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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2023-03-22 14:32:26瀏覽次數(shù):380次
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主要用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) | 英文名稱(chēng) | Recombinant Phosphoglycerate Mutase 2, Muscle (PGA |
物種 | Homo sapiens (Human,,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床,!
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 物種 |
磷酸甘油酸變位酶2(PGAM2)重組蛋白 | Recombinant Phosphoglycerate Mutase 2, Muscle (PGAM2) | Homo sapiens (Human,,人) |
商品介紹:
PGAM-M; BPG-dependent PGAM 2; Muscle-specific phosphoglycerate mutase; Phosphoglycerate mutase isozyme M 酶與激酶 代謝通路 骨骼代謝 物種:Homo sapiens (Human,人) 來(lái)源:原核表達(dá) 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定) 亞細(xì)胞定位::細(xì)胞核, 細(xì)胞質(zhì) 預(yù)測(cè)分子量:30.7kDa 實(shí)際分子量:31kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū)) 片段與標(biāo)簽:Met1~Glu236 with N-terminal His Tag 緩沖液成份:100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液(pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300) 性狀:凍干粉 純度:> 90% 等電點(diǎn):8.7 應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清),。
3.通過(guò)親和,,離子交換,,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。
5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性,。
相關(guān)產(chǎn)品:
基質(zhì)金屬蛋白酶24(MMP24)重組蛋白英文名稱(chēng):Recombinant Matrix Metalloproteinase 24 (MMP24)Homo sapiens (Human,人)
基質(zhì)金屬蛋白酶25(MMP25)重組蛋白英文名稱(chēng):Recombinant Matrix Metalloproteinase 25 (MMP25)Homo sapiens (Human,,人)
基質(zhì)金屬蛋白酶26(MMP26)重組蛋白英文名稱(chēng):Recombinant Matrix Metalloproteinase 26 (MMP26)Homo sapiens (Human,,人)
基質(zhì)金屬蛋白酶28(MMP28)重組蛋白英文名稱(chēng):Recombinant Matrix Metalloproteinase 28 (MMP28)Homo sapiens (Human,人)
注意事項(xiàng):
1,、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類(lèi)以及組織塊的大小來(lái)調(diào)整固定時(shí)間,。
2,、雖然作用溫和,但能硬化組織,,固定時(shí)間過(guò)久會(huì)導(dǎo)致組織變脆,,切片時(shí)易碎。因此固定時(shí)間通常不宜超過(guò) 24 小時(shí),。
3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,,影響免疫組化結(jié)果,。因此,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測(cè)時(shí),,有時(shí)需要對(duì)抗原先進(jìn)行修復(fù),,然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。
4,、本產(chǎn)品對(duì)人體有害,,操作時(shí)請(qǐng)小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi),。
5,、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,,注意低溫操作,;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,,4℃離心5 min,;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,,蛋白定量(Bradford法,、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min,;
6. 14,000rpm,,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法,、BCA法),;
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
P15RS產(chǎn)品名稱(chēng): 細(xì)胞周期依賴(lài)性激mei相關(guān)蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse
TNF alpha(1F6)產(chǎn)品名稱(chēng): 腫壞死因子-α單克隆抗體交叉反應(yīng): Human
Cytochrome b245 Light Chain產(chǎn)品名稱(chēng): 細(xì)胞色sub245輕鏈抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
FITM2產(chǎn)品名稱(chēng): FITM2蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep
Phospho-RASGRF1 (Ser929)產(chǎn)品名稱(chēng): Ras特異性核苷suan釋放因子1交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Sheep
LAMP2產(chǎn)品名稱(chēng): 溶mei體相關(guān)膜蛋白2(CD107B)抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
Chromogranin C產(chǎn)品名稱(chēng): 嗜鉻粒蛋白C抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Horse
SFTPA1產(chǎn)品名稱(chēng): 肺表面活性蛋白A抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
IL-6R alpha產(chǎn)品名稱(chēng): 白細(xì)胞介su6受體α/IL-6Rα抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse
Lymphotactin產(chǎn)品名稱(chēng): 淋巴細(xì)胞趨化因子抗體交叉反應(yīng): Human
磷酸甘油酸變位酶2(PGAM2)重組蛋白人多藥耐藥關(guān)聯(lián)蛋白1(MRP1)ELISA試劑盒MRP1多藥耐藥關(guān)聯(lián)蛋白1elisa檢測(cè)試劑盒Human Multidrug Resistance Associated Protein 1(MRP1)ELISA Kit
人多型性腺瘤基因樣蛋白1(PLAGL1)ELISA試劑盒PLAGL1多型性腺瘤基因樣蛋白1elisa kitHuman Pleiomorphic Adenoma Gene Like Protein 1(PLAGL1)ELISA Kit
人多效調(diào)節(jié)因子1(PLRG1)ELISA試劑盒PLRG1多效調(diào)節(jié)因子1ELISA試劑盒Human Pleiotropic Regulator 1(PLRG1)ELISA Kit
人多萜醇磷suan-N-乙酰氨基葡萄糖磷suan轉(zhuǎn)移mei1(DPAGT1)ELISA試劑盒DPAGT1多萜醇磷suan-N-乙酰氨基葡萄糖磷suan轉(zhuǎn)移mei1elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Dolichyl Phosphate-N-Acetylglucosaminephosphotransferase 1(DPAGT1)ELISA Kit
人多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移mei9(GALNT9)ELISA試劑盒GALNT9多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移mei9elisa檢測(cè)試劑盒Human Polypeptide-N-Acetylgalactosaminyltransferase 9(GALNT9)ELISA Kit
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