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芳香胺-N-乙?;D(zhuǎn)移酶(AANAT)重組蛋白

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更新時間:2023-03-21 20:29:47瀏覽次數(shù):342次

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供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Arylalkylamine-N-Acetyltransferase (AA
種屬 Homo sapiens (Human,,人) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
品牌 研生
芳香胺-N-乙酰基轉(zhuǎn)移酶(AANAT)重組蛋白公司正在出售的產(chǎn)品:腸道腺病毒型PCR檢測試劑盒Eeric Adenovirus41PCR腸道致細(xì)胞病變?nèi)斯聝翰《綪CR檢測試劑盒Eeric Cytopathic Human Orphan Virus(ECHO)RTPCR腸桿菌屬通用PCR檢測試劑盒Eerobacter spp.PCR腸桿菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒Eerobacter spp.

公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱:芳香胺-N-乙?;D(zhuǎn)移酶(AANAT)重組蛋白   

物種:Homo sapiens (Human,,人)

英文名稱:Recombinant Arylalkylamine-N-Acetyltransferase (AANAT)

AA-NAT; SNAT; Aralkylamine N-Acetyltransferase; Serotonin Acetyltransferase; Serotonin Acetylase; Serotonin N-Acetyltransferase; Melatonin Rhythm Enzyme

酶與激酶

代謝通路

神經(jīng)科學(xué)

發(fā)育科學(xué)

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位::細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測分子量:27.0kDa

實(shí)際分子量:25kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Met1~Cys207 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 95%

等電點(diǎn):7.2

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

特點(diǎn):

標(biāo)記:標(biāo)記反應(yīng)簡單,、溫和且很少抑制抗體活性,,將與抗體共價(jià)結(jié)合是一種非常簡便、直接的標(biāo)記方法,。

酶標(biāo)記:酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成,,其應(yīng)用范圍非常廣泛,結(jié)果即時可見,、敏感性高,。

熒光標(biāo)記:熒光基團(tuán)AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一,產(chǎn)品覆蓋350-770nm,。不同的AbFluor基團(tuán)經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光,, 從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況,主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色,,是一種非常好的亞細(xì)胞水平定位的方法,。

相關(guān)產(chǎn)品:
Recombinant Rabbit tnfa宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Rabbit

Recombinant Human LAMTOR5宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human MRTFA宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human ZEB1宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

圖片6.png


標(biāo)簽選擇:

親和標(biāo)簽:蛋白重組表達(dá)過程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易;另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶,。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽,;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達(dá)。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析,。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,,大致步驟如下:

真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:

a.      選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞(常用的CHO和HEK293)

b.      表達(dá)載體的構(gòu)建

c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細(xì)胞瞬時轉(zhuǎn)染

e.      表達(dá)小試,條件優(yōu)化

f.       表達(dá)分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)

g.      大量表達(dá)

h.      親和純化

i.        檢測和鑒定

原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:

a.      選擇表達(dá)載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株

e.      蛋白表達(dá)小試分析

f.       如果蛋白可溶,,蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶,,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白。

h.      鑒定,,包括SDS-PAGE和WB鑒定

GZMH蛋白,;表達(dá)蛋白的分析、純化,、檢測

  誘導(dǎo)表達(dá)成功后,,表達(dá)蛋白的分析,、純化、檢測應(yīng)該順當(dāng),,按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒太大的問題,。

SLC10A1產(chǎn)品名稱: 鈉離子/牛磺膽suan共轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Horse, Rabbit

Bax產(chǎn)品名稱: Bax抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

Myoglobin產(chǎn)品名稱: 肌紅蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

SMARCA4產(chǎn)品名稱: 抑基因SNF2β抗體交叉反應(yīng): Human

Beta catenin產(chǎn)品名稱: β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)su/β鏈接su抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep

IRF9/ISGF3產(chǎn)品名稱: 干擾su調(diào)節(jié)因子9抗體交叉反應(yīng): Human

QPRT/QAPRTase產(chǎn)品名稱: 喹啉suan磷suan核糖基轉(zhuǎn)移mei抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Sheep

Phospho-NFKB1 (Ser903)產(chǎn)品名稱: 細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體產(chǎn)品別名: NFκB-p105/p50; NFκB-p105 / p50; NFκB p105/p50; NF κB p105/p50; NF κB p105 / p50;

phospho-Rb (Ser780)產(chǎn)品名稱: 成視網(wǎng)膜細(xì)胞抑蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow

IDO1產(chǎn)品名稱: 吲哚胺2,3-雙加氧mei抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
芳香胺-N-乙?;D(zhuǎn)移酶(AANAT)重組蛋白人遲現(xiàn)抗原4(VLA4)ELISA試劑盒VLA4遲現(xiàn)抗原4elisa kitHuman very late appearing antigen 4,VLA4 ELISA Kit

人程序性細(xì)胞死亡因子4(PDCD4)ELISA試劑盒PDCD4程序性細(xì)胞死亡因子4ELISA試劑盒Human PDCD4 ELISA Kit

人程序性死亡因子配體1(PD-L1/CD274)ELISA試劑盒PD-L1/CD274程序性死亡因子配體1elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human PD-L1 ELISA Kit

人程序性死亡-1(PD-1)ELISA試劑盒PD-1程序性死亡-1elisa檢測試劑盒Human PD-1 ELISA Kit

人成熟促進(jìn)因子(MPF)ELISA試劑盒MPF成熟促進(jìn)因子elisa kitHuman maturation promoting factor,MPF ELISA Kit
操作步驟

根據(jù)使用量,,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM,?;靹騻溆茫≒MSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。

1,、樣品前處理:

a)對于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍,。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸,。

b)對于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞,。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管,,然后再裂解。

c)對于組織樣品: 把切成細(xì)小的碎片,。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,,可以適當(dāng)減少裂解液的用量),。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解,。

2,、后處理:

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,,即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE,、Western blotting 和免疫沉淀等操作

 


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