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行業(yè)產(chǎn)品
當(dāng)前位置:上海研生實(shí)業(yè)有限公司>>天然蛋白,、重組蛋白>>活性蛋白/AP>> 細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶2(ERK2)活性蛋白
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產(chǎn)品型號(hào)
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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2023-03-23 08:29:40瀏覽次數(shù):259次
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主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Active Extracellular Signal Regulated Kinase 2 (ER |
種屬 | Homo sapiens (Human,,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用,,不得用于臨床!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶2(ERK2)活性蛋白 | Active Extracellular Signal Regulated Kinase 2 (ERK2) | Homo sapiens (Human,,人) |
商品介紹:
MAPK1; P38; P40; ERK2; ERT1; MAPK2; P42MAPK; P42-MAPK; PRKM1; PRKM2; P41; P41mapk; P41-mapk; Mitogen-Activated Protein Kinase 1; Mitogen-activated protein kinase 2 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 酶與激酶 腫瘤免疫 物種:Homo sapiens (Human,,人) 緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300) 性狀:凍干粉 純度:> 95% 等電點(diǎn):7.0 應(yīng)用:Cellculture;ActivityAssays. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過(guò)親和,,離子交換,,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。
5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性,。
相關(guān)產(chǎn)品:
環(huán)加氧酶1(COX-1)重組蛋白R(shí)ecombinant Transketolase Like Protein 1 (TKTL1)
花生四烯酸脂加氧酶3(ALOXE3)重組蛋白R(shí)ecombinant Thimet Oligopeptidase 1 (THOP1)
花生四烯酸-5-脂加氧酶(5-LO)重組蛋白R(shí)ecombinant TANK Binding Kinase 1 (TBK1)
花生四烯酸-15-脂加氧酶(ALOX15)重組蛋白R(shí)ecombinant Mannose Phosphate Isomerase (MPI)
注意事項(xiàng):
1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來(lái)調(diào)整固定時(shí)間,。
2、雖然作用溫和,,但能硬化組織,固定時(shí)間過(guò)久會(huì)導(dǎo)致組織變脆,,切片時(shí)易碎,。因此固定時(shí)間通常不宜超過(guò) 24 小時(shí)。
3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,,使之不能充分暴露,,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果,。因此,,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測(cè)時(shí),有時(shí)需要對(duì)抗原先進(jìn)行修復(fù),,然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作,。
4、本產(chǎn)品對(duì)人體有害,操作時(shí)請(qǐng)小心,,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi),。
5、為了您的安全和健康,,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作,;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min,;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法,、BCA法),;
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,,吸去培養(yǎng)基后,,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
4. 細(xì)胞洗滌后,,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,,溫和振蕩15 min,;
6. 14,000rpm,,4℃離心15min,,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法),;
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
ZDBF2產(chǎn)品名稱: ZDBF2蛋白抗體交叉反應(yīng): Human
CGBP產(chǎn)品名稱: CpG結(jié)合蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep
CLK3產(chǎn)品名稱: 細(xì)胞分裂周期樣激mei3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse
CD79A產(chǎn)品名稱: CD79A抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Horse, Sheep
LRP1產(chǎn)品名稱: 受體相關(guān)蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep
DNAJC7產(chǎn)品名稱: DNAJC7蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
TOMM40產(chǎn)品名稱: TOMM40抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep
Transglutaminase 7產(chǎn)品名稱: 轉(zhuǎn)胺mei7抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
Cystatin C產(chǎn)品名稱: 胱抑suC/半胱氨suan蛋白mei劑C單克隆抗體交叉反應(yīng): Human
SCN3B產(chǎn)品名稱: 電壓門控鈉通道SCN3B蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, GuineaPig
細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶2(ERK2)活性蛋白大鼠神經(jīng)疾病靶標(biāo)酯mei(NTE)ELISA試劑盒NTE神經(jīng)疾病靶標(biāo)酯meielisamei聯(lián)免疫試劑盒Rat Neuropathy Target Esterase(NTE)ELISA Kit
大鼠氫離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATPmei溶mei體輔助蛋白2(ATP6AP2)ELISA試劑盒ATP6AP2氫離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATPmei溶mei體輔助蛋白2elisa檢測(cè)試劑盒Rat ATPase, H+ Transporting, Lysosomal Accessory Protein 2(ATP6AP2)ELISA Kit
大鼠鞘氨醇-1-磷suan磷suanmei2(SGPP2)ELISA試劑盒SGPP2鞘氨醇-1-磷suan磷suanmei2elisa kitRat Sphingosine-1-Phosphate Phosphatase 2(SGPP2)ELISA Kit
大鼠羥烷基輔meiA脫氫meiβ(HADHβ)ELISA試劑盒HADHβ羥烷基輔meiA脫氫meiβELISA試劑盒Rat Hydroxyacyl Coenzyme A Dehydrogenase Beta(HADHb)ELISA Kit
大鼠脯氨suan-4-羥化meiα多肽Ⅰ(P4Hα1)ELISA試劑盒P4Hα1脯氨suan-4-羥化meiα多肽Ⅰelisamei聯(lián)免疫試劑盒Rat Prolyl-4-Hydroxylase Alpha Polypeptide I(P4Ha1)ELISA Kit
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