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當(dāng)前位置:上海研生實(shí)業(yè)有限公司>>天然蛋白、重組蛋白>>重組蛋白/RP>> 氨基羧基粘康酸半醛脫羧酶(ACMSD)重組蛋白
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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2023-03-22 20:32:36瀏覽次數(shù):330次
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主要用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Aminocarboxymuconate Semialdehyde Deca |
物種 | Mus musculus (Mouse,小鼠) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床,!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
氨基羧基粘康酸半醛脫羧酶(ACMSD)重組蛋白 | Recombinant Aminocarboxymuconate Semialdehyde Decarboxylase (ACMSD) | Mus musculus (Mouse,,小鼠) |
商品介紹:
Picolinate carboxylase; 2-amino-3-carboxymuconate-6-semialdehyde decarboxylase 酶與激酶 物種:Mus musculus (Mouse,小鼠) 來源:原核表達(dá) 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細(xì)胞定位::分泌 預(yù)測分子量:41.7kDa 實(shí)際分子量:42kDa(差異分析請參閱說明書) 片段與標(biāo)簽:Met1~Glu336 with N-terminal His Tag 緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.) 性狀:凍干粉 純度:> 90% 等電點(diǎn):5.9 應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞,,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清),。
3.通過親和,離子交換,,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白,。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性,。
相關(guān)產(chǎn)品:
組織蛋白酶E(CTSE)重組蛋白Recombinant Ribosomal Protein S6 Kinase Beta 1 (RPS6Kb1)
組織蛋白酶C(CTSC)重組蛋白Recombinant Peptidase D (PEPD)
組織蛋白酶B(CTSB)重組蛋白Recombinant Peroxidasin Homolog (PXDN)
組織蛋白酶A(CTSA)重組蛋白Recombinant Steroid 5 Alpha Reductase 1 (SRD5a1)
注意事項(xiàng):
1,、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時(shí)間,。
2,、雖然作用溫和,但能硬化組織,,固定時(shí)間過久會導(dǎo)致組織變脆,,切片時(shí)易碎。因此固定時(shí)間通常不宜超過 24 小時(shí),。
3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,,影響免疫組化結(jié)果,。因此,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時(shí),,有時(shí)需要對抗原先進(jìn)行修復(fù),,然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。
4,、本產(chǎn)品對人體有害,,操作時(shí)請小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi),。
5,、為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,,注意低溫操作,;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,,即為全蛋白提取物,,蛋白定量(Bradford法、BCA法),;
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,,溫和振蕩15 min,;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法,、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
phospho-C-Myc (Thr58)產(chǎn)品名稱: 致基因C-Myc抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse, Rabbit
ESYT1產(chǎn)品名稱: 延伸突觸蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Monkey
CD74產(chǎn)品名稱: CD74單克隆抗體交叉反應(yīng): Human
phospho-GATA3 (Ser115)產(chǎn)品名稱: GATA結(jié)合蛋白3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep, GuineaPig
KAT4/TAF1產(chǎn)品名稱: 細(xì)胞周期基因1蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Horse
HDLBP產(chǎn)品名稱: 高結(jié)合蛋白抗體交叉反應(yīng): Human
CXCL4產(chǎn)品名稱: 小板因子4抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow, Rabbit
CFTR產(chǎn)品名稱: 囊性纖維化跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)節(jié)因子抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
IL-23R產(chǎn)品名稱: 白介su-23受體抗體交叉反應(yīng): Human, Rat
TDP2產(chǎn)品名稱: ETS1相關(guān)蛋白2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
氨基羧基粘康酸半醛脫羧酶(ACMSD)重組蛋白人G底物(GSBS)ELISA試劑盒GSBSG底物elisa kitHuman G Substrate(GSBS)ELISA Kit
人G蛋白偶聯(lián)受體家族C5組成員A(GPRC5A)ELISA試劑盒GPRC5AG蛋白偶聯(lián)受體家族C5組成員AELISA試劑盒Human G Protein Coupled Receptor, Family C, Group 5, Member A(GPRC5A)ELISA Kit
人G蛋白偶聯(lián)受體78(GPR78)ELISA試劑盒GPR78G蛋白偶聯(lián)受體78elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human G Protein Coupled Receptor 78(GPR78)ELISA Kit
人G蛋白偶聯(lián)受體37(GPR37)ELISA試劑盒GPR37G蛋白偶聯(lián)受體37elisa檢測試劑盒Human G Protein Coupled Receptor 37(GPR37)ELISA Kit
人G蛋白α抑制活性多肽3(GNαI3)ELISA試劑盒GNαI3G蛋白α抑制活性多肽3elisa kitHuman G Protein Alpha Inhibiting Activity Polypeptide 3(GNaI3)ELISA Kit
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