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品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷(xiāo)商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2023-03-22 13:57:29瀏覽次數(shù):317次
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主要用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) | 英文名稱(chēng) | Recombinant Mitogen Activated Protein Kinase Kinas |
物種 | Homo sapiens (Human,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性:
特點(diǎn):
標(biāo)記:標(biāo)記反應(yīng)簡(jiǎn)單,、溫和且很少抑制抗體活性,,將與抗體共價(jià)結(jié)合是一種非常簡(jiǎn)便、直接的標(biāo)記方法,。
酶標(biāo)記:酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成,,其應(yīng)用范圍非常廣泛,,結(jié)果即時(shí)可見(jiàn),、敏感性高,。
熒光標(biāo)記:熒光基團(tuán)AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一,產(chǎn)品覆蓋350-770nm,。不同的AbFluor基團(tuán)經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光,, 從而得知抗體的定位和待測(cè)抗原的分布情況,主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色,,是一種非常好的亞細(xì)胞水平定位的方法,。
產(chǎn)品名稱(chēng):絲裂原激活蛋白激酶激酶6(MAP2K6)重組蛋白
物種:Homo sapiens (Human,人)
英文名稱(chēng):Recombinant Mitogen Activated Protein Kinase Kinase 6 (MAP2K6)
MEK6; MKK6; PRKMK6; SAPKK3; SKK3; Stress-activated protein kinase kinase 3
信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
酶與激酶
細(xì)胞凋亡
感染免疫
物種:Homo sapiens (Human,,人) 來(lái)源:原核表達(dá) 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定) 亞細(xì)胞定位::細(xì)胞核, 細(xì)胞質(zhì) 預(yù)測(cè)分子量:33.1kDa 實(shí)際分子量:36kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū)) 片段與標(biāo)簽:Phe46~Pro306 with N-terminal His Tag 緩沖液成份:100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液(pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300) 性狀:凍干粉 純度:> 90% 等電點(diǎn):7.2 應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
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標(biāo)簽選擇:
親和標(biāo)簽:蛋白重組表達(dá)過(guò)程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過(guò)程變得更加容易;另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶,。蛋白標(biāo)簽可分兩類(lèi):一類(lèi)是短肽類(lèi)標(biāo)簽,;一類(lèi)是長(zhǎng)肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達(dá)。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來(lái)分析,。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,,大致步驟如下:
真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表達(dá)載體的構(gòu)建
c. 無(wú)內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提
d. 細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染
e. 表達(dá)小試,條件優(yōu)化
f. 表達(dá)分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表達(dá)
h. 親和純化
i. 檢測(cè)和鑒定
原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株
e. 蛋白表達(dá)小試分析
f. 如果蛋白可溶,,蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶,,則需要變復(fù)性來(lái)制備可溶蛋白。
h. 鑒定,,包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白,;表達(dá)蛋白的分析、純化,、檢測(cè)
誘導(dǎo)表達(dá)成功后,,表達(dá)蛋白的分析、純化,、檢測(cè)應(yīng)該順當(dāng),,按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒(méi)太大的問(wèn)題。
操作步驟 :
根據(jù)使用量,,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM?;靹騻溆茫≒MSF 現(xiàn)用現(xiàn)加),。
1,、樣品前處理:
a)對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS,、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍,。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,,使裂解液和細(xì)胞充分接觸,。
b)對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散,。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的細(xì)胞沉淀,。如果細(xì)胞量較多,,必需分裝成 50-100 萬(wàn)細(xì)胞/管,然后再裂解,。
c)對(duì)于組織樣品: 把切成細(xì)小的碎片,。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,,如果需要高濃度的蛋白樣品,,可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,,直至充分裂解,。
2、后處理:
將裂解后
的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,,取上清,,即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測(cè)定、SDS-PAGE,、Western blotting 和免疫沉淀等操作
C20orf201產(chǎn)品名稱(chēng): 20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框201抗體交叉反應(yīng): Human, Dog
ADAM9產(chǎn)品名稱(chēng): 去整合su樣金屬蛋白mei9抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Rabbit, Sheep
phospho-Tau (Ser214)產(chǎn)品名稱(chēng): 微管相關(guān)蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit
TNNI3產(chǎn)品名稱(chēng): 心肌肌鈣蛋白I抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
應(yīng)用類(lèi)型: Other英文名稱(chēng): GART英文別名: 5'-phosphoribosylglycinamide transformylase; AIR synthase; AIRS; GAR transformylase; GARS; GARTF; Glycinamide ribonucleotide synthetase; Phosphoribosylglycinamide synthetase; PRGS; PUR2_H
TM2D1產(chǎn)品名稱(chēng): β淀粉樣蛋白結(jié)合蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
PSGR產(chǎn)品名稱(chēng): 前列特異性G蛋白偶聯(lián)受體/嗅覺(jué)受體51E2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow, Horse, Sheep
MEIG1產(chǎn)品名稱(chēng): MEIG1蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
Neurogranin產(chǎn)品名稱(chēng): 神經(jīng)顆粒su抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
TCH3產(chǎn)品名稱(chēng): 跨膜受體蛋白tch-3單克隆抗體交叉反應(yīng): Human
絲裂原激活蛋白激酶激酶6(MAP2K6)重組蛋白人肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(HGFR)ELISA試劑盒HGFR肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Hepatocyte Growth Factor Receptor(HGFR)ELISA Kit
人肝細(xì)胞癌相關(guān)蛋白1(HCRP1)ELISA試劑盒HCRP1肝細(xì)胞癌相關(guān)蛋白1elisa檢測(cè)試劑盒Human Hepatocellular Carcinoma Related Protein 1(HCRP1)ELISA Kit
人肝sumei2(HPA2)ELISA試劑盒HPA2肝sumei2elisa kitHuman Heparanase 2(HPA2)ELISA Kit
人肝配蛋白B3(EFNB3)ELISA試劑盒EFNB3肝配蛋白B3ELISA試劑盒Human Ephrin B3(EFNB3)ELISA Kit
人肝配蛋白B1(EFNB1)ELISA試劑盒EFNB1肝配蛋白B1elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Ephrin B1(EFNB1)ELISA Kit
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