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當前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>天然蛋白、重組蛋白>>重組蛋白/RP>> 雙特異性磷酸酶9(DUSP9)重組蛋白
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所 在 地上海市
更新時間:2023-03-22 09:46:21瀏覽次數(shù):261次
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主要用途 | 僅供科研研究實驗 | 英文名稱 | Recombinant Dual Specificity Phosphatase 9 (DUSP9) |
物種 | Homo sapiens (Human,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用,,不得用于臨床!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
雙特異性磷酸酶9(DUSP9)重組蛋白 | Recombinant Dual Specificity Phosphatase 9 (DUSP9) | Homo sapiens (Human,,人) |
商品介紹:
MKP4; Map Kinase Phosphatase 4; Mitogen-activated protein kinase phosphatase 4 酶與激酶 物種:Homo sapiens (Human,人) 來源:原核表達 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細胞定位::n/a 預測分子量:- 實際分子量:-(差異分析請參閱說明書) 片段與標簽:N-terminal His Tag 緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.) 性狀:凍干粉 純度:> 97% 等電點:- 應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白,。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清),。
3.通過親和,離子交換,,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白,。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
相關(guān)產(chǎn)品:
Recombinant Human THRSP宿主: E.Coli標簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human FYN宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human STBD1宿主: E.Coli標簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
宿主: E.Coli標簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Mouse
注意事項:
1,、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,,應當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。
2,、雖然作用溫和,,但能硬化組織,固定時間過久會導致組織變脆,,切片時易碎,。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。
3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,,使之不能充分暴露,,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果,。因此,,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復,,然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作,。
4、本產(chǎn)品對人體有害,,操作時請小心,,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
5,、為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,,注意低溫操作,;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,,4℃離心5 min,;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預冷的離心管中,,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法,、BCA法),;
5. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,,吸去培養(yǎng)基后,,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
4. 細胞洗滌后,,轉(zhuǎn)至新的預冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,,4℃離心15min,,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法),;
7. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融,。
SPO11產(chǎn)品名稱: 減數(shù)分裂重組蛋白SPO11抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse
Complement component C6產(chǎn)品名稱: 補體C6抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Horse, Rabbit
CCR4產(chǎn)品名稱: 細胞表面趨化因子受體4抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat
Tuberin產(chǎn)品名稱: 馬鈴薯球蛋白(性硬化)抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
Aurora A產(chǎn)品名稱: 有絲分裂激meiA抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit
PTEN產(chǎn)品名稱: 一種腫基因抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat
C17orf78產(chǎn)品名稱: 17號染色體開放閱讀框78抗體交叉反應: Human
Angiotensin III產(chǎn)品名稱: 緊張suIII抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Horse
應用類型: Other英文名稱: GAPDH (Loading Control)英文別名: 38 kDa BFA-dependent ADP-ribosylation substrate; Aging-associated gene 9 protein; BARS-38; cb609; EC 1.2.1.12; G3PD; G3PDH; GAPD; Glyceraldehyde 3 phosphate dehydrogenase;Glyceraldehyde 3 phosphate dehydrogenase liver;Glyceraldehyde 3 phosphate dehydrogenase muscle; KNC-NDS6; MGC102544; MGC102546; MGC103190; MGC103191; MGC105239; MGC127711; MGC88685; OCAS, p38 component; OCT1 coactivator in S phase, 38-KD component; wu:fb33a10.
Nidogen產(chǎn)品名稱: 巢蛋白1抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Cow, Rabbit
雙特異性磷酸酶9(DUSP9)重組蛋白人細胞周期suB2(CCNB2)ELISA試劑盒CCNB2細胞周期suB2ELISA試劑盒Human Cyclin B2(CCNB2)ELISA Kit
人細胞周期suB(CCNB)ELISA試劑盒CCNB細胞周期suBelisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Cyclin B(CCNB)ELISA Kit
人細胞周期suA1(CCNA1)ELISA試劑盒CCNA1細胞周期suA1elisa檢測試劑盒Human Cyclin A1(CCNA1)ELISA Kit
人細胞周期suA(CCNA)ELISA試劑盒CCNA細胞周期suAelisa kitHuman Cyclin A(CCNA)ELISA Kit
人細胞粘附分子1(CADM1)ELISA試劑盒CADM1細胞粘附分子1ELISA試劑盒Human Cell Adhesion Molecule 1(CADM1)ELISA Kit
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