細(xì)胞特性：

1)】組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織,。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%,。

4)不含有 HIV-1,、 HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長方式：上皮樣,，不規(guī)則細(xì)胞,，貼壁培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱：XG惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞;SF-295

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào)：YS-02X9809

細(xì)胞生長實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長良好,，形態(tài)正常

儲(chǔ)存條件：2℃-8℃,，避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,；Glutamax（invitrogen 35050061），1%,；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070）,，1%；雙抗,，1%,。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài),，細(xì)胞最好在對數(shù)生長期，細(xì)胞密度適合,，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,，過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時(shí)不容易分散,；

（2）凍存的密度不宜過低,，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107）,，一瓶凍一管（1.5ml凍存管）,，10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管。

（3）消化和吹打,，切忌胰酶消化過度,，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡,。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液,。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格,，我從10%-90%都用過，問題不大,，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛！另外,，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,，移入凍存管,。

（5）關(guān)于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法,，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,，4度2h，-20度2h或更長,，-80度過夜,，最后液氮。對于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,，推薦使用程序降溫盒,，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便,，省了包棉花,、4度、-20度了,。

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途,，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈,。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),，標(biāo)記劃線，加熱溶解,，補(bǔ)充水分,，測定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測定,。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi),。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明,。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml）,，塞好棉塞用牛皮紙包扎好,，準(zhǔn)備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌,，常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性,，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的,。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大,，蒸汽溫度就越高,。因此，在同一溫度條件下,，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后,，其蛋白質(zhì)易于凝固變性,，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng)，殺菌效果好,。

HBsAg/FITC 熒光素標(biāo)記小鼠抗人乙肝表面抗原抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

DMBT1 (Deleted in malignant brain tumor 1) DMBT1抑癌基因抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Apelin receptor抗體  Apelin receptor/APJ receptor 0.1ml

ZIP Kinase 英文名稱： 凋亡相關(guān)蛋白激酶3抗體 0.1ml

DSN1 英文名稱： 著絲粒相關(guān)蛋白DSN1抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-Ephrin B(Ser300) 磷酸化Ephrin B抗體 規(guī)格 0.1ml

DMBT1 (Deleted in malignant brain tumor 1) DMBT1抑癌基因抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

MDC/CCL22 人巨噬細(xì)胞來源的趨化因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 CYP1A1 細(xì)胞色素P450 1A1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh NFATc1/NFAT2 活化T細(xì)胞核因子1蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

human MAX dimerization protein 1,mxd1 ELISA Kit 人MAX二聚化蛋白1 96T

Thrombomodulin 英文名稱： 凝血調(diào)節(jié)蛋白/血栓調(diào)節(jié)素抗體 0.1ml

CLIC2 英文名稱： 氯離子通道蛋白2抗體 0.1ml

 CYP1A1 細(xì)胞色素P450 1A1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Donkey  human IgG 驢抗人IgG 1mg

FRMD6 英文名稱： FRMD6蛋白抗體 0.2ml

血紅素抗體  Heamachrome 0.2ml

 PKC alpha/FITC 熒光素標(biāo)記蛋白激酶C α抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-RPS6KA1(Ser352) 磷酸化絲/蘇激酶p90RSK蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

Goat IgM (親和純化) 羊IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 1mg
XG惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞;SF-295京尼平苷酸乙酰黃芪皂苷I裂解液Ⅷ

京尼平苷酸(標(biāo)準(zhǔn)品)乙酰蒲公英萜裂解液Ⅸ

原兒茶酸,3,4-二羥基乙酰紫草素裂解液Ⅸ

原兒茶酸(標(biāo)準(zhǔn)品)異阿魏酸裂解液Ⅹ

原兒茶,3,4-二羥基甲異補(bǔ)骨脂素裂解液ⅩI

原兒茶(標(biāo)準(zhǔn)品)異佛手柑內(nèi)酯10％AEBSF溶液

甲砜霉素甘酯鹽酸鹽異甘草苷RIPA基礎(chǔ)裂解液

2.4-二羥基-6-甲基-煙酸乙酯異甘草素RIPA*裂解液