產(chǎn)品名稱：昆蟲細胞;Sf-21

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號：YS-02X9713

細胞生長實驗 ：細胞生長良好,，形態(tài)正常

儲存條件：2℃-8℃，避光儲存

運輸條件：冰袋冷藏運輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細胞特性：

1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織,。

2)細胞鑒定：細胞免疫熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV,、HCV、支原體、細菌,、酵母和真菌。

5)細胞生長方式：上皮樣,，不規(guī)則細胞,，貼壁培養(yǎng)。

細胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1） 準備RPMI-1640 培養(yǎng)基,；優(yōu)質胎牛血清,，10%；Glutamax（invitrogen 35050061）,，1%,；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%,；雙抗,，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細胞處理：

1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。

注意事項：

（1）凍存前細胞狀態(tài)，細胞最好在對數(shù)生長期,，細胞密度適合,，剛剛發(fā)生細胞融合，過密或連成片的細胞狀態(tài)不好，而且消化時不容易分散,；

（2）凍存的密度不宜過低,，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好，我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107）,，一瓶凍一管（1.5ml凍存管）,，10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細胞）分成兩管。

（3）消化和吹打,，切忌胰酶消化過度,，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡,。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液,。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格,，我從10%-90%都用過，問題不大,，個人認為10%-20%可以了,，能節(jié)約處就節(jié)約點嘛！另外,，凍存液可以在處理細胞前配置,，放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸,，移入凍存管,。

（5）關于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法,，LLC細胞凍存管用棉花包好,，4度2h，-20度2h或更長,，-80度過夜,，最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室,，推薦使用程序降溫盒,，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,，很方便,，省了包棉花、4度,、-20度了,。

PAX5/FITC 熒光素標記配對盒基因5抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Goat   Rb IgM/FITC 熒光素標記羊抗兔IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml

異常凝血酶原/脫-γ-羧基凝血酶原抗體  DCP 1ml

Rabbit  human IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗人IgG 0.1ml

FISH 英文名稱： FISH蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-TUBB3(Ser172) 磷酸化神經(jīng)細胞特異性微管蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

Goat   Rb IgM/FITC 熒光素標記羊抗兔IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml

NT-3 人神經(jīng)營養(yǎng)素-3Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 Cyclin D1 周期素D1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh NFX1 核轉錄因子X盒結合蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml

Human decay-accelerating factor,DAF ELISA Kit 人降解加速因子 96T

TNF-alpha(1F6) 英文名稱： 壞死因子-α單克隆抗體 0.1ml

CTNNA3 英文名稱： 鈣粘蛋白相關蛋白CTNNA3抗體 0.1ml

 Cyclin D1 周期素D1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

SIGLEC11 英文名稱： 唾液酸結合性球蛋白樣凝集素11抗體 0.2ml

Frizzled 5 英文名稱： Wnt信號受體蛋白抗體 0.2ml

Ki-67 Antigen抗體  Ki-67 0.1ml

 PTTG/FITC 熒光素標記垂體轉化基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-PP2A alpha(Tyr307) 磷酸化蛋白磷酸酶2A(PP2Aα)抗體 規(guī)格 0.1ml

Have the biological activity Peptide products 有生物學活性的多肽產(chǎn)品Multi-class antibodies規(guī)格：
昆蟲細胞;Sf-21氟尼酸(標準品)長春質堿食品添加劑阿糖比色法定量檢測試劑盒

木聚糖桔梗皂苷D通用型果膠化學比色法定量檢測試劑盒

阿特拉津,莠去津桔皮素果類果膠化學比色法定量檢測試劑盒

丁羥酸開環(huán)異落葉松樹脂酚  飲料果膠化學比色法定量檢測試劑盒

3-磷酸甘油酸酶開環(huán)異落葉松樹脂酚二葡萄糖苷食物果膠化學比色法定量檢測試劑盒

1,5-二磷酸-D-核酮糖/1,5二磷酸核酮糖柯諾辛乳品果膠化學比色法定量檢測試劑盒

FITC；異硫酸熒光素苦鬼臼素通用型果膠生物酶比色法定量檢測試劑盒

FITC isomer I；異硫酸熒光素異構體苦玄參苷IA果類果膠生物酶比色法定量檢測試劑盒

使用步驟：

一）準確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途,，選擇適宜的培養(yǎng)基,，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),，標記劃線,，加熱溶解，補充水分,，測定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計測定,。用1N NaOH和1N HCl調節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi),。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用人子宮成纖維細胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明,。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml）,，塞好棉塞用牛皮紙包扎好,，準備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌,，常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死，但細菌的芽胞有較強的抗熱性,，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的,。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大,，蒸汽溫度就越高,。因此，在同一溫度條件下,，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后,，其蛋白質易于凝固變性,，因為蒸汽的穿透力強，殺菌效果好,。