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當前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>天然蛋白、重組蛋白>>重組蛋白/RP>> 絲裂原激活蛋白激酶14(MAPK14)重組蛋白
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所 在 地上海市
更新時間:2023-03-21 19:08:52瀏覽次數(shù):253次
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主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Recombinant Mitogen Activated Protein Kinase 14 (M |
種屬 | Homo sapiens (Human,,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研實驗產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:絲裂原激活蛋白激酶14(MAPK14)重組蛋白
物種:Homo sapiens (Human,人)
英文名稱:Recombinant Mitogen Activated Protein Kinase 14 (MAPK14)
CSBP1; CSBP2; CSPB1; EXIP; Mxi2; PRKM14; PRKM15; RK; SAPK2A; P38; Mitogen-activated protein kinase p38 alpha; Cytokine suppressive anti-inflammatory drug-binding protein
信號轉(zhuǎn)導(dǎo)
酶與激酶
腫瘤免疫
感染免疫
物種:Homo sapiens (Human,,人) 來源:原核表達 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細胞定位::細胞核, 細胞質(zhì) 預(yù)測分子量:33.2kDa 實際分子量:32kDa(差異分析請參閱說明書) 片段與標簽:Glu19~Pro279 with N-terminal His Tag 緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300) 性狀:凍干粉 純度:> 95% 等電點:8.8 應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
相關(guān)產(chǎn)品:
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Recombinant Human LATS1宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
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標簽選擇:
親和標簽:蛋白重組表達過程中采用親和標簽融合表達有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易,;另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶。蛋白標簽可分兩類:一類是短肽類標簽,;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達,。使用不同的蛋白標簽需要根據(jù)具體案例來分析。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,,大致步驟如下:
真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:
a. 選擇表達載體和宿主細胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表達載體的構(gòu)建
c. 無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提
d. 細胞瞬時轉(zhuǎn)染
e. 表達小試,,條件優(yōu)化
f. 表達分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表達
h. 親和純化
i. 檢測和鑒定
原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:
a. 選擇表達載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉(zhuǎn)化表達菌株
e. 蛋白表達小試分析
f. 如果蛋白可溶,蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶,,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白,。
h. 鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白,;表達蛋白的分析,、純化、檢測
誘導(dǎo)表達成功后,,表達蛋白的分析,、純化、檢測應(yīng)該順當,,按一般的實驗步驟做沒太大的問題,。
操作步驟 :
根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM,。混勻備用(PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加),。
1,、樣品前處理:
a)對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS,、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍,。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,,使裂解液和細胞充分接觸,。
b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散,。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,,再用手指輕彈以充分裂解細胞,。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,,必需分裝成 50-100 萬細胞/管,,然后再裂解。
c)對于組織樣品: 把切成細小的碎片,。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,,可以適當減少裂解液的用量),。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解,。
2、后處理:
將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,,取上清,,即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE,、Western blotting 和免疫沉淀等操作
特點:
標記:標記反應(yīng)簡單,、溫和且很少抑制抗體活性,將與抗體共價結(jié)合是一種非常簡便,、直接的標記方法,。
酶標記:酶標記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當方法連接而成,其應(yīng)用范圍非常廣泛,,結(jié)果即時可見,、敏感性高。
熒光標記:熒光基團AbFluorTM是新型的熒光標記物之一,,產(chǎn)品覆蓋350-770nm,。不同的AbFluor基團經(jīng)恰當?shù)募す饪砂l(fā)光, 從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況,,主要用于細胞分選或高分辨率免疫染色,,是一種非常好的亞細胞水平定位的方法。
BIN2產(chǎn)品名稱: 乳相關(guān)蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
應(yīng)用類型: Other英文名稱: P14ARF英文別名: cyclin-dependent kinase inhibitor 2A; CDK4I; phospho-CXCR4 (Ser339)產(chǎn)品名稱: 細胞表面趨化因子受體4抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit
CHRNB2產(chǎn)品名稱: 型乙酰受體β2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow
ENPP2產(chǎn)品名稱: 核苷suan焦磷suanmei2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
C5產(chǎn)品名稱: 補體C5抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
Calpastatin產(chǎn)品名稱: 鈣蛋白mei蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow
MTNR1B產(chǎn)品名稱: 褪黑su受體1B抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog
HSD17B13產(chǎn)品名稱: 17β羥基類固醇脫氫mei13/17β-HSD13抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse, Rabbit
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絲裂原激活蛋白激酶14(MAPK14)重組蛋白人抗磷脂??贵w(IgA)ELISA試劑盒IgA抗磷脂??贵welisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Phosphatidylcholine Antibody IgA ELISA Kit
人抗磷脂抗體(Apl/APA)ELISA試劑盒Apl/APA抗磷脂抗體elisa檢測試劑盒Human anti-phospholipid antibody,Apl/APA ELISA Kit
人抗磷壁suan抗體(TA)ELISA試劑盒TA抗磷壁suan抗體elisa kitHuman anti-teichoic acid antibody,TA ELISA Kit
人抗淋巴細胞球蛋白(ALG)ELISA試劑盒ALG抗淋巴細胞球蛋白ELISA試劑盒Human anti-lymphocyte globulin,ALG ELISA Kit
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