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當(dāng)前位置:上海研生實(shí)業(yè)有限公司>>天然蛋白、重組蛋白>>重組蛋白/RP>> 醌型二氫蝶啶還原酶(QDPR)重組蛋白
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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2023-03-21 21:10:21瀏覽次數(shù):297次
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主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Quinoid Dihydropteridine Reductase (QD |
種屬 | Homo sapiens (Human,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:醌型二氫蝶啶還原酶(QDPR)重組蛋白
物種:Homo sapiens (Human,,人)
英文名稱:Recombinant Quinoid Dihydropteridine Reductase (QDPR)
DHPR; PKU2; SDR33C1; HDHPR; 6,7-Dihydropteridine Reductase; Short Chain Dehydrogenase/Reductase Family 33C,Member 1
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人) 來源:原核表達(dá) 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細(xì)胞定位::線粒體, 細(xì)胞質(zhì), 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔 預(yù)測分子量:29.5kDa 實(shí)際分子量:30kDa(差異分析請參閱說明書) 片段與標(biāo)簽:Met1~Phe244 with N-terminal His Tag 緩沖液成份:100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液(pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300) 性狀:凍干粉 純度:> 97% 等電點(diǎn):6.9 應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
特點(diǎn):
標(biāo)記:標(biāo)記反應(yīng)簡單、溫和且很少抑制抗體活性,,將與抗體共價(jià)結(jié)合是一種非常簡便、直接的標(biāo)記方法,。
酶標(biāo)記:酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成,,其應(yīng)用范圍非常廣泛,結(jié)果即時(shí)可見,、敏感性高,。
熒光標(biāo)記:熒光基團(tuán)AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一,產(chǎn)品覆蓋350-770nm,。不同的AbFluor基團(tuán)經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光,, 從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況,主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色,,是一種非常好的亞細(xì)胞水平定位的方法,。
相關(guān)產(chǎn)品:
Recombinant Human TAB1宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human GCIP interacting p29宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human PSPN宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human SUCLA2宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
標(biāo)簽選擇:
親和標(biāo)簽:蛋白重組表達(dá)過程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易;另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶,。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽,;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達(dá)。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析,。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,,大致步驟如下:
真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表達(dá)載體的構(gòu)建
c. 無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提
d. 細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染
e. 表達(dá)小試,條件優(yōu)化
f. 表達(dá)分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表達(dá)
h. 親和純化
i. 檢測和鑒定
原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株
e. 蛋白表達(dá)小試分析
f. 如果蛋白可溶,,蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶,,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白。
h. 鑒定,,包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白,;表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測
誘導(dǎo)表達(dá)成功后,,表達(dá)蛋白的分析,、純化、檢測應(yīng)該順當(dāng),,按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒太大的問題,。
ABCE1產(chǎn)品名稱: 核糖核suanmeiL蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Cow, Horse
DEPDC1B/BRCC3產(chǎn)品名稱: 乳細(xì)胞3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow, Rabbit
IRE1產(chǎn)品名稱: IRE1蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig
cGKI產(chǎn)品名稱: cGMP依賴性蛋白激mei1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
TGF Beta 1+2+3產(chǎn)品名稱: 轉(zhuǎn)化生長因子β1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep, GuineaPig
phospho-ATF2 (Thr69/71)產(chǎn)品名稱: 活化復(fù)制因子2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
GRF2產(chǎn)品名稱: G蛋白偶聯(lián)受體釋放因子2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow, Sheep
CCDC47產(chǎn)品名稱: 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白47抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
C19orf61產(chǎn)品名稱: 19號染色體開放閱讀框61抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
Vinculin產(chǎn)品名稱: 粘著斑蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
醌型二氫蝶啶還原酶(QDPR)重組蛋白人CD5分子樣蛋白(CD5L)ELISA試劑盒CD5LCD5分子樣蛋白elisa檢測試劑盒Human CD5L ELISA Kit
人CD5分子(CD5)ELISA試劑盒CD5CD5分子elisa kitHuman CD5 ELISA Kit
人CD44變體6(CD44-v6)ELISA試劑盒CD44-v6CD44變體6ELISA試劑盒Human cluster of differentiation 44 variant 6,CD44-v6 ELISA Kit
人CD22分子(CD22)ELISA試劑盒CD22CD22分子elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human CD22 ELISA Kit
人CD209分子(CD209)ELISA試劑盒CD209CD209分子elisa檢測試劑盒Human CD209 ELISA Kit
操作步驟 :
根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM,。混勻備用(PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加),。
1,、樣品前處理:
a)對于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS,、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍,。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。用槍吹打數(shù)下,,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。
b)對于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,,用手指把細(xì)胞用力彈散,。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞,。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀,。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管,,然后再裂解,。
c)對于組織樣品: 把切成細(xì)小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量),。用玻璃勻漿器勻漿,,直至充分裂解。
2,、后處理:
將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測定,、SDS-PAGE,、Western blotting 和免疫沉淀等操作
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