細(xì)胞特性：

1)】組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽(yáng)性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%,。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌,。

5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：上皮樣，不規(guī)則細(xì)胞,，貼壁培養(yǎng),。
產(chǎn)品名稱(chēng)：腎癌細(xì)胞;A-498

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào)：YS-02X9762

細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長(zhǎng)良好，形態(tài)正常

儲(chǔ)存條件：2℃-8℃,，避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%,；Glutamax（invitrogen 35050061）,，1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070）,，1%,；雙抗，1%,。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,，細(xì)胞密度適合,，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,，而且消化時(shí)不容易分散,；

（2）凍存的密度不宜過(guò)低，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好,，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管）,，10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管,。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過(guò)度,，吹打不可太用力,，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,，不是加入凍存液再吹打,。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很?chē)?yán)格,，我從10%-90%都用過(guò),，問(wèn)題不大，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛,！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,，放在4度冰箱預(yù)冷,。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管,。

（5）關(guān)于“慢凍",，傳統(tǒng)的方法，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,，4度2h,，-20度2h或更長(zhǎng)，-80度過(guò)夜,，最后液氮,。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇,，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,，很方便，省了包棉花,、4度,、-20度了。

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱(chēng)量試劑：根據(jù)不同的菌類(lèi)和用途,，選擇適宜的培養(yǎng)基,，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱(chēng)量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),，標(biāo)記劃線(xiàn),，加熱溶解，補(bǔ)充水分,，測(cè)定酸堿度,，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi),。

（三）過(guò)濾：將玻璃漏斗置鐵架上,，再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過(guò)濾至透明,。

（四）分裝：將過(guò)濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL,；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好,，準(zhǔn)備滅菌,。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的,。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,，即壓力越大，蒸汽溫度就越高,。因此,，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下,，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性,，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng),，殺菌效果好。

CD64/PE 熒光素PE標(biāo)記球蛋白G Fc段受體IMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Elastin 彈性蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

活化轉(zhuǎn)錄因子4抗體  ATF4 0.1ml

ZFX 英文名稱(chēng)： 鋅指蛋白X染色體蛋白抗體 0.2ml

DUSP1 英文名稱(chēng)： 原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-eIF2 alpha (Ser51) 磷酸化真核啟動(dòng)因子2α抗體 規(guī)格 0.1ml

Elastin 彈性蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

TRAF2/TNF-R2 (TNF receptor-associated factor 2) 壞死因子受體相關(guān)因子2抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5ml

 CaMK2a 鈣/鈣調(diào)素依賴(lài)蛋白激酶2α抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh PDGF-A 血小板源性生長(zhǎng)因子-A抗體 規(guī)格 0.1ml

Alpha-1-Antichymotrypsin抗胰糜蛋白酶 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝

TLR3 英文名稱(chēng)： Toll樣受體3抗體 0.1ml

C5orf52 英文名稱(chēng)： 5號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框52抗體 0.2ml

 CaMK2a 鈣/鈣調(diào)素依賴(lài)蛋白激酶2α抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Dog IgM 兔抗犬IgM抗體 0.1ml

FUT11 英文名稱(chēng)： 巖藻糖轉(zhuǎn)移酶11抗體 0.2ml

兔抗非洲爪蟾IGC抗體  IGC 1ml

 PPAR Gamma /FITC 熒光素標(biāo)記過(guò)氧化酶活化增生受體γ抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Rad17 (Ser645) 磷酸化細(xì)胞周期檢控Rad17蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit  Bovine IgM Whole serum 兔抗IgM抗血清Multi-class antibodies規(guī)格： 1ml
腎癌細(xì)胞;A-498環(huán)素(國(guó)產(chǎn))番瀉苷C轉(zhuǎn)基因玉米MON863品系基因定性檢測(cè)試劑盒

乙基氫化銅蛋白,鹽酸奧普托欣番瀉苷D轉(zhuǎn)基因玉米MON863品系基因定量檢測(cè)試劑盒

莫西菌素,莫西克汀蜂斗菜內(nèi)酯轉(zhuǎn)基因玉米MON810品系基因檢測(cè)試劑盒

莫西菌素,莫西克汀(標(biāo)準(zhǔn)品)佛手柑內(nèi)酯轉(zhuǎn)基因玉米Bt11品系基因檢測(cè)試劑盒

氨農(nóng)Q10轉(zhuǎn)基因玉米Bt176（maximizer）品系基因檢測(cè)試劑盒

農(nóng)(標(biāo)準(zhǔn)品)甘草查爾酮A轉(zhuǎn)基因玉米GA21品系基因檢測(cè)試劑盒

角叉菜膠;卡拉膠甘草次酸轉(zhuǎn)基因玉米T14品系基因檢測(cè)試劑盒

牛磺膽酸-3-硫酸酯二鈉鹽甘草苷轉(zhuǎn)基因玉米T25品系基因檢測(cè)試劑盒