公司產(chǎn)品僅供科研使用,，不得用于臨床！

商品介紹：

蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換,，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白,。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性,。

相關(guān)產(chǎn)品：

肌肉磷酸果糖激酶(PFKM)重組蛋白英文名稱：Recombinant Phosphofructokinase, Muscle (PFKM)Homo sapiens (Human,，人)

肌酸激酶B(CK-BB)活性蛋白英文名稱：Active Creatine Kinase B (CK-BB)Homo sapiens (Human，人)

肌酸激酶B(CK-BB)天然蛋白英文名稱：Native Creatine Kinase B (CK-BB)Mus musculus (Mouse,，小鼠)

肌酸激酶B(CK-BB)重組蛋白英文名稱：Recombinant Creatine Kinase B (CK-BB)Homo sapiens (Human,，人)   

注意事項(xiàng)：

1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,，應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時(shí)間,。

2,、雖然作用溫和,，但能硬化組織，固定時(shí)間過久會(huì)導(dǎo)致組織變脆,，切片時(shí)易碎,。因此固定時(shí)間通常不宜超過 24 小時(shí)。

3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,，使之不能充分暴露，可造成假陰性的染色,，影響免疫組化結(jié)果,。因此，4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時(shí),，有時(shí)需要對(duì)抗原先進(jìn)行修復(fù),，然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。

4,、本產(chǎn)品對(duì)人體有害,，操作時(shí)請(qǐng)小心，并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi),。

5,、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作                                            

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer,，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,，注意低溫操作,；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,，離心10000轉(zhuǎn)/分,，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,，即為全蛋白提取物,，蛋白定量（Bradford法,、BCA法）,；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后,，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上,，溫和振蕩15 min,；

6． 14,000rpm,，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法,、BCA法）,；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

MGAT5產(chǎn)品名稱: 糖蛋白GNTVA抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Rabbit

ANKRD28產(chǎn)品名稱: 錨蛋白重復(fù)域28抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

AD7c-NTP產(chǎn)品名稱: 神經(jīng)絲蛋白單克隆抗體交叉反應(yīng): Human

Bone Sialoprotein產(chǎn)品名稱: 骨涎蛋白交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse, GuineaPig

CEP63產(chǎn)品名稱: 中心體蛋白63抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Sheep

C1orf96產(chǎn)品名稱: 1號(hào)染色體開放閱讀框96抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Horse, Rabbit

RBM15產(chǎn)品名稱: RNA結(jié)合蛋白15抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep

應(yīng)用類型: Other英文名稱: Ephrin B2英文別名: EFN B2; EFNB 2; Efnb2; EFNB2_HUMAN; Eph related receptor tyrosine kinase ligand 5; EPH-related receptor tyrosine kinase ligand 5; ephrin B2; Ephrin-B2; EphrinB2; EPLG 5; EPLG5; Htk L; HTK ligand; HTK-L; HTKL; LERK 5; LERK-5; LERK5; Ligand of eph related kinase 5; MGC126226; MGC126227; MGC126228; OTTMUSP00000024973.

SORCS2產(chǎn)品名稱: 液泡蛋白分選受體SORCS2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

FAM193A產(chǎn)品名稱: FAM193A蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep   

蛋白O-甘露糖基轉(zhuǎn)移酶1(POMT1)重組蛋白人二酰甘油-O-?；D(zhuǎn)移mei同源物2(DGAT2)ELISA試劑盒DGAT2二酰甘油-O-?；D(zhuǎn)移mei同源物2elisa檢測試劑盒Human Diacylglycerol-O-Acyltransferase Homolog 2(DGAT2)ELISA Kit

人二羰基/L-木酮糖還原mei(DCXR)ELISA試劑盒DCXR二羰基/L-木酮糖還原meielisa kitHuman Dicarbonyl/L-Xylulose Reductase(DCXR)ELISA Kit

人二肽mei3(DPEP3)ELISA試劑盒DPEP3二肽mei3ELISA試劑盒Human Dipeptidase 3(DPEP3)ELISA Kit

人二肽mei2(DPEP2)ELISA試劑盒DPEP2二肽mei2elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Dipeptidase 2(DPEP2)ELISA Kit

人二肽基肽mei7(DPP7)ELISA試劑盒DPP7二肽基肽mei7elisa檢測試劑盒Human Dipeptidyl Peptidase 7(DPP7)ELISA Kit