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當(dāng)前位置:上海研生實(shí)業(yè)有限公司>>天然蛋白,、重組蛋白>>真核蛋白/EP>> 顆粒酶A(GZMA)真核蛋白
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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2023-03-22 21:30:43瀏覽次數(shù):347次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 化工儀器網(wǎng)脂蛋白關(guān)聯(lián)磷脂酶A2(LpPLA2)真核蛋白
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
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主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Eukaryotic Granzyme A (GZMA) |
種屬 | Homo sapiens (Human,,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性:
特點(diǎn):
標(biāo)記:標(biāo)記反應(yīng)簡(jiǎn)單,、溫和且很少抑制抗體活性,將與抗體共價(jià)結(jié)合是一種非常簡(jiǎn)便,、直接的標(biāo)記方法。
酶標(biāo)記:酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成,,其應(yīng)用范圍非常廣泛,,結(jié)果即時(shí)可見、敏感性高,。
熒光標(biāo)記:熒光基團(tuán)AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一,,產(chǎn)品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團(tuán)經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光,, 從而得知抗體的定位和待測(cè)抗原的分布情況,,主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色,是一種非常好的亞細(xì)胞水平定位的方法,。
產(chǎn)品名稱:顆粒酶A(GZMA)真核蛋白
物種:Homo sapiens (Human,,人)
英文名稱:Eukaryotic Granzyme A (GZMA)
CTLA3; HFSP; HF; H factor; Granzyme 1; Fragmentin-1; Hanukkah factor; Cytotoxic T-Lymphocyte-Associated Serine Esterase 3; CTL tryptase; Cytotoxic T-lymphocyte proteinase 1
酶與激酶
感染免疫
免疫分子
物種:Homo sapiens (Human,人) 來源:真核表達(dá) 宿主Yeast 內(nèi)毒素水平:<1.0EU per 1ug (determined by the LAL method) 亞細(xì)胞定位::分泌 預(yù)測(cè)分子量:28.2kDa 實(shí)際分子量:28kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書) 片段與標(biāo)簽:Ile29~Val262 with N-terminal His Tag 緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液,,(pH8.0,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 5% Trehalose and Proclin300) 性狀:凍干粉 純度:> 97% 等電點(diǎn):9.2 應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
相關(guān)產(chǎn)品:
乳酸脫氫酶D(LDHD)重組蛋白R(shí)ecombinant Elastase 3A (ELA3A)
乳酸脫氫酶C(LDHC)重組蛋白R(shí)ecombinant Elastase 3B (ELA3B)
乳酸脫氫酶B(LDHB)重組蛋白R(shí)ecombinant Homogentisate-1,2-Dioxygenase (HGD)
乳酸脫氫酶A(LDHA)重組蛋白R(shí)ecombinant 4-Hydroxyphenylpyruvate Dioxygenase (HPD)
標(biāo)簽選擇:
親和標(biāo)簽:蛋白重組表達(dá)過程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易,;另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽,;一類是長(zhǎng)肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達(dá),。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,,大致步驟如下:
真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表達(dá)載體的構(gòu)建
c. 無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提
d. 細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染
e. 表達(dá)小試,,條件優(yōu)化
f. 表達(dá)分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表達(dá)
h. 親和純化
i. 檢測(cè)和鑒定
原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株
e. 蛋白表達(dá)小試分析
f. 如果蛋白可溶,蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶,,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白,。
h. 鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白,;表達(dá)蛋白的分析,、純化、檢測(cè)
誘導(dǎo)表達(dá)成功后,,表達(dá)蛋白的分析,、純化、檢測(cè)應(yīng)該順當(dāng),,按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒太大的問題,。
操作步驟 :
根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM,?;靹騻溆茫≒MSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。
1,、樣品前處理:
a)對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍,。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸,。
b)對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞,。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管,,然后再裂解。
c)對(duì)于組織樣品: 把切成細(xì)小的碎片,。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,,可以適當(dāng)減少裂解液的用量),。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解,。
2,、后處理:
將裂解后
的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,,即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測(cè)定,、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作
ANKRD54產(chǎn)品名稱: 錨蛋白重復(fù)域54抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep
MOCS3產(chǎn)品名稱: 鉬輔因子合成蛋白3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse
SC5DL產(chǎn)品名稱: SC5DL蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse
Collagen VII產(chǎn)品名稱: 7型膠原抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit
RAB5C產(chǎn)品名稱: ras基因相關(guān)蛋白R(shí)AB5C抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit
SCNM1產(chǎn)品名稱: 鈉離子通道調(diào)節(jié)蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
應(yīng)用類型: Methylated英文名稱: BrdU(Proliferation Marker)英文別名: Bromodeoxyuridine; Bromodeoxyuridine; 5-Bromo-2′-deoxyuridine; 5-BrdU; Proliferation Marker; 5-Bromo-2-deoxyUridine.
EXOC1產(chǎn)品名稱: EXOC1蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Sheep
SPANXD/CT11.4產(chǎn)品名稱: /睪丸抗原11.4抗體交叉反應(yīng): Human
PTPN6產(chǎn)品名稱: 蛋白酪氨suan磷suanmei1C抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse
顆粒酶A(GZMA)真核蛋白小鼠生長(zhǎng)分化因子15(GDF-15)ELISA試劑盒GDF-15生長(zhǎng)分化因子15elisa kitMouse GDF15 (Growth Differentiation Factor 15) ELISA Kit
小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子9(FGF9)ELISA試劑盒FGF9堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子9ELISA試劑盒Mouse FGF9 (Fibroblast Growth Factor 9) ELISA Kit
小鼠分化簇抗原30配體(CD30L)ELISA試劑盒CD30L分化簇抗原30配體elisamei聯(lián)免疫試劑盒Mouse Soluble Cluster of differentiation 30 ligand,sCD30L ELISA Kit
小鼠半乳糖凝集su1(Galectin-1)ELISA試劑盒Galectin-1半乳糖凝集su1elisa檢測(cè)試劑盒Mouse Galectin-1(m)ELISA kit
小鼠白細(xì)胞介su21(IL-21)ELISA試劑盒IL-21白細(xì)胞介su21elisa kitMouse IL-21 ELISA Kit
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