產(chǎn)品名稱：乳腺癌細胞;MDA-MB-415

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號：YS-02X9888

細胞生長實驗 ：細胞生長良好，形態(tài)正常

儲存條件：2℃-8℃,，避光儲存

運輸條件：冰袋冷藏運輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%,；Glutamax（invitrogen 35050061），1%,；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070）,，1%；雙抗,，1%,。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。

二． 細胞處理：

1） 復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?50px皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度,。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。

注意事項：

（1）凍存前細胞狀態(tài),，細胞最好在對數(shù)生長期,，細胞密度適合，剛剛發(fā)生細胞融合,，過密或連成片的細胞狀態(tài)不好,，而且消化時不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低,，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,，我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107）,，一瓶凍一管（1.5ml凍存管）,，10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細胞）分成兩管。

（3）消化和吹打,，切忌胰酶消化過度,，吹打不可太用力,，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,，不是加入凍存液再吹打,。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴(yán)格,，我從10%-90%都用過,，問題不大，個人認(rèn)為10%-20%可以了,，能節(jié)約處就節(jié)約點嘛！另外,，凍存液可以在處理細胞前配置,，放在4度冰箱預(yù)冷。細胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,，移入凍存管,。

（5）關(guān)于“慢凍",，傳統(tǒng)的方法，LLC細胞凍存管用棉花包好,，4度2h,，-20度2h或更長，-80度過夜,，最后液氮,。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室，推薦使用程序降溫盒,，內(nèi)裝異丙醇,，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便,，省了包棉花,、4度、-20度了,。

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途,，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈,。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),，標(biāo)記劃線，加熱溶解,，補充水分,，測定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計測定,。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi),。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用人子宮成纖維細胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明,。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml）,，塞好棉塞用牛皮紙包扎好,，準(zhǔn)備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌,，常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死，但細菌的芽胞有較強的抗熱性,，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的,。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大,，蒸汽溫度就越高,。因此,，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下,，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性,，因為蒸汽的穿透力強,，殺菌效果好。

細胞特性：

1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織,。

2)細胞鑒定：細胞免疫熒光染色為陽性,。

3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1,、 HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌。

5)細胞生長方式：上皮樣,，不規(guī)則細胞,，貼壁培養(yǎng)。
Visfatin-1/PBEF1(NT)/FITC 熒光素標(biāo)記內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素/腹脂素/內(nèi)肥素 抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

CK18(Cytokeratin 18) 細胞角蛋白18(多肽)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

細胞毒性受體NK-p30抗體  CD337/NKp30/NCR3 0.1ml

Syntrophin gamma 2 英文名稱： 肌蛋白結(jié)合蛋白γ2抗體 0.2ml

ERO1L 英文名稱： 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)氧化物蛋白Ero1-Lα抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-GABBR2 (Ser783) 磷酸化G氨基丁酸B型受體2抗體 規(guī)格 0.1ml

CK18(Cytokeratin 18) 細胞角蛋白18(多肽)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

IL-8 大鼠白介素-8Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 DDB1 損傷DNA結(jié)合蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh NEDD4L/NEDD4-2 泛素連接酶NEDD4-2抗體 規(guī)格 0.2ml

Human Salusin Alpha ELISA Kit 人Salusin-α 96T

TDRD3 英文名稱： Tudor結(jié)構(gòu)域蛋白TDRD3抗體 0.2ml

CYPA 英文名稱： 親環(huán)蛋白(親環(huán)素)PPIA抗體 0.1ml

 DDB1 損傷DNA結(jié)合蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Goat  Mouse IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 0.1ml

FOXD2 英文名稱： 叉頭蛋白D2抗體 0.2ml

成纖維細胞生長因子受體3抗體  FGFR3 0.1ml

 phospho-ERK1(Thr197/Thr202) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化原活化蛋白激酶1/2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Stathmin (Ser16) 磷酸化原癌基因蛋白18抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit  Goat IgM/Gold 金標(biāo)記兔抗羊IgM (10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 2ml
乳腺癌細胞;MDA-MB-415細胞超氧化物陰離子熒光法定量檢測試劑盒20次豬孕素/孕酮（PROG）ELISA試劑盒,

組織超氧化物陰離子熒光法定量檢測試劑盒20次鴨環(huán)磷酸腺苷（cAMP）ELISA試劑盒,

血液超氧化物陰離子熒光法定量檢測試劑盒20次轉(zhuǎn)移因子（TF）ELISA試劑盒--動物,，人

體液超氧化物陰離子熒光法定量檢測試劑盒20次環(huán)素檢定瓊脂    用于環(huán)素殘留的微生物學(xué)檢定（SN標(biāo)準(zhǔn)）

體內(nèi)（in vivo）超氧化物陰離子熒光法定量檢測試劑盒20次酪鹽酸

酵母超氧化物陰離子熒光法定量檢測試劑盒20次N-乙酰-L-纈

植物超氧化物陰離子熒光法定量檢測試劑盒20次BOC-L-酪甲酯

甲萘醌溶液（1毫摩爾）50毫升人Bcl-2相關(guān)X蛋白（BAX）ELISA試劑盒, BAX ELISA kit

過氧亞硝基陰離子解構(gòu)劑FeTMPyP pentachloride1毫升/1毫摩爾人P物質(zhì)受體（SP-R）ELISA試劑盒,SP-R ELISA

過氧亞硝基陰離子劑硫化乙醇胍琥珀酸鈉1毫升/5毫摩爾人醛縮酶（ALD）ELISA試劑盒,

（Mercaptoethylguanidine sodium succinate）人血小板堿性蛋白（PBP/CXCL7）ELISA試劑盒,

超氧陰離子劑TEMPOL溶液1毫升/500毫摩爾人波形蛋白（VIM）ELISA試劑盒,

名稱規(guī)格人β2糖蛋白（β2-GP）ELISA試劑盒,

細胞脂質(zhì)過氧化氫（H2O2）活性比色法定量檢測試劑盒20次小鼠抗核抗體（ANA）ELISA試劑盒,

組織脂質(zhì)過氧化氫（H2O2）活性比色法定量檢測試劑盒20次小鼠凝血因子Ⅱ（FⅡ）ELISA試劑盒,