公司產品僅供科研實驗產品屬性：

產品名稱：泛素樣修飾激活酶3(UBA3)重組蛋白   

物種：Homo sapiens (Human,，人)

英文名稱：Recombinant Ubiquitin Like Modifier Activating Enzyme 3 (UBA3)

UBE1C; NEDD8-Activating Enzyme E1 Catalytic Subunit; Ubiquitin-like modifier-activating enzyme 3; Ubiquitin-activating enzyme E1C

酶與激酶

特點：

標記：標記反應簡單,、溫和且很少抑制抗體活性,，將與抗體共價結合是一種非常簡便,、直接的標記方法。

酶標記：酶標記抗體是將酶與特異性抗體經適當方法連接而成，其應用范圍非常廣泛,，結果即時可見,、敏感性高,。

熒光標記：熒光基團AbFluorTM是新型的熒光標記物之一，產品覆蓋350-770nm,。不同的AbFluor基團經恰當的激光可發(fā)光,， 從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況，主要用于細胞分選或高分辨率免疫染色,，是一種非常好的亞細胞水平定位的方法,。

相關產品：
組織蛋白酶S(CTSS)重組蛋白Recombinant Otubain 1 (OTUB1)

組織蛋白酶K(CTSK)重組蛋白Recombinant Nei Endonuclease VIII Like Protein 1 (NEIL1)

組織蛋白酶H(CTSH)重組蛋白Recombinant NEL Like Protein 2 (NELL2)

組織蛋白酶F(CTSF)重組蛋白Recombinant NADH Dehydrogenase, Quinone 1 (NQO1)

標簽選擇：

親和標簽：蛋白重組表達過程中采用親和標簽融合表達有兩方面的作用：一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易,；另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶,。蛋白標簽可分兩類：一類是短肽類標簽,；一類是長肽以融合蛋白（fused partner）形式共表達,。使用不同的蛋白標簽需要根據具體案例來分析,。

不同的系統步驟稍微有些不同的，大致步驟如下：

真核表達系統的重組蛋白表達步驟：

a.      選擇表達載體和宿主細胞（常用的CHO和HEK293）

b.      表達載體的構建

c.      無內毒素的質粒抽提

d.      細胞瞬時轉染

e.      表達小試,，條件優(yōu)化

f.       表達分析和鑒定（SDS-PGAE和WB）

g.      大量表達

h.      親和純化

i.        檢測和鑒定

原核表達系統的重組蛋白表達步驟：

a.      選擇表達載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉化表達菌株

e.      蛋白表達小試分析

f.       如果蛋白可溶,，蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶，則需要變復性來制備可溶蛋白,。

h.      鑒定,，包括SDS-PAGE和WB鑒定

GZMH蛋白；表達蛋白的分析,、純化、檢測

　　誘導表達成功后,，表達蛋白的分析,、純化、檢測應該順當,，按一般的實驗步驟做沒太大的問題,。

human CD45/AF594產品名稱: AF594標記小鼠抗人CD45單克隆抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian

MYPT1產品名稱: 肌球蛋白磷suanmei抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep

DSCC1產品名稱: DSCC1蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit

Claudin 3, 4, 6, 9產品名稱: 緊密連接蛋白3, 4, 6, 9抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Sheep

CHMP2A產品名稱: 乳標志物CHMP2A抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Sheep

CDC25C產品名稱: 細胞分裂周期蛋白25C單克隆抗體交叉反應: Human

HSF1產品名稱: 熱休克因子1抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit

UMOD產品名稱: 尿調節(jié)蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat

phospho-BCAR1 (Tyr249)產品名稱: 乳抗雌激su耐藥蛋白1抗體交叉反應: Human
泛素樣修飾激活酶3(UBA3)重組蛋白人G抗原4(GAGE4)ELISA試劑盒GAGE4G抗原4elisa檢測試劑盒Human G Antigen 4(GAGE4)ELISA Kit

人G抗原3(GAGE3)ELISA試劑盒GAGE3G抗原3elisa kitHuman G Antigen 3(GAGE3)ELISA Kit

人G抗原13(GAGE13)ELISA試劑盒GAGE13G抗原13ELISA試劑盒Human G Antigen 13(GAGE13)ELISA Kit

人G抗原10(GAGE10)ELISA試劑盒GAGE10G抗原10elisamei聯免疫試劑盒Human G Antigen 10(GAGE10)ELISA Kit

人G抗原1(GAGE1)ELISA試劑盒GAGE1G抗原1elisa檢測試劑盒Human G Antigen 1(GAGE1)ELISA Kit
操作步驟 ：

根據使用量，取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,，使 PMSF 的zui終濃度為 1mM,。混勻備用（PMSF 現用現加）,。

1,、樣品前處理：

a)對于貼壁細胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS,、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍,。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數下，使裂解液和細胞充分接觸,。

b)對于懸浮細胞：離心收集細胞,，用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,，再用手指輕彈以充分裂解細胞,。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,，必需分裝成 50-100 萬細胞/管,，然后再裂解。

c)對于組織樣品： 把切成細小的碎片,。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品,，可以適當減少裂解液的用量),。用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解,。

2,、后處理：

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清,，即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定,、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作