,。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用人子宮成纖維細胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明,。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內（試管內每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml）,，塞好棉塞用牛皮紙包扎好,，準備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌,，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死,，但細菌的芽胞有較強的抗熱性,，須經高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大,，蒸汽溫度就越高,。因此，在同一溫度條件下,，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后,，其蛋白質易于凝固變性，因為蒸汽的穿透力強,，殺菌效果好,。

Snail/FITC 熒光素標記抗Snail蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

C-Peptide( C-PEP ) C-肽(C肽)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

骨橋蛋白抗體  OPN 0.1ml

Salmonella typhimurium 英文名稱： 鼠傷寒沙門氏菌 0.2ml

phospho-EGFR (Tyr1172) 英文名稱： 磷酸化表皮生長因子受體抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-NMDAR2B (Ser1480) 磷酸化谷受體2B抗體 規(guī)格 0.1ml

C-Peptide( C-PEP ) C-肽(C肽)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

NO(Nitric Oxide )human 一氧化氮(人)Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 CRHR2/CRFR2 促腎上腺皮質釋放受體2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh NKB 神經激肽B抗體 規(guī)格 0.2ml

Human orosomucoid,ORM ELISA Kit 人類粘蛋白 96T

Tex14 英文名稱： 癌/抗原113抗體 0.2ml

CENTG3 英文名稱： CENTG3蛋白抗體 0.1ml

 CRHR2/CRFR2 促腎上腺皮質釋放受體2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Donkey  rabbit IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的驢抗兔IgG 0.1ml

FIZ1 英文名稱： 鋅指蛋白798抗體 0.2ml

粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子抗體  G-CSF 0.1ml

 JNK3/MAPK10/FITC 熒光素標記氨基末端激酶3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Smad3(Ser208) 磷酸化細胞信號轉導分子SMAD3抗體 規(guī)格 0.1ml

Mouse  Rabbit IgM 小鼠抗兔IgM (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格： 1mg
SV40轉染成骨細胞;hFOB 1.19CD6920次人鱗狀上皮癌抗原2（SCCAg-2）ELISA試劑盒,SCCAg-2 ELISA kit

CD33620次人抗表皮基底膜抗體（EBMZ）ELISA試劑盒, EBMZ ELISA kit

血液抗凝試劑專題人熱休克蛋白糖蛋白96（HSP gp96）ELISA試劑盒,

名稱規(guī)格人孕酮受體（PGR）ELISA試劑盒,

EDTA二鉀血液抗凝液100毫升人纖維連接蛋白（cFn）ELISA試劑盒,

EDTA三鉀血液抗凝液100毫升人B因子（BF）ELISA試劑盒,

EDTA鈉血液抗凝液100毫升小鼠神經絲蛋白（NF）ELISA試劑盒,

ACD血液抗凝液100毫升小鼠高鐵血紅蛋白（MHB）ELISA試劑盒,

肝素鈉血液抗凝液100毫升小鼠晚期糖基化終末產物（AGEs）ELISA試劑盒,

OXALATE（鈉鹽）血液抗凝液100毫升小鼠鈣結合蛋白（CR）ELISA試劑盒,

OXALATE（鉀鹽）血液抗凝液100毫升小鼠鐵蛋白（FE）ELISA試劑盒,

OXALATE（氨鹽）血液抗凝液100毫升小鼠抗平滑肌抗體（ASMA）ELISA試劑盒,

OXALATE（氨鉀鹽）血液抗凝液100毫升小鼠C肽（C-Peptide）ELISA試劑盒,

FLUORIDE血液抗凝液100毫升小鼠骨鈣素/骨谷蛋白（OT/BGP）ELISA試劑盒,

OXALATE/FLUORIDE混合血液抗凝液100毫升小鼠誘導型一氧化氮合成酶（iNOS）ELISA試劑盒,