細(xì)胞特性：

1)】組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織,。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽(yáng)性,。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1,、 HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：上皮樣,，不規(guī)則細(xì)胞,，貼壁培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱：腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;TG-905

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào)：YS-02X9813

細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長(zhǎng)良好,，形態(tài)正常

儲(chǔ)存條件：2℃-8℃,，避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,；Glutamax（invitrogen 35050061），1%,；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070）,，1%,；雙抗，1%,。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài),，細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,，過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,，而且消化時(shí)不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低,，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好,，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管）,，10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管,。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度,，吹打不可太用力,，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打,。

（4）離心后加入凍存液,。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格，我從10%-90%都用過,，問題不大,，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛,！另外,，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷,。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍",，傳統(tǒng)的方法，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,，4度2h,，-20度2h或更長(zhǎng)，-80度過夜,，最后液氮,。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室，推薦使用程序降溫盒,，內(nèi)裝異丙醇,，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便,，省了包棉花,、4度、-20度了,。

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途,，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈,。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),，標(biāo)記劃線，加熱溶解,，補(bǔ)充水分,，測(cè)定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定,。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi),。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明,。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL,；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好,，準(zhǔn)備滅菌,。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的,。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,，即壓力越大，蒸汽溫度就越高,。因此,，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下,，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性,，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng),，殺菌效果好。

HBcAg/FITC 熒光素標(biāo)記小鼠抗人乙肝核心抗原抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

DHAV(duck hepatitis A virus) 鴨甲型肝炎A病毒抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

凋亡蛋白活性因子-1抗體(C端)  Apaf-1 0.1ml

phospho-ZAP70 (Tyr292) 英文名稱： 磷酸化zeta相關(guān)蛋白70抗體 0.1ml

DOK4 英文名稱： 對(duì)接蛋白4抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-Ephrin B(Tyr329) 磷酸化Ephrin B抗體 規(guī)格 0.1ml

DHAV(duck hepatitis A virus) 鴨甲型肝炎A病毒抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

ECG2 (sophagus cancer-related gene-2) 食道癌相關(guān)基因(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

 CCRK 細(xì)胞周期相關(guān)激酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PAX3 配對(duì)盒基因3抗體 規(guī)格 0.1ml

DPP7 Kit Human 人 DPP7 / DPPII / DPP2 ELISA配對(duì)抗體 ELISA

Thrombin Activation peptide fragment 2 英文名稱： 凝血酶(凝血因子II)激活肽2抗體 0.1ml

CPLA2 英文名稱： 胞漿型磷脂酶A2抗體 0.2ml

 CCRK 細(xì)胞周期相關(guān)激酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

名 價(jià) 格(RMB)

TCRP1 英文名稱： 舌癌化耐藥相關(guān)蛋白1 0.1ml

丙型肝炎病毒-NS1抗體  HCV-NS1 0.2ml

 phospho-Akt(Thr450) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人,、大,、小鼠磷酸化蛋白激酶B抗體(蘇磷酸化位點(diǎn)：450)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-RPS6KB1(Ser417) 磷酸化核糖體S6蛋白激酶抗體 規(guī)格 0.1ml

Chicken IgM (親和純化) 雞IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 1mg
腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;TG-905TES；Tris乙磺酸,2-[（三（羥甲基）甲基）氨基]-1-乙磺酸銀杏內(nèi)酯B通用HRP酶聯(lián)檢測(cè)封閉溶液

3-[ (N-三(羥甲基)甲氨基]-2-羥基磺酸鈉銀杏內(nèi)酯C通用AP酶聯(lián)檢測(cè)封閉溶液

TAPSO,；3-[ (N-三(羥甲基)甲氨基]-2-羥基磺酸銀杏內(nèi)酯JDNA探針同位素（[α32P]dCTP）聚合酶整合標(biāo)記試劑盒

N-三(羥甲基)甲基-3-氨基磺酸鈉銀杏酸(C13:0)5’末端DNA探針同位素（[γ32P]ATP）酶標(biāo)記試劑盒

1,1-環(huán)基乙二羧酸銀杏酸(C15:1)RNA探針同位素（[α32P]CTP）聚合酶標(biāo)記試劑盒

TAPS,；N-三(羥甲基)甲基-3-氨基磺酸銀杏酸(C17:1)[35S]－Met代謝標(biāo)記試劑盒

2-甲基-2-烯酸-2-磺乙酯吲哚/6-羥基吲哚[35S]－Cys代謝標(biāo)記試劑盒

哌-N,N-雙(2-羥基烷磺酸)倍半鈉鹽隱丹參酮GST融合蛋白同位素（[γ32P]ATP）酶標(biāo)記試劑盒